Лечение остеоартрита стромально-сосудистой фракцией абдоминальной жировой ткани - экспериментальное исследование

Актуальность темы Остеоартроз (ОА) коленного сустава является деструктивным заболеванием суставов, вызывающим дегенерацию хряща, повреждение подлежащей кости и морфологические изменения в суставе1. Это серьезная проблема общественного здравоохранения из-за увеличения продолжительности жизни стареющего населения2,3. В настоящее время не существует одобренного медицинского лечения, которое обращает вспять морфологические изменения. Традиционное лечение включает физиотерапию, болеутоляющие средства, корсеты и хирургическую замену коленного сустава в терминальной стадии ОА4.

Лечение остеоартрита с помощью Paqe 3 Версия 2 Стромально-васкулярная фракция жировой ткани 02-11-2015 В течение последнего десятилетия исследователи начали изучать регенеративный потенциал мезенхимальных стволовых клеток (МСК) при ОА5. МСК представляют собой мультипотентные клетки-предшественники, способные давать остеоциты, адипоциты, хондроциты, миобласты и теноциты6. МСК были впервые использованы для лечения хондральных дефектов в 19987 году и для лечения ОА в 2002 году8. С тех пор было опубликовано несколько клинических случаев и проспективных серий, демонстрирующих значительное краткосрочное и долгосрочное влияние на боль и толщину хряща5. Недавно в проспективной серии случаев 1128 пациентов с поражением 1856 суставов применяли стромально-васкулярную фракцию абдоминальной жировой ткани (СВФ), которая является богатым источником мезенхимальных стволовых клеток. 86% пролеченных пациентов продемонстрировали улучшение не менее чем на 50% по модифицированной шкале исходов остеоартрита коленного/тазобедренного сустава (KOOS/HOOS) через 3 месяца и 129. Только 0,9% пациентов не ответили на лечение, не показав улучшения после лечения. Никаких серьезных побочных эффектов, таких как инфекции или образование опухолей, не наблюдалось9, что соответствует предыдущим исследованиям10. Неманипулируемая или минимально манипулируемая клеточная терапия использовалась при широком спектре заболеваний, включая инсульт, инфаркт миокарда, болезнь Крона, ревматоидный артрит и увеличение груди. Опубликовано более 17 000 научных статей, в которых сообщается о лечении более 320 000 пациентов11. Серьезных проблем с безопасностью не возникало12.

Мезенхимальные стволовые клетки могут быть получены из костного мозга или жировой ткани5. Большинство исследований было проведено на стволовых клетках, полученных из костного мозга, но в последние годы была опубликована серия исследований, демонстрирующих многообещающий эффект мезенхимальных стволовых клеток, полученных из жировой ткани (AMSC). С помощью AMSC можно собрать большое количество клеток из небольшого объема ткани, что позволяет избежать дорогостоящего и трудоемкого процесса размножения клеток в культуре5,9. Было показано, что в абдоминальной жировой ткани концентрация AMSC в 1000 раз выше, чем в других исследованных жировых тканях9. Это открывает возможность одноэтапной процедуры, при которой клетки собираются и вводятся за одно посещение амбулаторной клиники. Оптимальная доза AMSC неизвестна, но эффект, по-видимому, зависит от дозы, при этом желательны дозы около 1,0 x 108 AMSC на инъекцию5,9. Стромально-васкулярная фракция абдоминальной жировой ткани является богатым источником мезенхимальных стволовых клеток, полученных из жировой ткани.

В 2014 г. система Lipogems была запущена как готовый коммерческий продукт: http://lipogems.eu/. Система Lipogems представляет собой безэнзимную технологию, разработанную для переработки липоаспиратов в закрытой системе, в результате чего получается продукт из нерастянутой жировой ткани, содержащий SVF13. Прежде чем использовать этот продукт в больших масштабах, необходимо провести контролируемое исследование его осуществимости и безопасности.

Цель исследования Изучить возможность и краткосрочные вопросы безопасности лечения остеоартрита коленного сустава внутрисуставной инъекцией стромально-васкулярной фракции абдоминальной жировой ткани (СВФ), собранной и подготовленной с использованием системы Lipogems.

Настоящим мы хотим проложить дорогу для высококачественного рандомизированного контролируемого исследования, изучающего эффективность лечения остеоартрита коленного сустава с помощью СВФ, с учетом результатов, сообщаемых пациентами, функции, гомеостаза сустава и регенерации хряща.

6 Лечение Пациентов, участвующих в исследовании, лечат в соответствии с Датскими национальными клиническими рекомендациями для людей с остеоартритом16. Они получают три месяца физиотерапии, консультируются по оптимальному медикаментозному лечению обезболивающими препаратами, а людям с ИМТ выше 28 предлагается консультация диетолога.

6.1 Описание активного лечения Активное лечение представляет собой внутрисуставную инъекцию стромально-васкулярной фракции (СВФ), полученной из собственной абдоминальной подкожной жировой ткани пациента. SVF собирают с помощью системы Lipogems.

6.1.1 Забор СВФ Забор СВФ проводится в стерильных условиях в поликлинике. Пациент располагается на спине на кушетке для осмотра. Область, из которой будет взята ткань, отмечается на коже хирургическим маркером. Район ок. 8 см (кранио-каудально) х 20 см (латерально) и расположен чуть ниже пупка. На всю область наносится местная анестезия суспензией карбокаина 1%, 200 мл изотонического раствора, адреналина и 10 ммоль бикарбоната. Хирургическую чистку проводят дважды и накладывают стерильную простыню. Через колотый разрез в подкожно-жировую клетчатку вводят берущую иглу и производят отсасывание. Собирают от 20 до 40 мл подкожной жировой ткани. В конце процедуры кожу закрывают пластырем.

6.1.2 Подготовка СВФ к имплантации Шприцы с подкожным аспиратом готовят с помощью системы Lipogems. Система Lipogems представляет собой безэнзимную технологию, разработанную для обработки различных количеств липоаспиратов в закрытой системе, что приводит к получению нерасширенного продукта жировой ткани, содержащего СВФ. Технология работает за счет мягкого механического уменьшения размера кластера ткани. Тем самым избегая использования каких-либо ферментов и дополнительной обработки (например, центрифугирования и субфракционного сбора)13. 6.1.3 Имплантация СВФ Имплантация СВФ проводится в стерильных условиях в поликлинике. Пациента укладывают на спину на кушетке с вытянутым коленным суставом. Пальпируется верхний полюс надколенника, а мыщелок бедренной кости отмечается хирургическим маркером. С помощью УЗИ локализуют надколенниковое углубление, на место инъекции наносят местную анестезию и дважды проводят хирургическую чистку. Инъекция СВФ в надколенниковое углубление осуществляется с помощью шприца 21 калибра под прямой визуализацией с помощью ультразвука. В конце процедуры кожу закрывают пластырем.

6.1.4 Контроль дозы вводимого СВФ Контроль дозы АМСК во вводимом СВФ проводят после инъекции. Вследствие благоприятной логистической схемы, когда сбор и имплантация выполняются в рамках одноэтапной процедуры, невозможно подсчитать AMSC перед инъекцией. Вместо этого один мл раствора отправляется на подсчет клеток в патологическое отделение.