Siero del cordone ombelicale contro collirio convenzionale

Si tratta di uno studio clinico prospettico, in singolo cieco, randomizzato, condotto presso l'University Kebangsaan Malaysia Medical Center (UKMMC). Il siero del cordone ombelicale sarà fornito da Pusat Darah Negara (National Blood Centre), Malesia. Tutti i pazienti della clinica oftalmologica dell'UKM Medical Center da dicembre 2019 a dicembre 2021 saranno coinvolti in questo studio. I pazienti che soddisfano i criteri di inclusione saranno inclusi in questo studio. Verrà preso il consenso informato e la valutazione dell'occhio secco che include acuità visiva, punteggio OSDI, test di Schirmer, NITBUT, colorazione corneale con fluoresceina, TMH e iniezione congiuntivale. I pazienti saranno randomizzati in 2 gruppi; AT collirio e collirio UCS.

I campioni di sangue del cordone ombelicale umano saranno raccolti dal Maternity Hospital, Hospital Kuala Lumpur con l'assistenza delle infermiere dell'Unità di raccolta del sangue cordonale. Tutti i campioni di sangue materno sono stati raccolti dopo il consenso informato scritto dei rispettivi genitori e sottoposti a screening virologico.

La National Blood Bank ha una procedura per lo screening virologico e tutti i campioni di sangue del cordone ombelicale materno raccolti saranno sottoposti a screening per Hep B Surface Antigen, Anti-HCV Ag/Ab, HIV Ag/Ab, Syphillis and Cytomegalovirus (CMV) IgM in Transfusion Microbiology Laborator (accreditato da ISO 15189 e CSL). Metodo che è stato utilizzato nello screening come di seguito:

• Hep B Surface Antigen, Anti-HCV, HIV Ag/Ab: saggio immunologico con microparticelle chemiluminescenti (CMIA).
• Sifilide: antigene di carbonio (manuale)
• CMV IgM : Immunodosaggio a elettrochemiluminescenza (ECLIA)

Considerando che, i campioni di CB vengono sottoposti a screening per lo screening batteriologico prima e dopo la lavorazione per garantire la sterilità del prodotto. Il siero verrà scartato se uno qualsiasi dei risultati di laboratorio è positivo o reattivo.

Il sangue del cordone ombelicale (CB) raccolto verrà quindi posto in un incubatore presso il centro di raccolta fino a quando i campioni di sangue del cordone ombelicale non vengono inviati alla National Blood Bank in una ghiacciaia con registratore di temperatura. Una volta che la ghiacciaia ha raggiunto la National Blood Bank, MLT controllerà il registratore di temperatura e si assicurerà che tutti i dati di temperatura rientrino nell'intervallo (10-26°C) prima di iniziare la produzione di collirio per siero UCS.

Il CB verrà elaborato nell'unità di elaborazione del sangue cordonale entro 24 ore dalla raccolta per garantire il recupero di molecole bioattive di alta qualità. La temperatura della stanza del laboratorio, l'umidità e l'ossigeno saranno monitorati due volte al giorno. All'arrivo nel laboratorio di trasformazione, il CB verrà poi lasciato a temperatura ambiente per circa 2 ore per consentire la completa coagulazione del CB. Dopo 15 minuti di centrifugazione a 3.000 × g, in condizioni sterili, la frazione sierica sarà accuratamente separata dalla frazione cellulare. Il siero separato viene quindi trasferito in un tubo Tygon utilizzando un dispositivo di aggancio sterile e diluito a una diluizione del 20% con soluzione salina bilanciata (BSS) senza antibiotici e infine sigillato in un segmento da 1 pollice costituito da circa 1 ml di collirio di siero. L'UCS segmentato verrà quindi congelato a -20°C per 3-6 mesi oa -80°C per la conservazione a lungo termine.

Per motivi di sicurezza e qualità, i segmenti congelati verranno trasportati alla banca del sangue UKMMC utilizzando una scatola di trasporto riempita di ghiaccio secco per garantire che l'UCS sia allo stato congelato e per mantenere la qualità del prodotto fino a destinazione. Dalla banca del sangue UKMMC, i partecipanti dovranno portare a casa i colliri UCS congelati trasportandoli in una scatola più fresca con impacchi di ghiaccio. A casa, i colliri UCS congelati dovranno essere conservati nel congelatore domestico. I colliri UCS congelati devono essere scongelati a temperatura ambiente prima dell'uso e successivamente conservati in frigorifero a 2-8°C per un massimo di 24 ore. Ai partecipanti verrà fornito un breve foglio di istruzioni sull'utilizzo dell'UCS. Non ci saranno materiali suini/bovini coinvolti nell'intero processo.

L'analisi statistica verrà eseguita utilizzando Statistical Package for Social Science, versione 20.0 (SPSS, Inc., Chicago, III., USA) per Windows. I confronti del valore medio tra i gruppi di studio possono essere eseguiti con il test T di Student utilizzando l'analisi a 2 lati. I confronti dei valori medi per il follow-up possono essere analizzati con ANOVA. Le caratteristiche categoriche possono essere analizzate utilizzando un Chi-quadrato. Le differenze sono considerate statisticamente significative a P