Rola mikroflory kałowej w przewidywaniu odrzucenia przeszczepu i posocznicy wśród biorców przeszczepu wątroby od żywego dawcy w pierwszym roku.
Rola mikroflory kałowej w przewidywaniu odrzucenia przeszczepu i posocznicy wśród biorców przeszczepu wątroby od żywego dawcy w pierwszym roku - badanie obserwacyjne.
Skuteczna terapia immunosupresyjna i udoskonalone techniki chirurgiczne sprawiły, że transplantacja wątroby stała się ugruntowaną i ratującą życie metodą leczenia. Roczna przeżywalność około 85-90%. Ostre odrzucanie komórek (ACR) jest jedną z głównych przyczyn dysfunkcji wątroby (LD) po przeszczepie wątroby, występującą u 30% do 70% pacjentów po przeszczepie i potencjalnie prowadzącą do niepowodzenia alloprzeszczepu. Oprócz ACR obecność posocznicy, uraz polekowy, infekcje wirusowe, takie jak CMV lub nawroty wirusowego zapalenia wątroby, są również innymi przyczynami dysfunkcji przeszczepu. Testy laboratoryjne są powszechnie stosowane jako mniej inwazyjne metody monitorowania odrzucania alloprzeszczepu, ale nie są specyficzne dla odrzucenia i często są podwyższone również w innych typach dysfunkcji przeszczepu.
Do tej pory schemat leczenia immunosupresyjnego u biorcy przeszczepu wątroby uważany jest za sztukę ze względu na brak obiektywnych pomiarów stanu immunologicznego. Monitorowanie leków ma niewielką wartość w ocenie stanu immunologicznego i jest zawsze stosowane jako wskazówka pomocnicza. Opracowanie swoistych testów immunologicznych do pomiaru stanu immunosupresji netto u biorcy przeszczepu umożliwiłoby bardziej zindywidualizowany schemat leczenia. Pacjenci ze zmienioną mikroflorą jelitową mieli większe szanse na infekcję i dłuższy pobyt w szpitalu. Probiotyki mogą pośredniczyć w korzystnym działaniu w odrzucaniu przeszczepu. Dysbioza aktywuje limfocyty T poprzez PAMPS i powoduje uszkodzenie zapalne w przeszczepionej wątrobie. Badania wykazały, że niższe Eubakterie, Bifidobacterium, bakterie kałowe i Lactobacillus z obfitością Enterococcus i Enterobacteriaceae. W większości powróciły do stanu prawie normalnego po przeszczepie.
Wiadomo, że w naturalnym przebiegu ACLF lub zdekompensowanej marskości wątroby występuje dysbioza i często koreluje z powikłaniami, takimi jak endotoksemia, posocznica, pogarszająca się niewydolność wątroby i słabe przeżycie. Doprowadziło to do rozważenia modulacji mikroflory kałowej jako nowej terapii. Po przeszczepieniu wątroby i wynikającym z tego powrocie do zdrowia następuje ponad wszystko zmiana w homeostatycznym środowisku biorcy, jak również w środowisku immunologicznym, i to samo może się dziać z florą jelitową. Dobrze wiadomo, że wątroba ma odcisk rezydentnej flory jelitowej. Wstępny model szczurzy wykazał zmianę flory jelitowej, aby przewidzieć rozwój ostrego odrzucenia komórkowego, zanim to nastąpi. Podobnie ryzyko infekcji jest większe wśród biorców przeszczepów ze zmniejszoną różnorodnością drobnoustrojów po przeszczepie wątroby. Jednak dane są skąpe i istnieje pilna potrzeba zrozumienia mechanizmu.
Niniejsze badanie było konieczne ze względu na pojawiającą się rolę mikroflory jelitowej i jej wpływ na przebudowę immunologiczną w przewidywaniu infekcji, odrzucenia i może być wczesnym biomarkerem dysfunkcji przeszczepu. Może to mieć różną przyczynę u biorców przeszczepu wątroby, wraz z jej wpływem na ogólny stan odporności. Wyjątkowość niniejszego badania polega na zrozumieniu mechanizmu rozwoju posocznicy lub dysfunkcji przeszczepu we właściwym czasie przy użyciu wysokowydajnych narzędzi analizy pojedynczych komórek w pełnej krwi i zmian mikroflory jelitowej wśród biorców przeszczepu wątroby jako przyczyny dysfunkcji przeszczepu w pierwszy rok przeszczepu wątroby od żywego dawcy.
Przegląd badań
Status
Szczegółowy opis
Podstawowy cel:
Scharakteryzowanie zmian mikroflory kałowej w ciągu roku po przeszczepie wątroby od żywego dawcy i ich związku z odrzuceniem przeszczepu i posocznicą.
Cele drugorzędne:
- Częstość dysfunkcji przeszczepu przypisywana posocznicy, odrzuceniu i zakażeniu CMV w pierwszym roku LDLT.
- Zbadanie profilu immunologicznego przed LT i jego korelacji z odrzuceniem po przeszczepie, wymaganiami immunosupresji i przywróceniem immunostarzenia.
- Skorelowanie dynamicznych zmian w komórkach odpornościowych i cytokinach w przewidywaniu odrzucenia przeszczepu i posocznicy.
PROJEKT BADANIA Rodzaj badania – Jednoośrodkowe, prospektywne badanie obserwacyjne Populacja badana – kolejnych 100 pacjentów spełniających kryteria kwalifikacji i poddawanych przeszczepowi wątroby od żywego dawcy w ILBS w okresie od kwietnia 2020 do marca 2022.
Czas trwania studiów - 24 miesiące od daty zatwierdzenia IEC
Metodologia:
Identyfikacja mikroflory jelitowej:
Ekstrakcja DNA Wszyscy pacjenci zostaną poddani pobraniu surowicy i kału tego samego dnia. Zostanie pobrane około 5–8 g materiału kałowego. Do ekstrakcji DNA zostanie użyty minizestaw QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit do próbek kału.
Amplifikacja PCR genu 16s RNA Pokrótce, amplifikacja PCR regionów hiperzmiennych V3-V4 zostanie przeprowadzona przy użyciu starterów 341F i 806R zawierających kod kreskowy specyficzny dla próbki. Oczyszczony amplifikowany produkt (QIAGEN) zostanie uruchomiony na platformie MiSeq z niestandardowymi odczytami startera do sekwencjonowania 1 (R1), odczytem 2 (R2) i indeksem.
Pełna krew: Zostanie pobrana pełna krew (5-10 ml). Osocze zostanie oddzielone przez wirowanie przy 2500 obr./min. Osocze będzie przechowywane w temperaturze -80°C w biobanku (NLDB) do czasu przetworzenia na macierz cytokin. Pozostała krew zostanie potraktowana buforem do lizy RBC i zostanie przetworzona do analizy komórek odpornościowych.
Immunofenotypowanie pod kątem częstości/bezwzględnej liczby komórek odpornościowych: Komórki w pełnej krwi zostaną wybarwione swoistymi przeciwciałami monoklonalnymi znakowanymi fluorochromem dla markerów powierzchniowych dla podzbiorów komórek T (Th1, Th2, Th17, Tregs), komórek regulatorowych B za pomocą cytometrii przepływowej i analizy zostanie wykonane przez oprogramowanie FCS express.
Macierz cytokin: Cytokiny prozapalne (IL-1β) i przeciwzapalne (IL-10) będą mierzone w osoczu badanych pacjentów. Zestaw macierzy cytokin zostanie zakupiony w handlu i zostanie wykonany zgodnie z instrukcjami producenta.
ANALIZA STATYSTYCZNA
- Dane zostaną przedstawione jako średnia + SD
- Zmienne kategorialne zostaną porównane za pomocą testu chi-kwadrat lub dokładnego testu Fishera
- Normalne zmienne ciągłe zostaną porównane za pomocą testu t Studenta
- Nienormalne zmienne ciągłe zostaną porównane przy użyciu testu sumy rang Manna-Whitneya (dane niesparowane) lub testu Wilcoxona (dane sparowane).
- Porównanie między grupami pod względem zmiennych ilościowych zostanie przeanalizowane za pomocą analizy ANOVA. Analiza regresji Coxa zostanie przeprowadzona w celu zidentyfikowania niezależnych czynników prognostycznych dla funkcji przeszczepu.
PUNKTY ZAKOŃCZENIA BADANIA Podstawowy punkt końcowy
- Rozwój posocznicy, odrzucenie, zakażenie CMV
- Śmierć
Dodatkowe punkty końcowe
- Powikłania po LT wymagające interwencji chirurgicznej
- Retransplantacja
Oczekiwany efekt projektu:
- Pomoże nam to w zaprojektowaniu prostych narzędzi diagnostycznych opartych na profilowaniu mikrobiologicznym lub sygnaturach komórek odpornościowych do diagnozowania dysfunkcji przeszczepu i sepsy.
- Da nam to również wgląd w mechanizm patogenezy immunologicznej podczas rozwoju ciężkich stanów, a to utoruje drogę dla nowszych opcji terapeutycznych.
Kwestie etyczne w badaniu i plany rozwiązania tych kwestii - Brak
Typ studiów
Zapisy (Oczekiwany)
Kontakty i lokalizacje
Kontakt w sprawie studiów
- Nazwa: Dr Navin Kumar M, MD
- Numer telefonu: 01146300000
- E-mail: navinktanvi10@gmail.com
Lokalizacje studiów
-
-
Delhi
-
New Delhi, Delhi, Indie, 110070
- Rekrutacyjny
- Institute of Liver & Biliary Sciences
-
Kontakt:
- Dr Navin Kumar, MD
- Numer telefonu: 01146300000
- E-mail: navinktanvi10@gmail.com
-
-
Kryteria uczestnictwa
Kryteria kwalifikacji
Wiek uprawniający do nauki
Akceptuje zdrowych ochotników
Płeć kwalifikująca się do nauki
Metoda próbkowania
Badana populacja
Opis
Kryteria przyjęcia:
- Przeszczep wątroby od żywego dawcy w przypadku ALF, ACLF, marskości wątroby i jej powikłań.
- Wiek 12-75 lat
- Ważna zgoda
Kryteria wyłączenia:
- Przeszczepy wątroby od dawców zmarłych
- Ponowne przeszczepy
- Jednoczesne przeszczepy wątroby i nerek (SLKT)
Plan studiów
Jak projektuje się badanie?
Szczegóły projektu
Co mierzy badanie?
Podstawowe miary wyniku
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Rozwój sepsy
Ramy czasowe: 1 rok
|
Rozpoznanie sepsy opiera się na dodatnim posiewie pacjenta (krew, mocz, końcówka cewnika), ogniskach zakażenia metodą obrazowania przekrojowego w dowolnym momencie
|
1 rok
|
|
Rozwój odrzucenia
Ramy czasowe: 1 rok
|
Dosgnoza odrzucenia jest oparta na biopsji przeszczepu i badaniu histologicznym - oceniana za pomocą INDEKSU AKTYWNOŚCI ODRZUCENIA (RAI)
|
1 rok
|
|
Rozwój zakażenia CMV
Ramy czasowe: 1 rok
|
Diagnostyka CMV DNA odbywa się za pomocą techniki RT PCR
|
1 rok
|
|
Śmierć
Ramy czasowe: 1 rok
|
1 rok
|
Miary wyników drugorzędnych
Miara wyniku |
Ramy czasowe |
|---|---|
|
Powikłania po LT wymagające interwencji chirurgicznej
Ramy czasowe: 1 rok
|
1 rok
|
|
Liczba pacjentów, którzy zostaną poddani retransplantacji
Ramy czasowe: 1 rok
|
1 rok
|
Współpracownicy i badacze
Daty zapisu na studia
Główne daty studiów
Rozpoczęcie studiów (Rzeczywisty)
Zakończenie podstawowe (Oczekiwany)
Ukończenie studiów (Oczekiwany)
Daty rejestracji na studia
Pierwszy przesłany
Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości
Pierwszy wysłany (Rzeczywisty)
Aktualizacje rekordów badań
Ostatnia wysłana aktualizacja (Rzeczywisty)
Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości
Ostatnia weryfikacja
Więcej informacji
Terminy związane z tym badaniem
Dodatkowe istotne warunki MeSH
Inne numery identyfikacyjne badania
- ILBS-FMT-02
Informacje o lekach i urządzeniach, dokumenty badawcze
Bada produkt leczniczy regulowany przez amerykańską FDA
Bada produkt urządzenia regulowany przez amerykańską FDA
Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .