Soro de cordão umbilical versus colírios convencionais

Este é um ensaio clínico randomizado prospectivo, simples-cego, conduzido no University Kebangsaan Malaysia Medical Center (UKMMC). O soro do cordão umbilical será fornecido por Pusat Darah Negara (National Blood Centre), Malásia. Todos os pacientes da Clínica de Oftalmologia no UKM Medical Center de dezembro de 2019 a dezembro de 2021 estarão envolvidos neste estudo. Os pacientes que preencherem os critérios de inclusão serão incluídos neste estudo. O consentimento informado será obtido e a avaliação do olho seco que inclui acuidade visual, escore OSDI, teste de Schirmer, NITBUT, coloração de fluoresceína da córnea, TMH e injeção conjuntival. Os pacientes serão randomizados em 2 grupos; Colírio AT e colírio UCS.

Amostras de sangue de cordão umbilical humano serão coletadas do Hospital Maternidade, Hospital Kuala Lumpur com a assistência das enfermeiras da Unidade de Coleta de Sangue de Cordão. Todas as amostras de sangue materno foram coletadas após o consentimento informado por escrito dos respectivos pais e submetidas à triagem de virologia.

O Banco Nacional de Sangue tem um procedimento para triagem de virologia e todos os sangues de cordão umbilical materno coletados serão triados para Hep B Surface Antigen, Anti-HCV Ag/Ab, HIV Ag/Ab, Sífilis e Citomegalovírus (CMV) IgM em Transfusion Microbiology Laborator (credenciado pela ISO 15189 e CSL). Método que foi usado na triagem conforme abaixo:

• Antígeno de Superfície Hep B, Anti-HCV, HIV Ag/Ab: Imunoensaio de Micropartículas Quimioluminescentes (CMIA).
• Sífilis: Antígeno de Carbono (Manual)
• CMV IgM: Imunoensaio de eletroquimioluminescência (ECLIA)

Considerando que, as amostras CB são rastreadas para triagem bacteriológica pré e pós-processamento para garantir a esterilidade do produto. O soro será descartado se algum dos resultados laboratoriais for positivo ou reativo.

O sangue do cordão umbilical (CB) coletado será então colocado em uma incubadora no centro de coleta até que as amostras de sangue do cordão sejam enviadas ao National Blood Bank em uma caixa de gelo com registrador de temperatura. Assim que a caixa de gelo chegar ao National Blood Bank, o MLT verificará o registrador de temperatura e garantirá que todos os dados de temperatura estejam dentro da faixa (10-26oC) antes de iniciar a produção de colírio de soro UCS.

O CB será processado na Unidade de Processamento de Sangue de Cordão dentro de 24 horas após a coleta para garantir a recuperação de moléculas bioativas de alta qualidade. Laboratório de temperatura ambiente, umidade e oxigênio serão monitorados duas vezes por dia. Ao chegar ao laboratório de processamento, o CB será deixado em temperatura ambiente por cerca de 2 horas para permitir que o CB coagule completamente. Após 15 minutos de centrifugação a 3.000 × g, em condições estéreis, a fração sérica será cuidadosamente separada da fração celular. O soro separado é então transferido para um tubo tygon usando um dispositivo de ancoragem estéril e diluído a uma diluição de 20% com solução salina balanceada (BSS) sem antibióticos e, finalmente, selado em um segmento de 1 polegada que consiste em aproximadamente 1 ml de colírio de soro. O UCS segmentado será então congelado a -20oC por 3 a 6 meses ou a -80°C para armazenamento de longo prazo.

Por questões de segurança e qualidade, os segmentos congelados serão transportados para o banco de sangue UKMMC usando uma caixa de transporte cheia de gelo seco para garantir que o UCS esteja congelado e para manter a qualidade do produto até chegar ao destino. Do banco de sangue do UKMMC, os participantes precisarão trazer o colírio UCS congelado para casa, transportando-o em uma caixa térmica com compressas de gelo. Em casa, o colírio UCS congelado deverá ser mantido em freezer doméstico. O colírio UCS congelado deve ser descongelado à temperatura ambiente antes do uso e, posteriormente, armazenado na geladeira a 2-8°C por no máximo 24 horas. Uma breve folha de instruções será fornecida aos participantes sobre o uso do UCS. Não haverá materiais suínos/bovinos envolvidos em todo o processo.

A análise estatística será realizada utilizando o Statistical Package for Social Science, versão 20.0 (SPSS, Inc., Chicago, III., EUA) para Windows. Comparações de valores médios entre grupos de estudo podem ser realizadas com o teste t de Student usando análise de 2 lados. As comparações de valores médios para acompanhamento podem ser analisadas com ANOVA. As características categóricas podem ser analisadas usando um Qui-quadrado. As diferenças são consideradas estatisticamente significativas em P