Ulosteen mikrobiotan rooli siirteen hylkimisen ja sepsiksen ennustamisessa elävän luovuttajan maksansiirron saajien keskuudessa ensimmäisenä vuonna.
Ulosteen mikrobiotan rooli siirteen hylkimisen ja sepsiksen ennustamisessa ensimmäisen vuoden elävän luovuttajan maksansiirron saajien keskuudessa - Havaintotutkimus.
Tehokas immunosuppressiohoito ja parannetut kirurgiset tekniikat ovat kehittäneet maksansiirron vakiintuneeksi ja hengenpelastavaksi hoidoksi. Yhden vuoden eloonjäämisaste on noin 85-90%. Acute cellular hyljintäreaktio (ACR) on yksi tärkeimmistä maksan toimintahäiriön (LD) syistä maksansiirron jälkeen. Sitä esiintyy 30–70 %:lla siirretyistä potilaista ja se voi mahdollisesti johtaa allograftin epäonnistumiseen. ACR:n lisäksi sepsis, lääkevaurio, virusinfektiot, kuten CMV, tai virushepatiitin uusiutuminen ovat myös muita syitä siirteen toimintahäiriöön. Laboratoriokokeita käytetään yleisesti vähemmän invasiivisina menetelminä allograftin hylkimisen seurantaan, mutta ne eivät ole spesifisiä hylkimisreaktiolle, ja ne ovat usein kohonneita myös muuntyyppisissä siirteen toimintahäiriöissä.
Tähän asti immuunivastetta heikentävää hoito-ohjelmaa maksansiirron vastaanottajalla on pidetty tekniikana, kun immuunitilan objektiivisia mittareita ei ole. Terapeuttisella lääkeseurannalla on vain vähän arvoa immuunitilan arvioinnissa ja sitä käytetään aina tukena. Spesifisten immuunijärjestelmän seurantamääritysten kehittäminen nettoimmunosuppressiivisen tilan mittaamiseksi siirteen vastaanottajalla mahdollistaisi yksilöllisemmän hoito-ohjelman. Potilailla, joilla oli muuttunut suoliston mikrobiota, oli suurempi mahdollisuus saada infektio ja pidempi sairaalahoitojakso. Probiootit voivat välittää hyödyllisiä vaikutuksia siirteen hylkimisreaktiossa. Dysbioosi aktivoi T-soluja PAMPS:n kautta ja aiheuttaa tulehduksellisen vaurion siirteen maksassa. Tutkimukset osoittivat, että Eubacteria, Bifidobacterium, Fecal bakteeri ja Lactobacillus alentavat runsaasti Enterococcus- ja Enterobacteriaceae-bakteeria. Suurin osa niistä palautui lähes normaaliksi siirron jälkeen.
Tämän tiedetään, että ACLF:n tai dekompensoidun kirroosin luonnossa esiintyy dysbioosia, ja se korreloi usein komplikaatioihin, kuten endotoksemiaan, sepsikseen, maksan vajaatoiminnan pahenemiseen ja huonoon eloonjäämiseen. Tämä on johtanut siihen, että ulosteen mikrobiotan modulaatio on nouseva hoitomuoto. Maksansiirto ja sitä seuraava toipuminen, vastaanottajan homeostaattisessa miljöössä ja immuuniympäristössä on kaiken kaikkiaan muutos, ja sama voi tapahtua myös suolistoflooralle. On hyvin tiedossa, että maksassa on elävän suolistoflooran jäljet. Alustava rottamalli osoitti suolistoflooran muutoksen ennustaakseen akuutin solujen hylkimisen kehittymisen ennen kuin se tapahtuu. Samoin infektioriski on suurempi elinsiirtojen saajilla, joiden mikrobien monimuotoisuus on vähentynyt maksansiirron jälkeen. Tiedot ovat kuitenkin niukat, ja mekanismi on kiireellisesti ymmärrettävä.
Tämä tutkimus oli välttämätön, kun otetaan huomioon suoliston mikroflooran nouseva rooli ja sen vaikutus immuunijärjestelmän uudistumiseen infektion, hylkimisreaktion ennustamiseksi ja voi olla varhainen biomarkkeri siirteen toimintahäiriölle. Tämä voi johtua monista eri syistä maksansiirron saajilla sekä sen vaikutus yleiseen immuunitilaan. Tämän tutkimuksen ainutlaatuisuus on ymmärtää sepsiksen tai siirteen toimintahäiriön kehittymismekanismi ajallaan käyttämällä korkean suorituskyvyn työkaluja yksittäisten solujen analysointiin kokoverestä ja suoliston mikrobiotan muutoksista maksansiirron saajien keskuudessa siirteen toimintahäiriön syynä elävän luovuttajan maksansiirron ensimmäinen vuosi.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Yksityiskohtainen kuvaus
Ensisijainen tavoite:
Ulosteen mikrobiotan muutosten karakterisoimiseksi vuoden aikana elävän luovuttajan maksansiirron jälkeen ja sen yhteys siirteen hylkimiseen ja sepsikseen.
Toissijaiset tavoitteet:
- Sepsiksestä, hylkimisreaktiosta ja CMV-infektiosta johtuvan siirteen toimintahäiriön ilmaantuvuus ensimmäisenä LDLT-vuonna.
- Tutkia pre-LT-immunologista profiilia ja sen korrelaatiota transplantaation jälkeisen hyljintäreaktion, immunosuppression vaatimusten ja immunosesenssin palautumisen kanssa.
- Korreloida immuunisolujen ja sytokiinien dynaamisia muutoksia siirteen hylkimisen ja sepsiksen ennustamisessa.
TUTKIMUKSEN SUUNNITTELU Tutkimustyyppi - Yksi keskus, prospektiivinen, havainnollinen tutkimus Tutkimuspopulaatio - 100 peräkkäistä potilasta, jotka täyttävät kelpoisuusvaatimukset ja joille tehtiin elävän luovuttajan maksansiirto ILBS:ssä huhtikuun 2020 ja maaliskuun 2022 välisenä aikana.
Tutkimuksen kesto - 24 kuukautta IEC:n hyväksymispäivästä
Metodologia:
Suoliston mikrobiston tunnistaminen:
DNA-uutto Kaikilta koehenkilöiltä kerätään seerumi ja uloste samana päivänä. Noin 5-8 g ulostemateriaalia kerätään. QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit ulostenäytteitä varten käytetään DNA:n erottamiseen.
16s-RNA-geenin PCR-monistus Lyhyesti sanottuna V3-V4-hypervariaabelien alueiden PCR-amplifikaatio tehdään käyttämällä näytekohtaisen viivakoodin sisältäviä 341F- ja 806R-alukkeita. Puhdistettu monistettu tuote (QIAGEN) ajetaan MiSeq-alustalla mukautetulla sekvensointialukkeella, joka lukee 1 (R1), luku 2 (R2) ja indeksi.
Kokoveri: kerätään kokoverta (5-10 ml). Plasma erotetaan sentrifugoimalla nopeudella 2500 rpm. Plasmaa säilytetään -80 °C:ssa biopankissa (NLDB), kunnes se käsitellään sytokiiniryhmää varten. Jäljelle jäänyt veri käsitellään punasolujen hajoamispuskurilla ja käsitellään immuunisoluanalyysiä varten.
Immuunisolujen frekvenssin/absoluuttisen lukumäärän immunofenotyypitys: Kokoveren solut värjätään spesifisillä fluorokromilla merkityillä monoklonaalisilla vasta-aineilla pintamarkkereille T-solujen alaryhmille (Th1, Th2, Th17, Tregs), B-säätelysoluille käyttämällä virtaussytometriaa ja analyysiä tehdään FCS express -ohjelmistolla.
Sytokiinitaulukko: Proinflammatoriset (IL-1β) ja anti-inflammatoriset sytokiinit (IL-10) mitataan tutkittavien potilaiden plasmasta. Sytokiinijoukkosarja hankitaan kaupallisesti ja tehdään valmistajan ohjeiden mukaisesti.
TILASTOLLINEN ANALYYSI
- Tiedot raportoidaan muodossa keskiarvo + SD
- Kategorisia muuttujia verrataan khin neliötestillä tai Fisherin eksaktitestillä
- Normaalit jatkuvat muuttujat verrataan Studentin t -testillä
- Ei-normaaleja jatkuvia muuttujia verrataan Mann-Whitneyn rank-sum -testillä (parittomat tiedot) tai Wilcoxon-testillä (parilliset tiedot).
- Kvantitatiivisten muuttujien ryhmien välinen vertailu analysoidaan ANOVA:lla. Suoritetaan Cox-regressioanalyysi siirteen toiminnan riippumattomien prognostisten tekijöiden tunnistamiseksi.
OPINTOJEN LOPPUKOHDAT Ensisijainen päätepiste
- Sepsiksen kehittyminen, hyljintä, CMV-infektio
- Kuolema
Toissijaiset päätepisteet
- Post LT -komplikaatiot, jotka vaativat kirurgisia toimenpiteitä
- Uudelleensiirto
Projektin odotettu tulos:
- Tämä auttaa meitä suunnittelemaan yksinkertaisia diagnostisia työkaluja, jotka perustuvat mikrobien profilointiin tai immuunisolujen allekirjoituksiin siirteen toimintahäiriön ja sepsiksen diagnosoimiseksi.
- Tämä antaa meille myös käsityksen immuunipatogeneesin mekanismista vaikeiden tilojen kehittymisen aikana, ja tämä avaa tietä uusille hoitovaihtoehdoille.
Eettiset kysymykset tutkimuksessa ja suunnitelmat näiden ongelmien ratkaisemiseksi - Ei mitään
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Odotettu)
Yhteystiedot ja paikat
Opiskeluyhteys
- Nimi: Dr Navin Kumar M, MD
- Puhelinnumero: 01146300000
- Sähköposti: navinktanvi10@gmail.com
Opiskelupaikat
-
-
Delhi
-
New Delhi, Delhi, Intia, 110070
- Rekrytointi
- Institute of Liver & Biliary Sciences
-
Ottaa yhteyttä:
- Dr Navin Kumar, MD
- Puhelinnumero: 01146300000
- Sähköposti: navinktanvi10@gmail.com
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Näytteenottomenetelmä
Tutkimusväestö
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Elävä luovuttaja Maksansiirto ALF:n, ACLF:n, kirroosin ja sen komplikaatioiden vuoksi.
- Ikä 12-75 vuotta
- Voimassa oleva suostumus
Poissulkemiskriteerit:
- Kuolleiden luovuttajien maksansiirrot
- Uudelleensiirrot
- Samanaikainen maksa-munuaissiirrot (SLKT)
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Sepsiksen kehittyminen
Aikaikkuna: 1 vuotta
|
Sepsiksen diagnoosi perustuu potilaan positiivisiin viljelmiin (veri, virtsa, katetrin kärki), infektiopesäkkeisiin poikkileikkauskuvauksella milloin tahansa
|
1 vuotta
|
|
Hylkäämisen kehittyminen
Aikaikkuna: 1 vuotta
|
Hyljintädiagnoosi perustuu siirteen biopsiaan ja histologiaan - arvioituna RAI:n (REJECTION ACTIVITY INDEX) avulla.
|
1 vuotta
|
|
CMV-infektion kehittyminen
Aikaikkuna: 1 vuotta
|
CMV-DNA-diagnoosi tehdään RT PCR -tekniikalla
|
1 vuotta
|
|
Kuolema
Aikaikkuna: 1 vuotta
|
1 vuotta
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Aikaikkuna |
|---|---|
|
Post LT -komplikaatiot, jotka vaativat kirurgisia toimenpiteitä
Aikaikkuna: 1 vuotta
|
1 vuotta
|
|
Potilaiden määrä, joille tehdään uudelleensiirto
Aikaikkuna: 1 vuotta
|
1 vuotta
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Odotettu)
Opintojen valmistuminen (Odotettu)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- ILBS-FMT-02
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .
Kliiniset tutkimukset Maksakirroosi
-
Grand Valley State UniversityIlmoittautuminen kutsustaMetaboliseen aineenvaihduntaan liittyvä dysfunction Steatotic Liver Disease (MASLD) | Aineenvaihduntaan liittyvä steatohepatiitti (MASH)Yhdysvallat
-
University of UlsanUlsan University HospitalTuntematonToksokariaasi | Silmän toksokariaasi | Keuhkojen toksokariaasi | Hiottu lasin opasiteetti (GGO) | Toxocara Canis -infektio (koiran pyöreät madot) | Law Liver | Law Meat | Seerumin Toxocara vasta-aine | Toxocara Larva MigransKorean tasavalta