Role fekální mikrobioty při předpovídání rejekce štěpu a sepse u příjemců transplantace jater od žijících dárců v prvním roce.
Role fekální mikrobioty při předpovídání rejekce štěpu a sepse u příjemců transplantace jater od žijícího dárce v prvním roce – observační studie.
Účinná imunosupresivní terapie a zdokonalené chirurgické techniky vyvinuly transplantaci jater jako dobře zavedenou a život zachraňující léčbu. Jednoletá míra přežití přibližně 85-90%. Akutní buněčná rejekce (ACR) je jednou z hlavních příčin jaterní dysfunkce (LD) po transplantaci jater, vyskytuje se u 30 % až 70 % pacientů po transplantaci a potenciálně vede k selhání aloštěpu. Kromě ACR jsou dalšími příčinami dysfunkce štěpu také přítomnost sepse, poškození způsobené léky, virové infekce jako CMV nebo recidiva virové hepatitidy. Laboratorní testy se běžně používají jako méně invazivní metody monitorování rejekce štěpu, ale nejsou specifické pro rejekci a jsou často zvýšené i u jiných typů dysfunkce štěpu.
Doposud je imunosupresivní režim u příjemců transplantátu jater považován za umění bez objektivních měřítek imunitního stavu. Terapeutické monitorování léků má při hodnocení imunitního stavu malou hodnotu a vždy se používá jako podpůrné vodítko. Vývoj specifických imunitních monitorovacích testů pro měření čistého imunosupresivního stavu u příjemce transplantátu by umožnil individualizovanější terapeutický režim Pacienti se změněnou střevní mikroflórou měli větší šanci na infekci a delší dobu hospitalizace. Probiotika by mohla zprostředkovat příznivé účinky při odmítnutí štěpu. Dysbióza aktivuje T buňky prostřednictvím PAMPS a způsobuje zánětlivé poškození jater štěpu. Studie ukázaly, že nižší počet Eubacteria, Bifidobacterium, fekálních bakterií a Lactobacillus s hojností Enterococcus a Enterobacteriaceae. U většiny se po transplantaci obnovily téměř k normálu.
Je známo, že v přirozené anamnéze ACLF nebo dekompenzované cirhózy existuje dysbióza a často koreluje s komplikacemi, jako je endotoxémie, sepse, zhoršující se selhání jater a špatné přežití. To vedlo ke zvážení modulace fekální mikrobioty jako nově vznikající terapie. Transplantace jater a následné zotavení, dochází ke všem změnám v homeostatickém prostředí příjemce i v imunitním prostředí a totéž se může stát také se střevní flórou. Je dobře známo, že játra mají otisk rezidentní střevní flóry. Předběžný krysí model ukázal změnu střevní flóry, aby bylo možné predikovat vývoj akutní buněčné rejekce dříve, než k ní dojde. Podobně je riziko infekce více u příjemců transplantátu se sníženou mikrobiální diverzitou po transplantaci jater. Data jsou však skromná a existuje naléhavá potřeba porozumět mechanismu.
Tato studie byla nezbytná s ohledem na vznikající roli střevní mikroflóry a její vliv na imunitní remodelaci pro predikci infekce, rejekce a může být časným biomarkerem dysfunkce štěpu. To může mít u příjemců transplantátu jater různé příčiny spolu s dopadem na celkový imunitní stav. Jedinečnost této studie bude v pochopení mechanismu rozvoje sepse nebo dysfunkce štěpu v průběhu času pomocí vysoce výkonných nástrojů jednobuněčné analýzy v plné krvi a změn střevní mikroflóry u příjemců transplantátu jater jako příčiny dysfunkce štěpu v prvním rokem transplantace jater od živého dárce.
Přehled studie
Postavení
Detailní popis
Primární cíl:
Charakterizovat změny fekální mikroflóry během jednoho roku po transplantaci jater od žijícího dárce a její souvislost s rejekcí štěpu a sepsí.
Sekundární cíle:
- Výskyt dysfunkce štěpu připisované sepsi, rejekci a CMV infekci v prvním roce LDLT.
- Studovat pre-LT imunologický profil a jeho korelaci s posttransplantační rejekcí, požadavky na imunosupresi a obnovením imunosenescence.
- Korelovat dynamické změny v imunitních buňkách a cytokinech při predikci rejekce štěpu a sepse.
NÁVRH STUDIE Typ studie – Jednocentrum, prospektivní, observační studie Studijní populace – po sobě jdoucích 100 pacientů splňujících kritéria způsobilosti a podstupujících transplantaci jater od žijícího dárce v ILBS v období od dubna 2020 do března 2022.
Délka studia - 24 měsíců od data schválení IEC
Metodologie:
Identifikace střevní mikroflóry:
Extrakce DNA Všechny subjekty podstoupí odběr séra a stolice ve stejný den. Bude odebráno asi 5–8 g fekálního materiálu. K extrakci DNA bude použita sada QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit pro vzorky stolice.
PCR amplifikace 16s RNA genu Stručně, PCR amplifikace hypervariabilních oblastí V3-V4 bude provedena pomocí primerů 341F a 806R obsahujících čárový kód specifický pro vzorek. Purifikovaný amplifikovaný produkt (QIAGEN) bude provozován na platformě MiSeq s vlastním sekvenačním primerem se čtením 1 (R1), čtením 2 (R2) a indexem.
Plná krev: Odebere se plná krev (5-10 ml). Plazma bude oddělena centrifugací při 2500 ot./min. Plazma bude skladována při -80 °C v biobance (NLDB), dokud nebude zpracována pro sestavu cytokinů. Zbývající krev bude ošetřena RBC lyzačním pufrem a bude zpracována pro analýzu imunitních buněk.
Imunofenotypizace pro frekvenci/absolutní počet imunitních buněk: Buňky v plné krvi budou obarveny specifickými flurochromem značenými monoklonálními protilátkami pro povrchové markery pro podskupiny T buněk (Th1,Th2, Th17, Tregs), B regulační buňky pomocí průtokové cytometrie a analýzy bude proveden softwarem FCS express.
Cytokine Array: Prozánětlivé (IL-1β) a protizánětlivé cytokiny (IL-10) budou měřeny v plazmě pacientů ve studii. Souprava cytokinového pole bude pořízena komerčně a bude provedena podle pokynů výrobce.
STATISTICKÁ ANALÝZA
- Data budou hlášena jako průměr + SD
- Kategorické proměnné budou porovnány pomocí chí-kvadrát testu nebo Fisherova exaktního testu
- Normální spojité proměnné budou porovnány pomocí Studentova t testu
- Nenormální spojité proměnné budou porovnány pomocí Mann-Whitneyho rank-sum testu (nespárovaná data) nebo Wilcoxonova testu (párová data).
- Srovnání mezi skupinami na kvantitativních proměnných bude analyzováno pomocí ANOVA. Bude provedena Coxova regresní analýza k identifikaci nezávislých prognostických faktorů pro funkci štěpu.
KONCOVÉ BODY STUDIE Primární koncový bod
- Rozvoj sepse, rejekce, CMV infekce
- Smrt
Sekundární koncové body
- Post LT komplikace vyžadující chirurgické zákroky
- Retransplantace
Očekávaný výsledek projektu:
- To nám pomůže při navrhování jednoduchých diagnostických nástrojů založených na mikrobiálním profilování nebo signaturách imunitních buněk pro diagnostiku dysfunkce štěpu a sepse.
- To nám také poskytne přehled o mechanismu imunitní patogeneze během vývoje těžkých stavů a připraví cestu pro novější terapeutické možnosti.
Etické problémy ve studii a plány na řešení těchto problémů - Žádné
Typ studie
Zápis (Očekávaný)
Kontakty a umístění
Studijní kontakt
- Jméno: Dr Navin Kumar M, MD
- Telefonní číslo: 01146300000
- E-mail: navinktanvi10@gmail.com
Studijní místa
-
-
Delhi
-
New Delhi, Delhi, Indie, 110070
- Nábor
- Institute of Liver & Biliary Sciences
-
Kontakt:
- Dr Navin Kumar, MD
- Telefonní číslo: 01146300000
- E-mail: navinktanvi10@gmail.com
-
-
Kritéria účasti
Kritéria způsobilosti
Věk způsobilý ke studiu
Přijímá zdravé dobrovolníky
Pohlaví způsobilá ke studiu
Metoda odběru vzorků
Studijní populace
Popis
Kritéria pro zařazení:
- Živý dárce Transplantace jater pro ALF, ACLF, cirhózu a její komplikace.
- Věk 12-75 let
- Platný souhlas
Kritéria vyloučení:
- Transplantace jater od mrtvého dárce
- Opětovné transplantace
- Simultánní transplantace jater a ledvin (SLKT)
Studijní plán
Jak je studie koncipována?
Detaily designu
Co je měření studie?
Primární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Rozvoj sepse
Časové okno: 1 rok
|
Diagnóza sepse je založena na pozitivních kulturách pacienta (krev, moč, špička katétru), ložiska infekce zobrazením příčného řezu v libovolném okamžiku
|
1 rok
|
|
Vývoj odmítnutí
Časové okno: 1 rok
|
Rejekce dosgnosis je založena na biopsii štěpu a histologii – hodnoceno pomocí REJECTION ACTIVITY INDEX (RAI)
|
1 rok
|
|
Rozvoj CMV infekce
Časové okno: 1 rok
|
Diagnostika CMV DNA se provádí technikou RT PCR
|
1 rok
|
|
Smrt
Časové okno: 1 rok
|
1 rok
|
Sekundární výstupní opatření
Měření výsledku |
Časové okno |
|---|---|
|
Post LT komplikace vyžadující chirurgické zákroky
Časové okno: 1 rok
|
1 rok
|
|
Počet pacientů, kteří podstoupí retransplantaci
Časové okno: 1 rok
|
1 rok
|
Spolupracovníci a vyšetřovatelé
Termíny studijních záznamů
Hlavní termíny studia
Začátek studia (Aktuální)
Primární dokončení (Očekávaný)
Dokončení studie (Očekávaný)
Termíny zápisu do studia
První předloženo
První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality
První zveřejněno (Aktuální)
Aktualizace studijních záznamů
Poslední zveřejněná aktualizace (Aktuální)
Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality
Naposledy ověřeno
Více informací
Termíny související s touto studií
Další relevantní podmínky MeSH
Další identifikační čísla studie
- ILBS-FMT-02
Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty
Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA
Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA
Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .