De rol van fecale microbiota bij het voorspellen van transplantaatafstoting en sepsis bij ontvangers van levende donorlevertransplantatie in het eerste jaar.
De rol van fecale microbiota bij het voorspellen van transplantaatafstoting en sepsis bij ontvangers van levende donorlevertransplantatie in het eerste jaar - een observatieonderzoek.
Door efficiënte immunosuppressieve therapie en verbeterde chirurgische technieken is levertransplantatie een gevestigde en levensreddende behandeling geworden. De 1-jaarsoverleving van ongeveer 85-90%. Acute cellulaire afstoting (ACR) is een van de hoofdoorzaken van leverdisfunctie (LD) na levertransplantatie. Dit komt voor bij 30% tot 70% van de getransplanteerde patiënten en kan mogelijk leiden tot allotransplantaatfalen. Naast ACR zijn de aanwezigheid van sepsis, medicijnletsel, virale infecties zoals CMV of herhaling van virale hepatitis ook andere oorzaken van transplantaatdisfunctie. Laboratoriumtesten worden vaak gebruikt als minder invasieve methoden om allogene transplantaatafstoting te controleren, maar ze zijn niet specifiek voor afstoting en zijn vaak ook verhoogd bij andere soorten transplantaatdisfunctie.
Tot op heden wordt het immunosuppressieve regime bij ontvangers van een levertransplantaat beschouwd als een kunst bij gebrek aan objectieve metingen van de immuuntoestand. Therapeutische medicijnmonitoring heeft weinig waarde bij de beoordeling van de immuuntoestand en wordt altijd gebruikt als ondersteunende gids. De ontwikkeling van specifieke immuunmonitoringassays om de netto immunosuppressieve toestand bij een ontvanger van een transplantatie te meten, zou een meer geïndividualiseerd therapeutisch regime mogelijk maken. Patiënten met een veranderde darmmicrobiota hadden meer kans op infectie en een langer verblijf in het ziekenhuis. Probiotica kunnen gunstige effecten hebben bij afstoting van transplantaten. Dysbiose activeert T-cellen via PAMPS en veroorzaakt de ontstekingsschade in de getransplanteerde lever. De onderzoeken toonden aan dat lagere Eubacteria, Bifidobacterium, Fecale bacterie en Lactobacillus met een overvloed aan Enterococcus en Enterobacteriaceae. Ze herstelden zich tot bijna normaal na transplantatie in meerderheid.
Dit is bekend dat er een dysbiose is in de natuurlijke geschiedenis van ACLF of gedecompenseerde cirrose, en vaak gecorreleerd met complicaties zoals endotoxemie, sepsis, verergering van leverfalen en slechte overleving. Dit heeft ertoe geleid dat fecale microbiota-modulatie als een opkomende therapie wordt beschouwd. Levertransplantatie en daaruit voortvloeiend herstel, er is over het algemeen een verandering in het homeostatische milieu van de ontvanger, evenals het immuunmilieu, en hetzelfde kan ook gebeuren met de darmflora. Het is bekend dat de lever een afdruk heeft van de aanwezige darmflora. Het voorlopige rattenmodel toonde verandering van de darmflora om de ontwikkeling van acute cellulaire afstoting te voorspellen voordat het gebeurt. Evenzo is het risico op infectie groter bij ontvangers van transplantaties met verminderde microbiële diversiteit na levertransplantatie. De gegevens zijn echter schaars en er is een dringende behoefte om het mechanisme te begrijpen.
De huidige studie was noodzakelijk met het oog op de opkomende rol van darmmicroflora en de invloed ervan op immuunremodellering voor de voorspelling van infectie, afstoting en kan een vroege biomarker zijn voor de transplantaatdisfunctie. Dit kan verschillende oorzaken hebben bij ontvangers van een levertransplantaat, samen met de impact ervan op de algehele immuunstatus. De uniciteit van de huidige studie zal zijn om het mechanisme van de ontwikkeling van sepsis of transplantaatdisfunctie in de loop van de tijd te begrijpen met behulp van high-throughput-instrumenten voor eencellige analyse in volbloed- en darmmicrobiota-veranderingen bij ontvangers van een levertransplantaat als een oorzaak voor transplantaatdisfunctie in eerste jaar levertransplantatie met levende donor.
Studie Overzicht
Toestand
Gedetailleerde beschrijving
Hoofddoel:
Karakteriseren van de fecale microbiota-veranderingen gedurende een jaar na levertransplantatie met een levende donor en de associatie ervan met transplantaatafstoting en sepsis.
Secundaire doelstellingen:
- Incidentie van transplantaatdisfunctie toe te schrijven aan sepsis, afstoting en CMV-infectie in het eerste jaar van LDLT.
- Bestudering van het pre-LT immunologische profiel en de correlatie ervan met afstoting na transplantatie, vereisten voor immunosuppressie en herstel van immunosenescentie.
- Om de dynamische veranderingen in immuuncellen en cytokines te correleren bij het voorspellen van transplantaatafstoting en sepsis.
ONDERZOEKSOPZET Type onderzoek - Prospectief, observationeel onderzoek in één centrum Studiepopulatie - opeenvolgende 100 patiënten die voldoen aan de criteria om in aanmerking te komen en een levertransplantatie met een levende donor ondergaan in ILBS tussen april 2020 en maart 2022.
Studieduur - 24 maanden vanaf de datum van goedkeuring door IEC
Methodologie:
Identificatie van darmmicrobiota:
DNA-extractie Bij alle proefpersonen wordt op dezelfde dag serum en ontlasting afgenomen. Er wordt ongeveer 5-8 g fecaal materiaal verzameld. De QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit voor ontlastingsmonsters wordt gebruikt voor DNA-extractie.
PCR-amplificatie van het 16s-RNA-gen In het kort zal PCR-amplificatie van de V3-V4 hypervariabele regio's worden uitgevoerd met behulp van de 341F- en 806R-primers die de monsterspecifieke streepjescode bevatten. Gezuiverd geamplificeerd product (QIAGEN), zal worden uitgevoerd op het MiSeq-platform met aangepaste sequencingprimer leest 1 (R1), leest 2 (R2) en index.
Volbloed: Er wordt volbloed (5-10ml) afgenomen. Plasma wordt gescheiden door centrifugatie bij 2500 rpm. Plasma wordt opgeslagen bij -80C in biobank (NLDB) totdat het wordt verwerkt voor cytokines-array. Resterend bloed wordt behandeld met RBC-lysisbuffer en verwerkt voor analyse van immuuncellen.
Immunofenotypering voor frequentie/absoluut aantal immuuncellen: de cellen in het volbloed zullen worden gekleurd met specifieke fluorchroom-gelabelde monoklonale antilichamen voor de oppervlaktemarkers voor subgroepen van T-cellen (Th1, Th2, Th17, Tregs), regulerende B-cellen met behulp van flowcytometrie en analyse zal worden gedaan door FCS Express-software.
Cytokine Array: De pro-inflammatoire (IL-1β) en anti-inflammatoire cytokines (IL-10) zullen worden gemeten in het plasma van de patiënten die worden bestudeerd. De cytokine-arraykit wordt commercieel aangeschaft en wordt uitgevoerd volgens de instructies van de fabrikant.
STATISTISCHE ANALYSE
- Gegevens worden gerapporteerd als gemiddelde + SD
- Categorische variabelen worden vergeleken met behulp van de chikwadraattoets of Fisher exact-toets
- Normale continue variabelen worden vergeleken met behulp van de Student t-toets
- Niet-normale continue variabelen worden vergeleken met behulp van de Mann-Whitney rank-sum test (ongepaarde gegevens) of de Wilcoxon-test (gepaarde gegevens).
- Vergelijking tussen groepen op kwantitatieve variabelen zal worden geanalyseerd door middel van ANOVA. Er zal een Cox-regressieanalyse worden uitgevoerd om onafhankelijke prognostische factoren voor de functie van het transplantaat te identificeren.
STUDIE EINDPUNTEN Primair eindpunt
- Ontwikkeling van sepsis, afstoting, CMV-infectie
- Dood
Secundaire eindpunten
- Post LT-complicaties waarvoor chirurgische ingrepen nodig zijn
- Hertransplantatie
Verwacht resultaat van het project:
- Dit zal ons helpen bij het ontwerpen van eenvoudige diagnostische hulpmiddelen op basis van microbiële profilering of handtekeningen van immuuncellen voor de diagnose van transplantaatdisfunctie en sepsis.
- Dit zal ons ook inzicht geven in het mechanisme van immuunpathogenese tijdens de ontwikkeling van ernstige aandoeningen en dit zal de weg vrijmaken voor nieuwere therapeutische opties.
Ethische kwesties in het onderzoek en plannen om deze kwesties aan te pakken - Geen
Studietype
Inschrijving (Verwacht)
Contacten en locaties
Studiecontact
- Naam: Dr Navin Kumar M, MD
- Telefoonnummer: 01146300000
- E-mail: navinktanvi10@gmail.com
Studie Locaties
-
-
Delhi
-
New Delhi, Delhi, Indië, 110070
- Werving
- Institute of Liver & Biliary Sciences
-
Contact:
- Dr Navin Kumar, MD
- Telefoonnummer: 01146300000
- E-mail: navinktanvi10@gmail.com
-
-
Deelname Criteria
Geschiktheidscriteria
Leeftijden die in aanmerking komen voor studie
Accepteert gezonde vrijwilligers
Geslachten die in aanmerking komen voor studie
Bemonsteringsmethode
Studie Bevolking
Beschrijving
Inclusiecriteria:
- Levende donor Levertransplantatie voor ALF, ACLF, cirrose en de complicaties ervan.
- Leeftijd 12-75 jaar
- Geldige toestemming
Uitsluitingscriteria:
- Overleden donorlevertransplantaties
- Opnieuw transplanteren
- Gelijktijdige lever-niertransplantaties (SLKT)
Studie plan
Hoe is de studie opgezet?
Ontwerpdetails
Wat meet het onderzoek?
Primaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Ontwikkeling van sepsis
Tijdsspanne: 1 jaar
|
Sepsis-diagnose is gebaseerd op positieve kweken van de patiënt (bloed, urine, punt van katheter), infectiehaarden door middel van dwarsdoorsnedebeeldvorming op elk moment
|
1 jaar
|
|
Ontwikkeling van afwijzing
Tijdsspanne: 1 jaar
|
Dosgnose voor afstoting is gebaseerd op transplantaatbiopsie en histologie - beoordeeld door REJECTION ACTIVITY INDEX (RAI)
|
1 jaar
|
|
Ontwikkeling van CMV-infectie
Tijdsspanne: 1 jaar
|
CMV-DNA-diagnose is door middel van RT-PCR-techniek
|
1 jaar
|
|
Dood
Tijdsspanne: 1 jaar
|
1 jaar
|
Secundaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Tijdsspanne |
|---|---|
|
Post LT-complicaties waarvoor chirurgische ingrepen nodig zijn
Tijdsspanne: 1 jaar
|
1 jaar
|
|
Aantal patiënten dat een hertransplantatie zal ondergaan
Tijdsspanne: 1 jaar
|
1 jaar
|
Medewerkers en onderzoekers
Studie record data
Bestudeer belangrijke data
Studie start (Werkelijk)
Primaire voltooiing (Verwacht)
Studie voltooiing (Verwacht)
Studieregistratiedata
Eerst ingediend
Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria
Eerst geplaatst (Werkelijk)
Updates van studierecords
Laatste update geplaatst (Werkelijk)
Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria
Laatst geverifieerd
Meer informatie
Termen gerelateerd aan deze studie
Aanvullende relevante MeSH-voorwaarden
Andere studie-ID-nummers
- ILBS-FMT-02
Informatie over medicijnen en apparaten, studiedocumenten
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd geneesmiddel
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd apparaatproduct
Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .