Vliv kouření a jeho odvykání na systémovou aktivaci imunity a imunity dýchacích cest
Přehled studie
Postavení
Detailní popis
Pro Cíl 1 bude přijato celkem až 30 pacientů s onemocněním HIV, kteří nikdy nekouřili, přičemž nábor se zastaví před 30 vzorky, pokud byly získány vzorky od 20 pacientů, které lze použít k analýze. Těchto 20 vzorků nekuřáků bude porovnáno se vzorky 20 aktivních kuřáků s onemocněním HIV, bez průkazu CHOPN ze spirometrie, kteří se shodují v demografii. Kuřáci, kteří mají zájem o účast v programu odvykání kouření, budou pro všechny následující studijní návštěvy odkázáni na naše oddělení klinických studií (CTU).
Navíc srovnávací skupina 20 neinfikovaných kuřáků, kteří již byli zařazeni do spoluřešitele (Dr. Kwon) studie bude použita jako srovnávací skupina. Tito účastníci mají podobná kritéria pro zařazení/vyloučení jako tato studie a bylo ověřeno, že jsou negativní na HIV protilátky. Vyšetřovatelé získají deidentifikované vzorky a imunologická a virologická data, která již shromáždil Dr. Kwon. Deidentifikované vzorky PBMC, plazmy a BAL nám budou také přístupné pomocí dohody o přenosu materiálu k provedení profilování epiteliální transkripční genové exprese.
Pro Cíl 2 bude přijato celkem 100 jedinců infikovaných HIV na účinné ART, kteří jsou aktivními kuřáky a mají zájem zúčastnit se programu pro odvykání kouření. Pokud se zaregistruje 30 jedinců, kteří dosáhnou 10týdenního odvykání, než se plně zapíše 100 kuřáků HIV, registrace se zastaví, protože 100 účastníků je nadhodnocené množství pacientů, které je třeba zapsat, aby 30 subjektů dosáhlo úspěšného odvykání kouření. Stejně jako u nekuřáků se nábor pro obě kohorty kuřáků zastaví před 30. hodinou, pokud byly získány vzorky od 20 pacientů, které lze použít k analýze. Maximální celkový počet pacientů potřebných pro grant je 130 (100 HIV kuřáků, 30 HIV nekuřáků).
Asi 130 účastníků se bude rekrutovat z ambulantní kliniky BMC Center for Infectious Diseases (CID), dalších ambulancí v rámci BMC, přidružených komunitních zdravotních center (CHC), BWH, MGH, Tufts Medical Center a Beth Israel Deaconess Medical Center. Klinika BMC CID slouží největší populaci infikované HIV v Bostonu, přibližně 1 700 osobám, a tvoří ji převážně městská socioekonomicky znevýhodněná populace. Více než 50 % pacientů infikovaných HIV v CID jsou kuřáci a > 60 % (na základě anamnézy preskripce NRT, bupropionu, vareniklinu) se pokusilo přestat kouřit. Účastníci budou vybráni z letáků, registru BMC ReSPECT, screeningu lékařských záznamů a doporučení lékařů.
Typ studie
Zápis (Aktuální)
Fáze
- Nelze použít
Kontakty a umístění
Studijní místa
-
-
Massachusetts
-
Boston, Massachusetts, Spojené státy, 02118
- Boston Medical Center
-
-
Kritéria účasti
Kritéria způsobilosti
Věk způsobilý ke studiu
Přijímá zdravé dobrovolníky
Popis
Kritéria pro zařazení.
- HIV infikované na ART ≥ 6 měsíců
- Virologicky potlačeno (<50 cop/ml) v době zařazení (laboratorní test do 3 měsíců)
Stav kouření:
V současné době aktivní kuřák: Pravidelné užívání cigaret podle vlastní zprávy s pozitivním testem kotininu při screeningové návštěvě.
NEBO Nekuřák: nekuřáci, kteří byli sami hlášeni, potvrzeni negativním kotininovým testem při screeningové návštěvě.
Laboratorní hodnoty do 3 měsíců před zápisem, které splňují následující kritéria:
- Hemoglobin ≥ 8,0 g/dl
- Počet krevních destiček ≥ 80 000/mm3
- Pro ženy ve fertilním věku: Negativní těhotenský test z moči (citlivý na 25 IU HCG) při screeningové návštěvě.
Pro účely této studie je žena považována za ženu v plodném věku, pokud:
- Trvale sterilní (zahrnuje hysterektomii, bilaterální ooforektomii nebo bilaterální salpingektomii)
- Lékařsky zdokumentované selhání vaječníků
- Postmenopauzální, definovaná jako věk ≥ 55 let s ukončením menstruace na ≥ 12 měsíců
Kritéria vyloučení:
- Těhotné nebo kojící nebo méně než 8 týdnů po porodu.
- Aktivní malignita a souběžná léčba (tj. chemoterapie, radioterapie, výzkumná léčba).
- Závažná imunologická onemocnění/nedostatky
- Nedávné aktivní onemocnění během posledního 1 měsíce (tj. respirační virové infekce, pneumonie, bakteriální infekce, infekce kostí)
- Anamnéza tuberkulózy, rakoviny plic, bronchiektázie, plicní fibrózy nebo plicní hypertenze
- Pravidelné nebo rekreační užívání inhalačních látek (jako je marihuana, crack, fentanyl, heroin, vodní dýmka, e-cigarety) a žvýkání tabáku během posledního měsíce. Zprávy o žádném takovém použití během posledního měsíce budou potvrzeny screeningem toxinů v moči provedeným při screeningové návštěvě.
- Samostatně hlášené pravidelné užívání inhalačních látek (jako je crack, fentanyl, heroin, vodní dýmka, e-cigarety) v minulosti (před 1 měsícem a během posledních 5 let), přičemž užívání probíhalo déle než 1 rok. (Užívání marihuany je povoleno.)
- Kritéria spirometrie FEV1/FVC < 0,7 (definice CHOPN) a GOLD (těžká až velmi závažná) stadium 3 nebo 4 během posledních 12 měsíců
- Anamnéza závislosti na alkoholu během 6 měsíců před zařazením
- Anamnéza intolerance, citlivosti, alergie nebo anafylaxe na lidokain nebo jiná amidová anestetika, stejně jako na benzokain nebo jiná anestetika esterového typu
- Nedávný infarkt myokardu v anamnéze (během posledních 6 měsíců). Nekoronární ischemie IM je povolena (tj. vyvolané kokainem)
- Chronické selhání ledvin vyžadující dialýzu
- Dekompenzovaná cirhóza
- V současné době užíváte antikoagulancia, mimo jiné: heparin (Hep-Lock, Hep-Pak), Hep-Pak CVC, Heparin Lock Flush), warfarin (Coumadin), tinzaparin (Innohep), enoxaparin (Lovenox), danaparoid (Orgaran), dalteparin (Fragmin), klopidogrel (Plavix), profylaktické užívání aspirinu a NSAID a nelze přestat 48 hodin před bronchoskopií
- Užívání některého z následujících léků během 30 dnů před zařazením do studie: systémové steroidy (inhalační nebo nazální steroidní terapie je povolena), interleukiny, systémové interferony (např. je povolena lokální injekce interferonu alfa k léčbě HPV) nebo systémová chemoterapie, anti- látky TNF
- Nedávná operace břicha (během posledních 3 měsíců)
- Nedávná operace očí (během posledních 3 měsíců)
- Diskrétnost vyšetřovatele
Studijní plán
Jak je studie koncipována?
Detaily designu
- Primární účel: Základní věda
- Přidělení: Nerandomizované
- Intervenční model: Paralelní přiřazení
- Maskování: Žádné (otevřený štítek)
Zbraně a zásahy
Skupina účastníků / Arm |
Intervence / Léčba |
|---|---|
|
Jiný: Kuřáci
HIV pozitivní kuřáci budou zařazeni do programu odvykání kouření, který zahrnuje následující postupy: Poradna Odvykání kouření Drogy Dotazníky Odběr krve Bronchoskopie |
Poradenství pro odvykání kouření
Lék na podporu odvykání kouření
Bronchoskopie
Screening a výzkum odběrů krve
Behaviorální dotazníky
|
|
Jiný: Nekuřáci
HIV pozitivní nekuřáci budou zařazeni jako srovnávací skupina s HIV pozitivními kuřáky a budou mít následující postupy: Dotazníky Odběr krve Bronchoskopie |
Bronchoskopie
Screening a výzkum odběrů krve
Behaviorální dotazníky
|
Co je měření studie?
Primární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Rozdíl v imunitních podskupinách T buněk a monocytů, úroveň aktivace
Časové okno: 12. týden
|
Alikvoty BAL a PBMC budou barveny na povrchové protilátky, aby se rozlišily diferenciační a aktivační markery.
Monocytární buňky budou fenotypovány pomocí CD3, CD19 a CD56, všechny na FITC, CD14 BUV 395, CD16 BV510, CCR2 PE, CX3CR1 APC, CD11c PEcf594, CD80 BV 421, CD86 BV 605 a 78e, CD85, CD85, fixovatelný Cyklus, CD85, CD87 životaschopné barvivo.
Populace T buněk budou barveny na CD3, CD4, CD8, CD45RA, CCR7, CD27 a CD28; aktivační stav expresí CD25, CD38, CD69, HLA-DR, OX40.
Zda se jedná o buňky typu Th2/Tc2 určíme expresí CCR4, CCR8, T1/ST2, CRTH2.
Průtok bude proveden na LSRII (BD) a analyzován pomocí FlowJo (Tree Star).
|
12. týden
|
Sekundární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Rozdíl v hladinách plazmatických zánětlivých markerů
Časové okno: 12. týden
|
Pro analýzu hladin zánětlivých proteinů bude tekutina BAL koncentrována 10krát pomocí filtru Centricon (Millipore) s mezní hodnotou 3 000 MW.
Zjistili jsme, že testování na cytokiny je spolehlivější, když je BAL koncentrován 10krát, protože BAL je postupem zředěn ~100krát.
sCD14 (R&D) a iFABP (Hycult) budou měřeny pomocí ELISA.
LPS bude měřen pomocí LAL testu (Pierce) a sCD163 (Trillium Diag).
Další lidské cytokiny spojené se zánětlivými procesy, včetně TNF-α, IFN-α/g, IL-6/7/10, IP-10 a MCP-1, budou měřeny pomocí Milliplex cytokine-kitu (Millipore), čtěte dále Luminex 100 a analyzovány pomocí softwaru Beadview (Upstate Cell).
|
12. týden
|
|
Rozdíly v úrovni oxidačního stresu
Časové okno: 12. týden
|
Buňky z krve a BAL budou stimulovány s PMA a bez PMA po dobu 30 minut.
a inkubovány s DHR123 pro přímou detekci intracelulární produkce ROS.
Buňky budou barveny fluorescenčními protilátkami rozpoznávajícími markery linie pro T buňky (CD3, CD4, CD8), makrofágy (CD14), B buňky (CD19, CD20) a granulocyty (CD66b).
|
12. týden
|
|
Rozdíly v míře míry reziduální virémie HIV
Časové okno: 12. týden
|
Změřte hladiny HIV-1 ca-DNA, ca-RNA a 2-LTR kroužků ve vzorcích BAL a PBMC odebraných od kuřáků infikovaných HIV versus nekuřáků.
Buněčná DNA a RNA z PBMC a BAL buněk budou extrahovány pomocí AllPrep DNA/RNA mini kit (Qiagen).
HIV-1 ca-DNA bude kvantifikována pomocí citlivého kvantitativního testu PCR (qPCR) pro měření konzervované oblasti LTR/gag96 a modifikována v naší laboratoři 118.
Měření ca-DNA budou uváděna jako kopie buněk HIV DNA/106.
Kvantifikace konzervované oblasti lidského CCR5 bude použita ke stanovení počtu buněk v každé jamce vzorku.
|
12. týden
|
|
Rozdíly v transkripčním profilu dýchacích cest
Časové okno: 12. týden
|
Porovnejte profily genové exprese mezi kuřáky a nekuřáky HIV.
Příprava knihovny pro sekvenování RNA bude provedena pomocí soupravy TruSeq RNA Sample Prep Kit v2 společnosti Illumina s použitím 200-500 ng celkové RNA z každého čištění bronchiálního epitelu.
Stručně, RNA bude izolována pomocí poly(A) selekce, fragmentována do rozsahu délek soustředěných kolem 200 párů bází a náhodně připravena pro reverzní transkripci následovanou syntézou prvního a druhého vlákna, aby se vytvořily fragmenty dvouvláknové cDNA.
Následně budou tyto fragmenty podrobeny PCR amplifikaci, purifikaci a budou použity pro generování klastrů na stroji cBot pomocí Illumina TruSeq Paired-End Cluster Generation Kit.
|
12. týden
|
Spolupracovníci a vyšetřovatelé
Sponzor
Spolupracovníci
Vyšetřovatelé
- Vrchní vyšetřovatel: Archana Asundi, M.D., Boston Medical Center
Termíny studijních záznamů
Hlavní termíny studia
Začátek studia (Aktuální)
Primární dokončení (Aktuální)
Dokončení studie (Aktuální)
Termíny zápisu do studia
První předloženo
První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality
První zveřejněno (Odhadovaný)
Aktualizace studijních záznamů
Poslední zveřejněná aktualizace (Aktuální)
Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality
Naposledy ověřeno
Více informací
Termíny související s touto studií
Další identifikační čísla studie
- H-35295
- R01DA042685-02 (Grant/smlouva NIH USA)
Plán pro data jednotlivých účastníků (IPD)
Plánujete sdílet data jednotlivých účastníků (IPD)?
Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty
Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA
Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA
produkt vyrobený a vyvážený z USA
Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .