In vivo účinky inhibitorů amylázy trypsinu (ATI)
24. března 2023 aktualizováno: Maastricht University
In vivo účinky inhibitorů amylázy trypsinu z pšenice v lidském střevě: důkaz příčiny neceliakální citlivosti na pšenici u syndromu dráždivého tračníku?
Pšenice je nejdůležitější základní potravinou konzumovanou v západním světě a poskytuje příznivé zdravotní účinky a funkční vlastnosti. Nicméně stále větší část obecné populace se vyhýbá nebo omezuje konzumaci pšeničných produktů kvůli vlastním gastrointestinálním (GI) symptomům, jako jsou pacienti s neceliakální citlivostí na pšenici (NCWS) a/nebo syndromem dráždivého tračníku (IBS). . Přibývá důkazů, že inhibitory amylázy trypsinu (ATI), které tvoří až 15 % pšeničných proteinů, hrají roli při vzniku příznaků u NCWS a IBS. Studie in vitro ukázaly, že ATI mohou vyvolat vrozenou imunitní odpověď prostřednictvím přímé interakce s toll-like receptorem 4 (TLR4), aktivací komplexu TLR4-MD2-CD14 s následným uvolněním prozánětlivých cytokinů. Tyto výsledky byly potvrzeny u myší. Dále u myší ATI spustily střevní epiteliální lymfocytózu a bariérovou dysfunkci a modifikovaly složení a metabolismus mikrobioty. Dosud nebyly provedeny žádné placebem kontrolované studie zkoumající tyto účinky izolovaných ATI u lidských subjektů. Pochopení role ATI při vytváření příznaků u pacientů s NCWS a IBS je důležité, abychom těmto pacientům poskytli vhodné dietní rady, zlepšili kvalitu jejich života a snížili riziko nutričních nedostatků.
Výzkumníci mají za cíl provést studii proof-of-concept, aby vyhodnotili účinek ATI na střevní bariéru a imunitní funkci u zdravých dobrovolníků. Výzkumníci předpokládají, že ATI buď přímo ovlivňují funkci střevní bariéry, nebo nepřímo aktivací imunitní reakce prostřednictvím TLR4.
Studie je v souladu s randomizovaným, dvojitě zaslepeným, placebem kontrolovaným, zkříženým designem, za použití zdravých lidských dobrovolníků (mužů a žen), ve věku 18-65 let. Každý z dobrovolníků absolvuje dva testovací dny, oddělené obdobím vymývání v délce minimálně 4 týdnů. V den testu dostanou dobrovolníci buď izolované ATI nebo placebo (fyziologický roztok), požití pomocí nazogastrického intraduodenálního vyživovacího katetru.
Přehled studie
Postavení
Zatím nenabíráme
Intervence / Léčba
Typ studie
Intervenční
Zápis (Očekávaný)
8
Fáze
- Nelze použít
Kritéria účasti
Výzkumníci hledají lidi, kteří odpovídají určitému popisu, kterému se říká kritéria způsobilosti. Některé příklady těchto kritérií jsou celkový zdravotní stav osoby nebo předchozí léčba.
Kritéria způsobilosti
Věk způsobilý ke studiu
18 let až 65 let (Dospělý, Starší dospělý)
Přijímá zdravé dobrovolníky
Ano
Pohlaví způsobilá ke studiu
Všechno
Popis
Kritéria pro zařazení:
- Na základě anamnézy a předchozího sebepřiznaného vyšetření nelze definovat žádné gastrointestinální potíže a/nebo onemocnění.
- Věk od 18 do 65 let.
- Index tělesné hmotnosti (BMI) mezi 20 a 30 kg/m2.
Kritéria vyloučení:
- Anamnéza závažných kardiovaskulárních, respiračních, urogenitálních, gastrointestinálních/hepatálních, hematologických/imunologických, HEENT (hlava, uši, oči, nos, krk), dermatologických/pojivových, muskuloskeletálních, metabolických/nutričních, endokrinních, neurologických/psychiatrických onemocnění, alergie, velký chirurgický zákrok a/nebo laboratorní hodnocení, která by mohla omezit účast nebo dokončení protokolu studie. O závažnosti onemocnění (hlavní zásah do provádění experimentu nebo potenciální vliv na výsledky studie) rozhodne hlavní řešitel.
- Užívání léků, včetně suplementace vitamínů, pre- a probiotické suplementace, s výjimkou perorální antikoncepce, během 14 dnů před testováním.
- Podávání zkoumaných léků nebo účast na jakékoli vědecké intervenční studii, která může interferovat s touto studií (o tom rozhodne hlavní zkoušející), během 180 dnů před studií.
- Velká břišní operace zasahující do gastrointestinálních funkcí (nekomplikovaná apendektomie, cholecystektomie a hysterektomie povolena a další operace na základě posouzení hlavního zkoušejícího).
- Těhotenství, kojení.
- Nadměrná konzumace alkoholu (> 14 konzumací alkoholu za týden).
- Kouření.
- Užívání drog.
- Darování krve do 3 měsíců před nebo po období studie.
- Samopřiznaný HIV pozitivní stav.
- Plánujte zhubnout nebo dodržujte konkrétní dietu (např. ztráta hmotnosti nebo bezlepková dieta) během sledovaného období.
Studijní plán
Tato část poskytuje podrobnosti o studijním plánu, včetně toho, jak je studie navržena a co studie měří.
Jak je studie koncipována?
Detaily designu
- Primární účel: Základní věda
- Přidělení: Randomizované
- Intervenční model: Crossover Assignment
- Maskování: Dvojnásobek
Zbraně a zásahy
Skupina účastníků / Arm |
Intervence / Léčba |
|---|---|
|
Experimentální: Inhibitory trypsinu amylázy (ATI), pak placebo
Testovací den 1: intraduodenální podání inhibitorů amylázy trypsinu (ATI) izolovaných z Triticum aestivum (pšenice), rozpuštěných ve fyziologickém roztoku.
Po vymývací periodě 4-6 týdnů, testovací den 2: intraduodenální podání placeba (fyziologický roztok).
|
Intraduodenální podávání inhibitorů amylázy trypsinu (ATI) izolovaných z Triticum aestivum (pšenice), rozpuštěných ve fyziologickém roztoku.
Intraduodenální podání placeba (fyziologický roztok).
|
|
Experimentální: Placebo, pak inhibitory amylázy trypsinu
Testovací den 1: intraduodenální podání placeba (fyziologický roztok).
Po vymývací periodě 4-6 týdnů, testovací den 2: intraduodenální podání inhibitorů amylázy trypsinu (ATI) izolovaných z Triticum aestivum (chlebová pšenice), rozpuštěných ve fyziologickém roztoku.
|
Intraduodenální podávání inhibitorů amylázy trypsinu (ATI) izolovaných z Triticum aestivum (pšenice), rozpuštěných ve fyziologickém roztoku.
Intraduodenální podání placeba (fyziologický roztok).
|
Co je měření studie?
Primární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Rozdíl v genové expresi spojené s funkcí střevní bariéry, měřený v duodenálních biopsiích odebraných po intervenci s ATI nebo placebem
Časové okno: Biopsie budou odebírány 2 hodiny po podání ATI nebo placeba ve dvou oddělených testovacích dnech. Testovací dny jsou odděleny vymývací periodou 4-6 týdnů.
|
Genová exprese spojená s funkcí střevní bariéry, jako je genová exprese proteinů těsného spojení a adherenčních spojení: např. peri-junkční Factin, myosin, ZO-1, claudin-3, okluzní, kináza lehkého řetězce myosinu, fosforylovaný lehký řetězec myosinu, E-cadherin. Biopsie duodena budou získány pomocí endoskopie horní části gastrointestinálního traktu. |
Biopsie budou odebírány 2 hodiny po podání ATI nebo placeba ve dvou oddělených testovacích dnech. Testovací dny jsou odděleny vymývací periodou 4-6 týdnů.
|
Sekundární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Rozdíl v hladinách proteinů související s funkcí střevní bariéry, měřený v duodenálních biopsiích odebraných po intervenci ATI nebo placebu.
Časové okno: Biopsie budou odebírány 2 hodiny po podání ATI nebo placeba ve dvou oddělených testovacích dnech. Testovací dny jsou odděleny vymývací periodou 4-6 týdnů.
|
Exprese proteinů spojených s funkcí střevní bariéry, jako jsou proteiny s těsným spojením a adherensy pomocí Western blotu a imunofluorescenčního barvení.
Biopsie duodena budou získány pomocí endoskopie horní části gastrointestinálního traktu.
|
Biopsie budou odebírány 2 hodiny po podání ATI nebo placeba ve dvou oddělených testovacích dnech. Testovací dny jsou odděleny vymývací periodou 4-6 týdnů.
|
|
Rozdíly v genové expresi spojené s imunitní funkcí, měřené v duodenálních biopsiích odebraných po intervenci ATI nebo placebu.
Časové okno: Biopsie budou odebírány 2 hodiny po podání ATI nebo placeba ve dvou oddělených testovacích dnech. Testovací dny jsou odděleny vymývací periodou 4-6 týdnů.
|
Genová exprese spojená s imunitní aktivací, jako je TLR4, a prozánětlivé cytokiny a antimikrobiální peptidy. Biopsie duodena budou získány pomocí endoskopie horní části gastrointestinálního traktu. |
Biopsie budou odebírány 2 hodiny po podání ATI nebo placeba ve dvou oddělených testovacích dnech. Testovací dny jsou odděleny vymývací periodou 4-6 týdnů.
|
|
Rozdíly v infiltraci imunitních buněk v duodenální tkáni, měřené v duodenálních biopsiích odebraných po intervenci s ATI nebo placebem.
Časové okno: Biopsie budou odebírány 2 hodiny po podání ATI nebo placeba ve dvou oddělených testovacích dnech. Testovací dny jsou odděleny vymývací periodou 4-6 týdnů.
|
Infiltrace imunitních buněk (neutrofily, žírné buňky, dendritické buňky) do duodenální tkáně imunofluorescenčním barvením.
Biopsie duodena budou získány pomocí endoskopie horní části gastrointestinálního traktu.
|
Biopsie budou odebírány 2 hodiny po podání ATI nebo placeba ve dvou oddělených testovacích dnech. Testovací dny jsou odděleny vymývací periodou 4-6 týdnů.
|
|
Rozdíl ve změně gastrointestinálních symptomů od výchozí hodnoty po intervenci ATI nebo placebu.
Časové okno: Různé časové body během každého testovacího dne: 1 hodinu před a 5 minut před intervencí s ATI nebo placebem a 1 hodinu, 2 hodiny a 12 hodin po intervenci s ATI nebo placebem
|
Měřeno na vizuální analogové škále se pohybovalo od 0 do 100, kde 0 je nepřítomnost příznaků a 100 jsou závažné příznaky; ATI vs placebo
|
Různé časové body během každého testovacího dne: 1 hodinu před a 5 minut před intervencí s ATI nebo placebem a 1 hodinu, 2 hodiny a 12 hodin po intervenci s ATI nebo placebem
|
|
Rozdíl v populacích krevních imunitních buněk po intervenci ATI nebo placebu
Časové okno: Vzorky krve budou odebírány přímo po endoskopii horní části gastrointestinálního traktu ve dvou samostatných testovacích dnech. Testovací dny jsou odděleny vymývací periodou 4-6 týdnů.
|
Kvantifikace populací imunitních buněk (pomocné T buňky, cytotoxické T buňky, CD25+ efektorové T buňky, CD69+ efektorové T buňky, regulační T buňky a NK buňky) v plné krvi.
|
Vzorky krve budou odebírány přímo po endoskopii horní části gastrointestinálního traktu ve dvou samostatných testovacích dnech. Testovací dny jsou odděleny vymývací periodou 4-6 týdnů.
|
|
Rozdíl v krevních biomarkerech imunitní stimulace po intervenci s ATI nebo placebem
Časové okno: Vzorky krve budou odebírány přímo po endoskopii horní části gastrointestinálního traktu ve dvou samostatných testovacích dnech. Testovací dny jsou odděleny vymývací periodou 4-6 týdnů.
|
Měření biomarkerů imunitní stimulace (jako jsou lidské cytokiny IL-10, TGF-β, IL-12p40 podjednotka, IL-12p70 podjednotka, IL-1β, IL-2, IL-6, IL-4, IL-17, IL-22 a IFN-γ, TNFα) v plné krvi.
|
Vzorky krve budou odebírány přímo po endoskopii horní části gastrointestinálního traktu ve dvou samostatných testovacích dnech. Testovací dny jsou odděleny vymývací periodou 4-6 týdnů.
|
|
Krevní markery pro funkci střevní bariéry po intervenci ATI nebo placebu
Časové okno: Vzorky krve budou odebírány přímo po endoskopii horní části gastrointestinálního traktu ve dvou samostatných testovacích dnech. Testovací dny jsou odděleny vymývací periodou 4-6 týdnů.
|
Markery střevní bariérové funkce (plazmatický citrulin, metabolity) a poškození slizniční tkáně tenkého střeva (intestinální protein vázající mastné kyseliny (I-FABP)), měřené v plné krvi.
|
Vzorky krve budou odebírány přímo po endoskopii horní části gastrointestinálního traktu ve dvou samostatných testovacích dnech. Testovací dny jsou odděleny vymývací periodou 4-6 týdnů.
|
Další výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Charakteristika účastníka
Časové okno: Během screeningové návštěvy budou shromážděny údaje o demografických faktorech a anamnéze
|
Pro posouzení vhodnosti účasti nebo charakterizace studované populace budou shromážděny údaje o demografii a anamnéze pomocí screeningových dotazníků.
|
Během screeningové návštěvy budou shromážděny údaje o demografických faktorech a anamnéze
|
|
Jednodenní záznam o jídle pro zajištění příjmu potravy je podobný během 24 hodin před testovacím dnem 1 a testovacím dnem 2.
Časové okno: 24 hodin před testovacím dnem 1 a po vymývacím období 4–6 týdnů, také během 24 hodin před testovacím dnem 2
|
Účastníci budou požádáni, aby opakovali příjem před testovacím dnem 1 v den před testovacím dnem 2. Příjem je tedy zapsán během 24 hodin před testovacím dnem 1 a opakován (a znovu zapsán) během 24 hodin před testovacím dnem 1. testovací den 1, což je 4-6 týdnů po testovacím dni 1.
|
24 hodin před testovacím dnem 1 a po vymývacím období 4–6 týdnů, také během 24 hodin před testovacím dnem 2
|
Spolupracovníci a vyšetřovatelé
Zde najdete lidi a organizace zapojené do této studie.
Sponzor
Vyšetřovatelé
- Vrchní vyšetřovatel: Daisy MAE Jonkers, Prof, PhD, Maastricht University
Termíny studijních záznamů
Tato data sledují průběh záznamů studie a předkládání souhrnných výsledků na ClinicalTrials.gov. Záznamy ze studií a hlášené výsledky jsou před zveřejněním na veřejné webové stránce přezkoumány Národní lékařskou knihovnou (NLM), aby se ujistily, že splňují specifické standardy kontroly kvality.
Hlavní termíny studia
Začátek studia (Očekávaný)
1. září 2023
Primární dokončení (Očekávaný)
1. září 2024
Dokončení studie (Očekávaný)
1. září 2024
Termíny zápisu do studia
První předloženo
6. října 2021
První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality
1. prosince 2021
První zveřejněno (Aktuální)
15. prosince 2021
Aktualizace studijních záznamů
Poslední zveřejněná aktualizace (Aktuální)
27. března 2023
Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality
24. března 2023
Naposledy ověřeno
1. března 2023
Více informací
Termíny související s touto studií
Klíčová slova
Další relevantní podmínky MeSH
- Nemoci trávicího systému
- Patologické procesy
- Onemocnění imunitního systému
- Choroba
- Gastrointestinální onemocnění
- Onemocnění tlustého střeva, funkční
- Onemocnění tlustého střeva
- Střevní nemoci
- Přecitlivělost
- Syndrom
- Syndrom dráždivého tračníku
- Molekulární mechanismy farmakologického působení
- Inhibitory enzymů
- Inhibitory proteázy
- Inhibitory serinových proteináz
- Inhibitory trypsinu
Další identifikační čísla studie
- NL77666.608.21
Plán pro data jednotlivých účastníků (IPD)
Plánujete sdílet data jednotlivých účastníků (IPD)?
NE
Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty
Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA
Ne
Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA
Ne
Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .