Влияние курения и отказа от него на активацию системного иммунитета и иммунитета дыхательных путей
Обзор исследования
Статус
Подробное описание
Для цели 1 будет набрано в общей сложности до 30 пациентов с ВИЧ-инфекцией, которые никогда не курили, с прекращением набора до 30 образцов, если были получены образцы от 20 пациентов, которые можно использовать для анализа. Эти 20 образцов некурящих будут сравниваться с образцами 20 активных курильщиков с ВИЧ-инфекцией без признаков ХОБЛ по данным спирометрии, которые совпадают по демографическим характеристикам. Курильщики, которые заинтересованы в участии в программе по прекращению курения, будут направлены в наш отдел клинических испытаний (CTU) для всех последующих учебных визитов.
Кроме того, группа сравнения из 20 неинфицированных курильщиков, которые уже были включены в исследование соисследователя (д-р. Kwon) будет использоваться в качестве группы сравнения. Эти участники имеют те же критерии включения/исключения, что и это исследование, и подтверждено отсутствие антител к ВИЧ. Исследователи получат обезличенные образцы, а также иммунологические и вирусологические данные, уже собранные доктором Квоном. Деидентифицированные образцы PBMC, плазмы и БАЛ также будут доступны для нас по соглашению о передаче материала для выполнения профилирования экспрессии генов эпителиальной транскрипции.
Для достижения цели 2 будет набрано в общей сложности 100 ВИЧ-инфицированных, получающих эффективную АРТ, которые являются активными курильщиками и заинтересованы в участии в программе по прекращению курения. Если 30 человек, достигших 10-недельного отказа от курения, будут зачислены до того, как 100 курильщиков с ВИЧ будут полностью зачислены, зачисление прекратится, поскольку 100 участников — это завышенная оценка числа пациентов, необходимых для того, чтобы 30 субъектов достигли успешного отказа от курения. Как и в случае с некурящими, набор для обеих когорт курильщиков прекратится до 30 лет, если будут получены образцы от 20 пациентов, которые можно использовать для анализа. Максимальное общее количество пациентов, необходимых для получения гранта, составляет 130 человек (100 ВИЧ-курящих, 30 ВИЧ-некурящих).
Около 130 участников будут набраны из амбулаторной клиники Центра инфекционных заболеваний BMC (CID), других амбулаторных клиник BMC, дочерних общественных медицинских центров (CHC), BWH, MGH, Медицинского центра Тафтса и Медицинского центра Бет Исраэль Диаконисс. Клиника BMC CID обслуживает самое многочисленное ВИЧ-инфицированное население Бостона, примерно 1700 человек, и состоит в основном из городского населения, находящегося в неблагоприятном социально-экономическом положении. Более 50 % ВИЧ-инфицированных пациентов с CID являются курильщиками, и > 60 % (на основании истории назначения НЗТ, бупропиона, варениклина) пытались бросить курить. Участники будут набраны из листовок, реестра BMC ReSPECT, скрининга медицинских карт и направлений от врачей.
Тип исследования
Регистрация (Действительный)
Фаза
- Непригодный
Контакты и местонахождение
Места учебы
-
-
Massachusetts
-
Boston, Massachusetts, Соединенные Штаты, 02118
- Boston Medical Center
-
-
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
Принимает здоровых добровольцев
Описание
Критерии включения.
- ВИЧ-инфицированные на АРТ ≥ 6 месяцев
- Вирусологически подавленный (<50 коп/мл) на момент включения (лабораторный тест в течение 3 месяцев)
Статус курения:
Активный курильщик в настоящее время: Самооценка регулярного курения сигарет с положительным тестом на котинин при скрининговом посещении.
ИЛИ Некурящие: некурящие, о которых сообщают сами, подтвержденные отрицательным тестом на котинин при скрининговом посещении.
Лабораторные показатели за 3 месяца до зачисления, соответствующие следующим критериям:
- Гемоглобин ≥ 8,0 г/дл
- Количество тромбоцитов ≥ 80 000/мм3
- Для женщин детородного возраста: отрицательный тест мочи на беременность (чувствительный к 25 МЕ ХГЧ) при скрининговом посещении.
Для целей настоящего исследования считается, что женщина имеет детородный потенциал, если:
- Постоянная стерильность (включая гистерэктомию, двустороннюю овариэктомию или двустороннюю сальпингэктомию)
- Медицински подтвержденная недостаточность яичников
- Постменопауза, определяемая как возраст ≥ 55 лет с прекращением менструаций в течение ≥ 12 месяцев.
