Serum pępowinowe kontra konwencjonalne krople do oczu

Jest to prospektywne, randomizowane badanie kliniczne z pojedynczą ślepą próbą, przeprowadzone w University Kebangsaan Malaysia Medical Center (UKMMC). Surowica pępowinowa zostanie dostarczona przez Pusat Darah Negara (Krajowe Centrum Krwiodawstwa) z Malezji. Badaniem zostaną objęci wszyscy pacjenci Kliniki Okulistycznej Centrum Medycznego UKM w okresie od grudnia 2019 r. do grudnia 2021 r. Pacjenci, którzy spełniają kryteria włączenia, zostaną włączeni do tego badania. Zostanie podjęta świadoma zgoda i ocena suchego oka, która obejmuje ostrość wzroku, wynik OSDI, test Schirmera, NITBUT, barwienie fluoresceiną rogówki, TMH i wstrzyknięcie do spojówki. Pacjenci zostaną losowo podzieleni na 2 grupy; Krople do oczu AT i krople do oczu UCS.

Próbki ludzkiej krwi pępowinowej zostaną pobrane ze Szpitala Położniczego w Kuala Lumpur z pomocą pielęgniarek z Oddziału Pobierania Krwi Pępowinowej. Wszystkie próbki krwi matki pobrano po pisemnej świadomej zgodzie odpowiednich rodziców i poddano badaniom wirusologicznym.

Narodowy Bank Krwi posiada procedurę badań wirusologicznych, a wszystkie pobrane krwi pępowinowe matki będą badane pod kątem antygenu powierzchniowego Hep B, anty-HCV Ag/Ab, HIV Ag/Ab, kiły i wirusa cytomegalii (CMV) IgM w transfuzyjnym laboratorium mikrobiologicznym (akredytowanym przez ISO 15189 i CSL). Metoda, która została zastosowana w badaniu przesiewowym, jak poniżej:

• Antygen powierzchniowy Hep B, anty-HCV, HIV Ag/Ab: chemiluminescencyjny test immunologiczny mikrocząstek (CMIA).
• Kiła : antygen węglowy (instrukcja)
• CMV IgM: test immunologiczny elektrochemiluminescencyjny (ECLIA)

Podczas gdy próbki CB są badane przesiewowo pod kątem badań bakteriologicznych przed i po przetwarzaniu, aby zapewnić sterylność produktu. Surowica zostanie wyrzucona, jeśli którykolwiek z wyników laboratoryjnych będzie pozytywny lub reaktywny.

Pobrana krew pępowinowa (CB) zostanie następnie umieszczona w inkubatorze w punkcie pobrań do czasu wysłania próbek krwi pępowinowej do Narodowego Banku Krwi w pojemniku na lód z rejestratorem temperatury. Gdy pojemnik z lodem dotrze do Narodowego Banku Krwi, MLT sprawdzi rejestrator temperatury i upewni się, że wszystkie dane dotyczące temperatury mieszczą się w zakresie (10-26oC) przed rozpoczęciem produkcji kropli do oczu z surowicą UCS.

CB zostanie przetworzone w Jednostce Przetwarzania Krwi Pępowinowej w ciągu 24 godzin od pobrania, aby zapewnić odzyskanie wysokiej jakości cząsteczek bioaktywnych. Temperatura pomieszczenia laboratorium, wilgotność i tlen będą monitorowane dwa razy dziennie. Po przybyciu do laboratorium przetwórczego CB zostanie następnie pozostawione w temperaturze pokojowej na około 2 godziny, aby umożliwić całkowite skrzepnięcie CB. Po 15 minutach wirowania przy 3000 × g, w sterylnych warunkach, frakcja surowicy zostanie ostrożnie oddzielona od frakcji komórkowej. Następnie oddzieloną surowicę przenosi się do probówki Tygon za pomocą sterylnego urządzenia dokującego i rozcieńcza do 20% rozcieńczenia zrównoważonym roztworem soli (BSS) bez żadnych antybiotyków, a na koniec szczelnie zamyka w 1-calowym segmencie składającym się z około 1 ml kropli do oczu z surowicą. Segmentowany UCS zostanie następnie zamrożony w temperaturze -20oC przez 3 do 6 miesięcy lub w -80oC w celu długoterminowego przechowywania.

Ze względów bezpieczeństwa i jakości zamrożone segmenty zostaną przetransportowane do banku krwi UKMMC przy użyciu skrzyni transportowej wypełnionej suchym lodem, aby zapewnić zamrożenie UCS i utrzymanie jakości produktu do momentu dotarcia do miejsca przeznaczenia. Z banku krwi UKMMC uczestnicy będą musieli przynieść zamrożone krople do oczu UCS do domu, transportując je w pojemniku chłodzącym z okładami z lodu. W domu zamrożone krople do oczu UCS będą musiały być przechowywane w domowej zamrażarce. Zamrożone krople do oczu UCS należy przed użyciem rozmrozić w temperaturze pokojowej, a następnie przechowywać w lodówce w temperaturze 2-8°C przez maksymalnie 24 godziny. Uczestnicy otrzymają krótką instrukcję dotyczącą korzystania z UCS. W całym procesie nie będą wykorzystywane żadne materiały pochodzące od świń/bydła.

Analiza statystyczna zostanie przeprowadzona przy użyciu oprogramowania Statistical Package for Social Science, wersja 20.0 (SPSS, Inc., Chicago, III., USA) dla systemu Windows. Porównania wartości średnich między badanymi grupami można przeprowadzić za pomocą testu t-Studenta z wykorzystaniem analizy dwustronnej. Porównania wartości średnich dla obserwacji można analizować za pomocą ANOVA. Cechy kategoryczne można analizować za pomocą chi-kwadrat. Różnice są uważane za statystycznie istotne w P