Fækal mikrobiotas rolle i forudsigelse af graftafstødning og sepsis blandt modtagere af levende donorlevertransplantation i det første år.
Fækal mikrobiotas rolle i forudsigelse af graftafstødning og sepsis blandt modtagere af levende donorlevertransplantation i første år - en observationsundersøgelse.
Effektiv immunsuppressiv terapi og forbedrede kirurgiske teknikker har udviklet levertransplantation som en veletableret og livreddende behandling. 1-års overlevelse på cirka 85-90%. Akut cellulær afstødning (ACR) er en af hovedårsagerne til leverdysfunktion (LD) efter levertransplantation, der forekommer hos 30 % til 70 % af transplanterede patienter og potentielt fører til allograftsvigt. Ud over ACR er tilstedeværelsen af sepsis, lægemiddelskade, virusinfektioner som CMV eller tilbagevenden af viral hepatitis også andre årsager til graftdysfunktion. Laboratorietests bruges almindeligvis som mindre invasive metoder til at overvåge afstødning af allograft, men de er ikke specifikke for afstødning og er ofte også forhøjede i andre typer graftdysfunktion.
Indtil nu anses immunosuppressiv kur hos levertransplanterede modtagere som en kunst i fravær af objektive mål for immuntilstanden. Terapeutisk lægemiddelovervågning har ringe værdi i vurderingen af immuntilstanden og bruges altid som en støttende vejledning. Udviklingen af specifikke immunmonitoreringsassays til at måle den netto immunsuppressive tilstand hos en transplantationsmodtager ville tillade et mere individualiseret terapeutisk regime. Patienter med ændret tarmmikrobiota havde flere chancer for infektion og længere hospitalsophold. Probiotika kan mediere gavnlige virkninger ved transplantatafstødning. Dysbiose aktiverer T-celler gennem PAMPS og forårsager den inflammatoriske skade i transplantatleveren. Undersøgelserne viste, at sænke Eubacteria, Bifidobacterium, Fæcal bakterie og Lactobacillus med overflod af Enterococcus og Enterobacteriaceae. De blev næsten normal igen efter transplantation i flertal.
Dette er kendt, at der er en dysbiose i den naturlige historie af ACLF eller dekompenseret cirrhose, og ofte korreleret til komplikationer som endotoksæmi, sepsis, forværret leversvigt og dårlig overlevelse. Dette har ført til at overveje fækal mikrobiotamodulation som en ny terapi. Levertransplantation og deraf følgende genopretning, der er overordnet ændring i modtagerens homøostatiske miljø såvel som immunmiljøet, og det samme kan også ske med tarmfloraen. Det er velkendt, at leveren har et animaftryk af hjemmehørende tarmflora. Den foreløbige rottemodel viste ændring af tarmfloraen for at forudsige udviklingen af akut cellulær afstødning, før det sker. Tilsvarende er risikoen for infektion mere blandt transplantationsmodtagere med nedsat mikrobiel diversitet efter levertransplantation. Men dataene er sparsomme, og der er et presserende behov for at forstå mekanismen.
Den nuværende undersøgelse var nødvendig i lyset af den nye rolle af tarmmikroflora og dens indflydelse på immunremodeling til forudsigelse af infektion, afstødning og kan være en tidlig biomarkør for graftdysfunktion. Dette kan være af forskellig årsag hos levertransplanterede modtagere sammen med dets indvirkning på den generelle immunstatus. Det unikke ved denne undersøgelse vil være at forstå mekanismen for udvikling af sepsis eller graftdysfunktion med tiden ved hjælp af high-throughput værktøjer til enkeltcelleanalyse i fuldblod og tarmmikrobiotaændringer blandt levertransplantationsmodtagere som årsag til graftdysfunktion i første år af levende donor levertransplantation.
Studieoversigt
Status
Betingelser
Detaljeret beskrivelse
Primært mål:
At karakterisere de fækale mikrobiotaændringer over et år efter levertransplantation af levende donor og dens sammenhæng med graftafstødning og sepsis.
Sekundære mål:
- Forekomst af graftdysfunktion, der kan tilskrives sepsis, afstødning og CMV-infektion i det første år med LDLT.
- At studere den præ-LT immunologiske profil og dens korrelation med post-transplantationsafstødning, immunsuppressionskrav og genoprettelse af immunosenescens.
- At korrelere de dynamiske ændringer i immunceller og cytokiner til at forudsige graftafstødning og sepsis.
STUDIEDESIGN Undersøgelsestype - Enkeltcenter, prospektivt, observationsstudie Studiepopulation - på hinanden følgende 100 patienter, der opfylder berettigelseskriterierne og gennemgår levende donorlevertransplantation i ILBS mellem april 2020 og marts 2022.
Studievarighed - 24 måneder fra datoen for godkendelse af IEC
Metode:
Identifikation af tarmmikrobiota:
DNA-ekstraktion Alle forsøgspersoner vil gennemgå serum- og afføringsopsamling samme dag. Omkring 5-8 g af fækalt materiale vil blive indsamlet. QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit til afføringsprøver vil blive brugt til DNA-ekstraktion.
PCR-amplifikation af 16s RNA-genet Kort fortalt vil PCR-amplifikation af de hypervariable V3-V4-regioner blive udført ved at bruge 341F- og 806R-primerne, der indeholder den prøvespecifikke stregkode. Oprenset amplificeret produkt (QIAGEN) vil blive kørt på MiSeq-platformen med tilpasset sekventeringsprimer læser 1 (R1), læst 2 (R2) og indeks.
Fuldblod: Fuldblod vil blive (5-10ml) vil blive indsamlet. Plasma vil blive adskilt ved centrifugering ved 2500 rpm. Plasma vil blive opbevaret ved -80C i biobank (NLDB), indtil det behandles til cytokinarray. Resterende blod vil blive behandlet med RBC-lysebuffer og vil blive behandlet til immuncelleanalyse.
Immunfænotypning for frekvens/absolut antal af immunceller: Cellerne i fuldblodet vil blive farvet med specifikke flurochrom-mærkede monoklonale antistoffer for overflademarkørerne for T-cellers undergrupper (Th1,Th2, Th17, Tregs), B-regulatoriske celler ved hjælp af flowcytometri og analyse vil blive udført af FCS Express-software.
Cytokine Array: De pro-inflammatoriske (IL-1β) og anti-inflammatoriske cytokiner (IL-10) vil blive målt i plasma fra de undersøgte patienter. Cytokin-array-kittet vil blive anskaffet kommercielt og vil blive udført i henhold til producentens instruktioner.
STATISTISK ANALYSE
- Data vil blive rapporteret som middel + SD
- Kategoriske variabler vil blive sammenlignet ved hjælp af chi-kvadrat-testen eller Fisher eksakte test
- Normale kontinuerte variabler vil blive sammenlignet ved hjælp af Student t-testen
- Ikke-normale kontinuerlige variabler vil blive sammenlignet ved hjælp af Mann-Whitneys rangsum-test (uparrede data) eller Wilcoxon-testen (parrede data).
- Sammenligning mellem grupper på kvantitative variable vil blive analyseret ved ANOVA En Cox regressionsanalyse vil blive udført for at identificere uafhængige prognostiske faktorer for graftfunktion.
STUDIE SLUTPUNKTER Primært slutpunkt
- Udvikling af sepsis, afstødning, CMV-infektion
- Død
Sekundære endepunkter
- Post LT-komplikationer, der kræver kirurgiske indgreb
- Gentransplantation
Forventet resultat af projektet:
- Dette vil hjælpe os med at designe simple diagnostiske værktøjer baseret på mikrobiel profilering eller immuncellers signaturer til diagnosticering af graft dysfunktion og sepsis.
- Dette vil også give os indsigt i mekanismen for immunpatogenese under udviklingen af alvorlige tilstande, og dette vil bane vejen for nyere terapeutiske muligheder.
Etiske spørgsmål i undersøgelsen og planer om at løse disse problemer - Ingen
Undersøgelsestype
Tilmelding (Forventet)
Kontakter og lokationer
Studiekontakt
- Navn: Dr Navin Kumar M, MD
- Telefonnummer: 01146300000
- E-mail: navinktanvi10@gmail.com
Studiesteder
-
-
Delhi
-
New Delhi, Delhi, Indien, 110070
- Rekruttering
- Institute of Liver & Biliary Sciences
-
Kontakt:
- Dr Navin Kumar, MD
- Telefonnummer: 01146300000
- E-mail: navinktanvi10@gmail.com
-
-
Deltagelseskriterier
Berettigelseskriterier
Aldre berettiget til at studere
Tager imod sunde frivillige
Køn, der er berettiget til at studere
Prøveudtagningsmetode
Studiebefolkning
Beskrivelse
Inklusionskriterier:
- Levende donor Levertransplantation for ALF, ACLF, skrumpelever og dets komplikationer.
- Alder 12-75 år
- Gyldigt samtykke
Ekskluderingskriterier:
- Levertransplantationer af afdøde donorer
- Gentransplantationer
- Samtidig lever-nyretransplantation (SLKT)
Studieplan
Hvordan er undersøgelsen tilrettelagt?
Design detaljer
Hvad måler undersøgelsen?
Primære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Udvikling af sepsis
Tidsramme: 1 år
|
Sepsisdiagnose er baseret på positive kulturer af patienten (blod, urin, kateterspids), infektionsfokus ved tværsnitsbilleddannelse på ethvert tidspunkt
|
1 år
|
|
Udvikling af afslag
Tidsramme: 1 år
|
Afstødningsdosering er baseret på transplantatbiopsi og histologi - vurderet ved AFSTANDSAKTIVITETSINDEKS (RAI)
|
1 år
|
|
Udvikling af CMV-infektion
Tidsramme: 1 år
|
CMV DNA-diagnose er ved RT PCR-teknik
|
1 år
|
|
Død
Tidsramme: 1 år
|
1 år
|
Sekundære resultatmål
Resultatmål |
Tidsramme |
|---|---|
|
Post LT-komplikationer, der kræver kirurgiske indgreb
Tidsramme: 1 år
|
1 år
|
|
Antal patienter, der skal gentransplanteres
Tidsramme: 1 år
|
1 år
|
Samarbejdspartnere og efterforskere
Datoer for undersøgelser
Studer store datoer
Studiestart (Faktiske)
Primær færdiggørelse (Forventet)
Studieafslutning (Forventet)
Datoer for studieregistrering
Først indsendt
Først indsendt, der opfyldte QC-kriterier
Først opslået (Faktiske)
Opdateringer af undersøgelsesjournaler
Sidste opdatering sendt (Faktiske)
Sidste opdatering indsendt, der opfyldte kvalitetskontrolkriterier
Sidst verificeret
Mere information
Begreber relateret til denne undersøgelse
Yderligere relevante MeSH-vilkår
Andre undersøgelses-id-numre
- ILBS-FMT-02
Lægemiddel- og udstyrsoplysninger, undersøgelsesdokumenter
Studerer et amerikansk FDA-reguleret lægemiddelprodukt
Studerer et amerikansk FDA-reguleret enhedsprodukt
Disse oplysninger blev hentet direkte fra webstedet clinicaltrials.gov uden ændringer. Hvis du har nogen anmodninger om at ændre, fjerne eller opdatere dine undersøgelsesoplysninger, bedes du kontakte register@clinicaltrials.gov. Så snart en ændring er implementeret på clinicaltrials.gov, vil denne også blive opdateret automatisk på vores hjemmeside .