Neceliakální citlivost na lepek, DBPCFC u dospívajících

Bezlepková citlivost, dvojitě zaslepená, placebem kontrolovaná potravinová výzva s křížením u zdravých dánských dospívajících

Caecilie Crawley, Nadia Savino, Cecilie Halby, Stine Dydensborg Sander, Anne-Marie Nybo Andersen, Joseph Murray, Robin Christensen, Steffen Husby

ÚVOD Neceliakální glutenová senzitivita (NCGS) je nově popsaná chorobná jednotka, kdy jedinec vykazuje známky citlivosti na lepek, ale bez známek alergie na pšenici zprostředkované IgE nebo CD (1). Rozsah a závažnost NCGS je zatím záhadou (2), ale symptomy NCGS se mohou vyskytovat běžně, s udávanou prevalencí až 6 % dospělé populace (3). Dosud bylo provedeno pouze deset studií s dvojitě zaslepenou, placebem kontrolovanou potravinovou provokací, které ukazují rozdílné výsledky studií v důsledku odlišného designu a metod studie a významného nocebo/placebo efektu. Obecně jsou studie charakterizovány náborem pacientů z gastroenterologické kliniky omezeným na dospělé [4]. Naše studie v tomto ohledu vyniká, protože budeme vyšetřovat nevybranou skupinu pacientů jako adolescentů (nerekrutovaných z ambulance), protože pacienti s NCGS často uvádějí, že jejich symptomy začaly v té době.

Několik výzkumníků dospělo k závěru, že pacienti s NCGS nemusí reagovat na lepek, ale místo toho na sacharidy ve stravě, tzv. FODMAPS nebo inhibitory amylázy trypsinu (5). Studie s Double Blind Placebo Controlled Food Challenges od Lundina et al. (6) byl zveřejněn, ale s neprůkaznými výsledky. Vzhledem k tomuto pozadí jsou na rozdíl od CD faktory podílející se na etiologii NCGS stále neznámé. Při hledání biomarkerů a možná i faktorů přispívajících k NCGS by mikrobiální signatura střeva byla dobrým kandidátem.

METODY Uspořádání studie V populaci založené na zdravých adolescentech jsme provedli dvojitě zaslepenou, placebem kontrolovanou potravinovou provokaci (DBPCFC) s cross-overem k identifikaci pacientů s NCGS podle doporučení Salernových kritérií(1). Bude se konat v Dětské nemocnici Hanse Christiana Andersena ve Fakultní nemocnici Odense v Dánsku v listopadu 2020. Byl schválen Regionálními výbory pro etiku zdravotnického výzkumu pro jižní Dánsko (projekt č. S-20160061) a Dánskou agenturou pro ochranu (2008-58-0018).

Populace ve studii Adolescenti byli účastníky kohorty GlutenFunen, kteří se rekrutovali z nevybraného dílčího vzorku dánské národní kohorty narození, definovaného jako osoby žijící na ostrově Funen v Dánsku. Dánská národní kohorta narození se skládá z cca. 96 000 dětí, které jsou sledovány od intrauterinního života a dále (nejnovější sledování je 18 let)(7). Jejich matky se rekrutovaly v letech 1996 až 2002 z běžné populace s mírou účasti přibližně 30 %.

Skupina GlutenFunen zahrnovala 1266 ze 7431 způsobilých účastníků (17 %) ve věku 15-21 let a byli vyšetřeni na celiakii, antropometrická a metabolická měření. Dále účastníci v kohortě GlutenFunen odpověděli na dotazník o svých gastrointestinálních symptomech a bylo vypočteno skóre založené na počtu gastrointestinálních symptomů. Kritéria pro zařazení bylo skóre vyšší než tři, celkem 273 účastníků. Všichni byli telefonicky kontaktováni autorkou NS nebo CC a pozváni na informační schůzku, kde dietoložka instruovala, jak dodržovat bezlepkovou dietu.

Kritéria vyloučení byla alergie na pšenici, transglutamináza IgA vyšší než referenční rozmezí, zánětlivé onemocnění střev a současná léčba antibiotiky Intervence studie Studie byla uspořádána do dvou fází. Viz obrázek 1. První fáze začala sedmidenním záběhovým obdobím pro přizpůsobení bezlepkové diety, poté následoval jeden týden bezlepkové diety. Pokud účastníci reagovali na bezlepkovou dietu definovanou jako skóre VAS vyšší než 25 % ve srovnání s počátečním skóre VAS, pokračovali účastníci do fáze dvě.

Druhá fáze sestávala ze tří period, z nichž každá trvala sedm dní; První byla provokační dávka lepkem/placebem, poté vymývací fáze a nakonec druhá výzva placebem/lepkem. Během celé studie museli účastníci dodržovat přísnou bezlepkovou dietu. Adherence nebyla během studie hodnocena, ale účastníci byli požádáni, aby poznamenali, zda náhodou nejedli lepek.

Granolové tyčinky Účastníci museli sníst dvě granolové tyčinky každý den kromě období vymývání. Granolová tyčinka byla bez laktózy a s nízkým obsahem FODMAPS a množství lepku v granolové tyčinkě obsahující lepek bylo 5,0 g. Recept laskavě poskytl Lundin et al. (6). V trojúhelníkovém testu nebyl žádný rozdíl, pokud jde o chuť, vzhled a konzistenci mezi lepkem a placebem granola tyčinka.

Měření výsledku Gastrointestinální symptomy byly měřeny pomocí dotazníku o 10 položkách, který si sami administrovali, což představovalo modifikované skóre hodnocení gastrointestinálních symptomů. Byl hodnocen na 100mm vizuální analogové stupnici (VAS) (1-100) v den 1 a 13 a den 15-35. Celkové skóre bylo vypočteno jako průměr 10 položek. Extraintestinální symptomy a symptomy duševního zdraví byly měřeny pomocí SF-36 a Warwick-Edinburghské škály duševní pohody (14 položek) v den 1, 14, 21, 28 a 35.

Mikrobiom Účastníci museli dodat vzorek stolice v den 1, 14, 21, 28 a 35. Pro zajištění vysoké shody byl vzorek stolice odebrán u účastníků doma. Vzorek stolice byl okamžitě zmražen, jak bylo popsáno dříve (8).

Randomizace a zaslepení. Účastníci byli randomizováni do skupiny placebo-lepek nebo lepek-placebo v blocích po čtyřech randomizačním modulem v RedCap spravovaném správcem dat studie. Kuchyně fakultní nemocnice v Odense upekla granolové tyčinky a zabalila je do různých krabic se dvěma barvami, aby bylo zajištěno oslepení studie pro vyšetřovatele a účastníky. Randomizační kód nebyl před koncem studie odhalen.

Výsledek Primárním výsledkem byla identifikace účastníků s NCGS definovaným jako 30% zhoršení symptomů při konzumaci lepku ve srovnání s placebem na základě modifikovaného skóre VAS.

Sekundárním výsledkem bylo zlepšení duševního zdraví účastníků, kteří žili na bezlepkové dietě.

Terciárním výsledkem byla identifikace mikrobiálních signatur u pacientů s NCGS.

Statistická analýza Normálně rozdělená data byla popsána s průměry a směrodatnou odchylkou a byla porovnána pomocí párového t-testu. Neparametrická data byla popsána pomocí mediánu a percentilů a porovnána pomocí Mank-Whitney Rank sum testu ??. P-hodnoty < 0,05 byly považovány za významné.

Síla Za předpokladu pozitivity 30 % k výzvě, síly 80 % a hladiny významnosti 5 % jsme vypočítali potřebu pro 29 účastníků.