Критерий исключения:
- Беременность или кормление грудью или менее 8 недель после родов.
- Активное злокачественное новообразование и одновременное лечение (т.е. химиотерапия, лучевая терапия, экспериментальное лечение).
- Серьезные иммунологические заболевания/дефициты
- Недавнее активное заболевание в течение последнего 1 месяца (т. респираторно-вирусная инфекция, пневмония, бактериальные инфекции, инфекция костей)
- История туберкулеза, рака легких, бронхоэктазов, легочного фиброза или легочной гипертензии
- Самооценка регулярного или рекреационного употребления вдыхаемых веществ (таких как марихуана, крэк, фентанил, героин, кальян, электронные сигареты), а также жевание табака в течение последнего месяца. Сообщения об отсутствии такого употребления в течение последнего месяца будут подтверждены анализом мочи на токсичность, проводимым во время скринингового визита.
- Самоотчет о регулярном употреблении вдыхаемых веществ (таких как крэк, фентанил, героин, кальян, электронные сигареты) в прошлом (до 1 месяца назад и в течение последних 5 лет), причем употребление длилось > 1 года. (Употребление марихуаны разрешено.)
- Критерии спирометрии ОФВ1/ФЖЕЛ < 0,7 (определение ХОБЛ) и GOLD (тяжелая-очень тяжелая) Стадия 3 или 4 в течение последних 12 месяцев
- История алкогольной зависимости в течение 6 месяцев до зачисления
- Непереносимость, чувствительность, аллергия или анафилаксия в анамнезе на лидокаин или другие амидные анестетики, а также на бензокаин или другие анестетики эфирного типа.
- История недавно перенесенного инфаркта миокарда (в течение последних 6 месяцев). Допускается ИМ некоронарной ишемии (т.е. кокаин-индуцированный)
- Хроническая почечная недостаточность, требующая диализа
- Декомпенсированный цирроз
- В настоящее время принимает антикоагулянты, включая, но не ограничиваясь: гепарин (Hep-Lock, Hep-Pak), Hep-Pak CVC, Hep-Pak CVC, Heparin Lock Flush), варфарин (Coumadin), тинзапарин (Innohep), эноксапарин (Lovenox), данапароид (Orgaran), дальтепарин (фрагмин), клопидогрел (плавикс), профилактический прием аспирина и НПВП и невозможность прекратить прием в течение 48 часов до бронхоскопии
- Прием любого из следующих препаратов в течение 30 дней до регистрации: системные стероиды (разрешена ингаляционная или назальная стероидная терапия), интерлейкины, системные интерфероны (например, разрешены местные инъекции интерферона альфа для лечения ВПЧ) или системная химиотерапия, анти- Агенты ФНО
- Недавняя абдоминальная операция (в течение последних 3 месяцев)
- Недавняя операция на глазах (в течение последних 3 месяцев)
- Усмотрение следователя
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
- Основная цель: Фундаментальная наука
- Распределение: Нерандомизированный
- Интервенционная модель: Параллельное назначение
- Маскировка: Нет (открытая этикетка)
Оружие и интервенции
Группа участников / Армия |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
Другой: Курильщики
ВИЧ-положительные курильщики будут включены в программу отказа от курения, включающую следующие процедуры: Консультирование Препараты для прекращения курения Анкеты Взятие крови Бронхоскопия |
Консультации по отказу от курения
Лекарство, помогающее бросить курить
Бронхоскопия
Скрининг и исследование крови
Поведенческие опросники
|
|
Другой: Некурящие
ВИЧ-позитивные некурящие будут включены в группу сравнения с ВИЧ-позитивными курильщиками и пройдут следующие процедуры: Анкеты Взятие крови Бронхоскопия |
Бронхоскопия
Скрининг и исследование крови
Поведенческие опросники
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
.Разница в иммунных субпопуляциях Т-клеток и моноцитов, уровень активации
Временное ограничение: Неделя 12
|
Аликвоты BAL и PBMC будут окрашены на поверхностные антитела, чтобы различать маркеры дифференцировки и активации.
Клетки моноцитов будут фенотипированы по CD3, CD19 и CD56, все на FITC, CD14 BUV 395, CD16 BV510, CCR2 PE, CX3CR1 APC, CD11c PEcf594, CD80 BV 421, CD86 BV 605, HLA-DR BV785, CD123 PE Cy7 и eFluor780 фиксируемые краситель жизнеспособности.
Популяции Т-клеток будут окрашиваться на CD3, CD4, CD8, CD45RA, CCR7, CD27 и CD28; статус активации по экспрессии CD25, CD38, CD69, HLA-DR, OX40.
Мы определим, являются ли они клетками типа Th2/Tc2, по экспрессии CCR4, CCR8, T1/ST2, CRTH2.
Flow будет выполнен на LSRII (BD) и проанализирован с помощью FlowJo (Tree Star).
|
Неделя 12
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Разница в уровнях маркеров воспаления в плазме
Временное ограничение: Неделя 12
|
Для анализа уровней воспалительного белка жидкость БАЛ будет концентрирована в 10 раз с использованием фильтра Centricon (Millipore) с отсечкой 3000 МВт.
Мы обнаружили, что анализ на цитокины более надежен, когда БАЛ концентрирован в 10 раз, поскольку БАЛ разбавляется в ~100 раз по процедуре.
sCD14 (R&D) и iFABP (Hycult) будут измеряться с помощью ELISA.
LPS будет измеряться с помощью анализа LAL (Pierce) и sCD163 (Trillium Diag).
Дополнительные цитокины человека, связанные с воспалительными процессами, включая TNF-α, IFN-α/g, IL-6/7/10, IP-10 и MCP-1, будут измеряться с использованием набора цитокинов Milliplex (Millipore), читайте далее. Luminex 100 и проанализированы с помощью программного обеспечения Beadview (Upstate Cell).
|
Неделя 12
|
|
Различия в уровне окислительного стресса
Временное ограничение: Неделя 12
|
Клетки из крови и BAL будут стимулироваться с PMA и без него в течение 30 мин.
и инкубировали с DHR123 для прямого обнаружения внутриклеточной продукции АФК.
Клетки окрашивают флуоресцентными антителами, распознающими маркеры линии Т-клеток (CD3, CD4, CD8), макрофагов (CD14), В-клеток (CD19, CD20) и гранулоцитов (CD66b).
|
Неделя 12
|
|
Различия в уровне измерения остаточной виремии ВИЧ
Временное ограничение: Неделя 12
|
Измерьте уровни ca-DNA, ca-RNA и 2-LTR ВИЧ-1 в образцах BAL и PBMC, взятых у ВИЧ-инфицированных курильщиков по сравнению с некурящими.
Клеточная ДНК и РНК из PBMC и клеток BAL будут экстрагированы с помощью мини-набора AllPrep DNA/RNA (Qiagen).
Ка-ДНК ВИЧ-1 будет количественно определена с помощью чувствительного количественного ПЦР (кПЦР) для измерения консервативной области LTR/gag96 и модифицирована в нашей лаборатории118.
Измерения ca-ДНК будут представлены как копии ДНК ВИЧ/106 клеток.
Количественное определение консервативной области CCR5 человека будет использоваться для определения количества клеток в каждой лунке с образцом.
|
Неделя 12
|
|
Различия транскрипционного профиля дыхательных путей
Временное ограничение: Неделя 12
|
Сравните профили экспрессии генов у ВИЧ-курящих и некурящих.
Подготовка библиотеки к секвенированию РНК будет выполняться с использованием набора Illumina TruSeq RNA Sample Prep Kit v2 с использованием 200–500 нг общей РНК из каждой щетки бронхиального эпителия.
Вкратце, РНК будет выделена с использованием поли(А)-селекции, фрагментирована на диапазон длин с центром около 200 пар оснований и случайным образом праймирована для обратной транскрипции с последующим синтезом первой и второй цепи для создания двухцепочечных фрагментов кДНК.
Впоследствии эти фрагменты будут подвергаться ПЦР-амплификации, очистке и использоваться для создания кластеров на машине cBot с использованием комплектов Illumina TruSeq для создания кластеров с парными концами.
|
Неделя 12
|
Соавторы и исследователи
Спонсор
Следователи
- Главный следователь: Archana Asundi, M.D., Boston Medical Center
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования (Действительный)
Первичное завершение (Действительный)
Завершение исследования (Действительный)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (Оцененный)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Действительный)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Другие идентификационные номера исследования
- H-35295
- R01DA042685-02 (Грант/контракт NIH США)
Планирование данных отдельных участников (IPD)
Планируете делиться данными об отдельных участниках (IPD)?
Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы
Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.
Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.
продукт, произведенный в США и экспортированный из США.
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .