Сыворотка от пуповины в сравнении с обычными глазными каплями

Это проспективное слепое рандомизированное клиническое исследование, проведенное в Медицинском центре Университета Кебангсаан в Малайзии (UKMMC). Пуповинная сыворотка будет предоставлена ​​Pusat Darah Negara (Национальный центр крови), Малайзия. В этом исследовании будут участвовать все пациенты офтальмологической клиники Медицинского центра UKM с декабря 2019 года по декабрь 2021 года. Пациенты, соответствующие критериям включения, будут включены в это исследование. Будет получено информированное согласие и проведена оценка сухости глаз, которая включает остроту зрения, балл OSDI, тест Ширмера, NITBUT, окрашивание роговицы флуоресцеином, ТМГ и инъекцию конъюнктивы. Пациенты будут рандомизированы на 2 группы; Глазные капли AT и глазные капли UCS.

Образцы пуповинной крови человека будут взяты в родильном доме больницы Куала-Лумпур с помощью медсестер из отделения сбора пуповинной крови. Все образцы материнской крови были собраны после письменного информированного согласия соответствующих родителей и подвергнуты вирусологическому скринингу.

В Национальном банке крови существует процедура вирусологического скрининга, и вся собранная материнская пуповинная кровь будет проверена на наличие поверхностного антигена гепатита В, анти-ВГС Ag/Ab, ВИЧ/Ab/Ab, сифилиса и цитомегаловируса (ЦМВ) IgM в трансфузионной микробиологической лаборатории (аккредитованной по ISO 15189 и CSL). Метод, который использовался при скрининге, как показано ниже:

• Поверхностный антиген вируса гепатита В, анти-ВГС, антитела/антиген ВИЧ: иммунохимический анализ хемилюминесцентных микрочастиц (CMIA).
• Сифилис: углеродный антиген (Руководство)
• CMV IgM: электрохемилюминесцентный иммуноанализ (ECLIA)

Принимая во внимание, что образцы CB проходят бактериологический скрининг до и после обработки, чтобы гарантировать стерильность продукта. Сыворотка будет утилизирована, если какой-либо из лабораторных результатов будет положительным или реактивным.

Собранная пуповинная кровь (CB) затем будет помещена в инкубатор в центре сбора до тех пор, пока образцы пуповинной крови не будут отправлены в Национальный банк крови в холодильнике с регистратором температуры. Как только контейнер со льдом будет доставлен в Национальный банк крови, MLT проверит регистратор температуры и убедится, что все температурные данные находятся в диапазоне (10-26oC), прежде чем начать производство глазных капель сыворотки UCS.

CB будет обработан в отделении обработки пуповинной крови в течение 24 часов после сбора, чтобы обеспечить получение биологически активных молекул высокого качества. Дважды в день будут контролировать температуру в помещении лаборатории, влажность и содержание кислорода. По прибытии в лабораторию обработки CB оставляют при комнатной температуре примерно на 2 часа, чтобы позволить CB полностью свернуться. После 15 минут центрифугирования при 3000 g в стерильных условиях фракцию сыворотки тщательно отделяют от клеточной фракции. Затем отделенную сыворотку переносят в пробирку с тигоном с помощью стерильного стыковочного устройства и разбавляют до 20% разбавления сбалансированным солевым раствором (BSS) без каких-либо антибиотиков и, наконец, запечатывают в 1-дюймовый сегмент, состоящий примерно из 1 мл глазных капель сыворотки. Затем сегментированный UCS замораживают при температуре -20°C на срок от 3 до 6 месяцев или при температуре -80°C для длительного хранения.

В целях безопасности и качества замороженные сегменты будут транспортироваться в банк крови UKMMC с использованием транспортировочного ящика, наполненного сухим льдом, чтобы убедиться, что UCS находится в замороженном состоянии, и сохранить качество продукта до его прибытия в пункт назначения. Из банка крови UKMMC участникам нужно будет принести замороженные глазные капли UCS домой, перевезя их в холодильнике с пакетами со льдом. Дома замороженные глазные капли UCS необходимо хранить в бытовом морозильнике. Замороженные глазные капли UCS перед использованием необходимо разморозить при комнатной температуре, а затем хранить в холодильнике при температуре 2–8 °C не более 24 часов. Участникам будет предоставлена ​​краткая инструкция по использованию UCS. Во всем процессе не будут использоваться материалы из свинины или крупного рогатого скота.

Статистический анализ будет выполняться с использованием пакета Statistical Package for Social Science, версия 20.0 (SPSS, Inc., Чикаго, штат III, США) для Windows. Сравнение средних значений между исследовательскими группами может быть выполнено с помощью Т-критерия Стьюдента с использованием двустороннего анализа. Сравнение среднего значения для последующего наблюдения можно анализировать с помощью ANOVA. Категориальные характеристики можно анализировать с помощью хи-квадрата. Различия считаются статистически значимыми при P