Sérum na pupečník versus konvenční oční kapky

Toto je prospektivní, jednoduše zaslepená randomizovaná klinická studie provedená v University Kebangsaan Malaysia Medical Center (UKMMC). Pupečníkové sérum poskytne Pusat Darah Negara (Národní krevní centrum), Malajsie. Do této studie budou zapojeni všichni pacienti z Oční kliniky v UKM Medical Center od prosince 2019 do prosince 2021. Do této studie budou zařazeni pacienti, kteří splňují kritéria pro zařazení. Bude přijat informovaný souhlas a posouzení suchého oka, které zahrnuje zrakovou ostrost, skóre OSDI, Schirmerův test, NITBUT, barvení rohovky fluoresceinem, TMH a spojivkovou injekci. Pacienti budou randomizováni do 2 skupin; AT oční kapky a oční kapky UCS.

Vzorky lidské pupečníkové krve budou odebírány z Porodnice, Nemocnice Kuala Lumpur za asistence sester z Odběrové jednotky pupečníkové krve. Všechny vzorky krve matek byly odebrány po písemném informovaném souhlasu příslušných rodičů a podrobeny virologickému screeningu.

Národní krevní banka má postup pro virologický screening a všechna odebraná mateřská pupečníková krev bude vyšetřena na povrchový antigen Hep B, anti-HCV Ag/Ab, HIV Ag/Ab, syfilis a cytomegalovirové (CMV) IgM v transfuzní mikrobiologické laboratoři (akreditovaná podle ISO 15189 a CSL). Metoda, která byla použita při screeningu, jak je uvedeno níže:

• Povrchový antigen Hep B, Anti-HCV, HIV Ag/Ab: Chemiluminiscenční mikročásticový imunotest (CMIA).
• Syfilis: uhlíkový antigen (manuální)
• CMV IgM: Elektrochemiluminiscenční imunoanalýza (ECLIA)

Zatímco vzorky CB jsou testovány na bakteriologický screening před a po zpracování, aby byla zajištěna sterilita produktu. Pokud bude některý z laboratorních výsledků pozitivní nebo reaktivní, sérum bude zlikvidováno.

Odebraná pupečníková krev (CB) bude poté umístěna v inkubátoru v odběrovém centru, dokud nebudou vzorky pupečníkové krve odeslány do Národní krevní banky v ledovém boxu s teplotním záznamníkem. Jakmile se nádoba s ledem dostane do Národní krevní banky, MLT zkontroluje záznamník teploty a před zahájením výroby očních kapek séra UCS se ujistí, že jsou všechny údaje o teplotě v rozsahu (10-26oC).

CB bude zpracována v jednotce pro zpracování pupečníkové krve do 24 hodin od odběru, aby bylo zajištěno získání vysoce kvalitních bioaktivních molekul. Dvakrát denně bude monitorována laboratorní teplota místnosti, vlhkost a kyslík. Po příjezdu do zpracovatelské laboratoře se CB nechá asi 2 hodiny při pokojové teplotě, aby se CB úplně srazil. Po 15 minutách centrifugace při 3 000 × g za sterilních podmínek bude sérová frakce opatrně oddělena od buněčné frakce. Oddělené sérum se poté přenese do zkumavky tygon pomocí sterilního dokovacího zařízení a zředí se na 20% ředění vyváženým solným roztokem (BSS) bez jakýchkoli antibiotik a nakonec se zataví do 1-palcového segmentu sestávajícího z přibližně 1 ml sérových očních kapek. Segmentovaný UCS bude poté zmražen při -20 °C po dobu 3 až 6 měsíců nebo při -80 °C pro dlouhodobé skladování.

Z důvodu bezpečnosti a kvality budou zmrazené segmenty přepravovány do krevní banky UKMMC pomocí přepravního boxu naplněného suchým ledem, aby bylo zajištěno, že UCS jsou ve zmrazeném stavu a aby byla zachována kvalita produktu, dokud nedorazí na místo určení. Z krevní banky UKMMC si účastníci budou muset přinést zmrazené oční kapky UCS domů tím, že je převezou v chladicím boxu s ledovými balíčky. Doma bude třeba zmrazené oční kapky UCS uchovávat v domácí mrazničce. Zmrazené oční kapky UCS je nutné před použitím rozmrazit při pokojové teplotě a poté uchovávat v chladničce při teplotě 2–8 °C po dobu maximálně 24 hodin. Účastníkům bude poskytnut krátký návod k použití UCS. Do celého procesu nebudou zapojeny žádné vepřové/hovězí materiály.

Statistická analýza bude provedena pomocí Statistical Package for Social Science, verze 20.0 (SPSS, Inc., Chicago, III., USA) pro Windows. Porovnání středních hodnot mezi studijními skupinami lze provést pomocí Studentova T-testu za použití 2stranné analýzy. Srovnání středních hodnot pro sledování lze analyzovat pomocí ANOVA. Kategorické charakteristiky lze analyzovat pomocí chí-kvadrát. Rozdíly jsou považovány za statisticky významné u P