Эффекты ингибиторов трипсина амилазы in vivo (ATI)
24 марта 2023 г. обновлено: Maastricht University
In vivo эффекты ингибиторов трипсина амилазы из пшеницы в кишечнике человека: доказательство причины нецелиакальной чувствительности к пшенице при синдроме раздраженного кишечника?
Пшеница является наиболее важным основным продуктом питания, потребляемым в западном мире, и обладает полезными для здоровья свойствами и функциональными свойствами. Тем не менее, все большая часть населения в целом избегает или сокращает потребление продуктов из пшеницы из-за симптомов желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), о которых сообщают сами пациенты, таких как пациенты с чувствительностью к пшенице без целиакии (NCWS) и/или синдромом раздраженного кишечника (СРК). . Появляется все больше доказательств того, что ингибиторы амилазы трипсина (ATI), составляющие до 15% белков пшеницы, играют роль в возникновении симптомов при NCWS и IBS. Исследования in vitro показали, что АТИ могут индуцировать врожденный иммунный ответ посредством прямого взаимодействия с толл-подобным рецептором 4 (TLR4), активируя комплекс TLR4-MD2-CD14 с последующим высвобождением провоспалительных цитокинов. Эти результаты были подтверждены на мышах. Кроме того, у мышей АТИ вызывали эпителиальный лимфоцитоз кишечника и барьерную дисфункцию, а также модифицировали состав и метаболизм микробиоты. До сих пор не проводилось плацебо-контролируемых исследований, изучающих эти эффекты изолированных АТИ у людей. Понимание роли АТИ в появлении симптомов у пациентов с NCWS и СРК важно для предоставления этим пациентам соответствующих диетических рекомендаций, улучшения качества их жизни и снижения риска дефицита питательных веществ.
Исследователи намерены провести экспериментальное исследование для оценки влияния ингибиторов тирозинкиназы на кишечный барьер и иммунную функцию у здоровых добровольцев. Исследователи предполагают, что АТИ либо напрямую влияют на барьерную функцию кишечника, либо опосредованно, активируя иммунный ответ через TLR4.
Исследование соответствует рандомизированному, двойному слепому, плацебо-контролируемому, перекрестному дизайну с использованием здоровых людей-добровольцев (мужчины и женщины) в возрасте от 18 до 65 лет. Каждому добровольцу предстоит пройти два тестовых дня, разделенных периодом вымывания продолжительностью не менее 4 недель. В день тестирования добровольцы получают либо изолированные АТИ, либо плацебо (физиологический раствор), принимаемые через назогастральный интрадуоденальный катетер для питания.
Обзор исследования
Статус
Еще не набирают
Вмешательство/лечение
Тип исследования
Интервенционный
Регистрация (Ожидаемый)
8
Фаза
- Непригодный
Критерии участия
Исследователи ищут людей, которые соответствуют определенному описанию, называемому критериям приемлемости. Некоторыми примерами этих критериев являются общее состояние здоровья человека или предшествующее лечение.
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
От 18 лет до 65 лет (Взрослый, Пожилой взрослый)
Принимает здоровых добровольцев
Да
Полы, имеющие право на обучение
Все
Описание
Критерии включения:
- На основании анамнеза и ранее проведенного самостоятельным осмотром жалоб со стороны желудочно-кишечного тракта и/или заболевания установить не удается.
- Возраст от 18 до 65 лет.
- Индекс массы тела (ИМТ) от 20 до 30 кг/м2.
Критерий исключения:
- В анамнезе тяжелые сердечно-сосудистые, респираторные, мочеполовые, желудочно-кишечные/печеночные, гематологические/иммунологические, HEENT (голова, уши, глаза, нос, горло), дерматологические/соединительная ткань, скелетно-мышечные, метаболические/алиментарные, эндокринные, неврологические/психиатрические заболевания, аллергия, серьезное хирургическое вмешательство и/или лабораторные исследования, которые могут ограничить участие в протоколе исследования или его завершение. Тяжесть заболевания (серьезное вмешательство в проведение эксперимента или потенциальное влияние на результаты исследования) будет решаться главным исследователем.
- Использование лекарств, в том числе витаминных добавок, пре- и пробиотических добавок, кроме оральных контрацептивов, в течение 14 дней до тестирования.
- Прием исследуемых препаратов или участие в любом научном интервенционном исследовании, которое может помешать этому исследованию (по решению главного исследователя), в течение 180 дней до исследования.
- Обширные абдоминальные операции, нарушающие функцию желудочно-кишечного тракта (разрешены неосложненная аппендэктомия, холецистэктомия и гистерэктомия, а также другие операции по решению главного исследователя).
- Беременность, лактация.
- Чрезмерное употребление алкоголя (> 14 приемов алкоголя в неделю).
- Курение.
- Употребление наркотиков.
- Сдача крови в течение 3 месяцев до или после периода исследования.
- Самостоятельное признание ВИЧ-позитивного состояния.
- Планируйте снижение веса или придерживайтесь определенной диеты (например, потеря веса или безглютеновая диета) в течение периода исследования.
Учебный план
В этом разделе представлена подробная информация о плане исследования, в том числе о том, как планируется исследование и что оно измеряет.
Как устроено исследование?
Детали дизайна
- Основная цель: Фундаментальная наука
- Распределение: Рандомизированный
- Интервенционная модель: Назначение кроссовера
- Маскировка: Двойной
Оружие и интервенции
Группа участников / Армия |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
Экспериментальный: Ингибиторы амилазы трипсина (ATI), затем плацебо
День теста 1: интрадуоденальное введение ингибиторов амилазы трипсина (ATI), выделенных из Triticum aestivum (мягкая пшеница), растворенных в физиологическом растворе.
После периода вымывания в течение 4-6 недель, 2-й день теста: интрадуоденальное введение плацебо (физиологический раствор).
|
Внутридуоденальное введение ингибиторов амилазы трипсина (ATI), выделенных из Triticum aestivum (пшеница), растворенных в физиологическом растворе.
Внутридуоденальное введение плацебо (физиологический раствор).
|
|
Экспериментальный: Плацебо, затем ингибиторы трипсина амилазы
1-й день исследования: интрадуоденальное введение плацебо (физиологический раствор).
После периода вымывания в течение 4-6 недель, день теста 2: интрадуоденальное введение ингибиторов трипсина амилазы (ATI), выделенных из Triticum aestivum (мягкая пшеница), растворенных в физиологическом растворе.
|
Внутридуоденальное введение ингибиторов амилазы трипсина (ATI), выделенных из Triticum aestivum (пшеница), растворенных в физиологическом растворе.
Внутридуоденальное введение плацебо (физиологический раствор).
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Разница в экспрессии генов, связанная с функцией кишечного барьера, измеренная в биоптатах двенадцатиперстной кишки, собранных после вмешательства с помощью АТИ или плацебо
Временное ограничение: Биопсии будут собираться через 2 часа после введения ATI или плацебо, в два отдельных дня тестирования. Дни тестирования разделены периодом вымывания продолжительностью 4-6 недель.
|
Экспрессия генов, связанная с функцией кишечного барьера, такая как экспрессия генов белков плотных и адгезивных контактов: например, перисинаптический фактин, миозин, ZO-1, клаудин-3, окклюзия, киназа легкой цепи миозина, фосфорилированная легкая цепь миозина, Е-кадгерин. Биопсия двенадцатиперстной кишки будет получена с помощью эндоскопии верхних отделов желудочно-кишечного тракта. |
Биопсии будут собираться через 2 часа после введения ATI или плацебо, в два отдельных дня тестирования. Дни тестирования разделены периодом вымывания продолжительностью 4-6 недель.
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Разница в уровнях белка, связанная с функцией кишечного барьера, измеренная в биоптатах двенадцатиперстной кишки, собранных после вмешательства с помощью АТИ или плацебо.
Временное ограничение: Биопсии будут собираться через 2 часа после введения ATI или плацебо, в два отдельных дня тестирования. Дни тестирования разделены периодом вымывания продолжительностью 4-6 недель.
|
Экспрессия белков, связанных с барьерной функцией кишечника, таких как белки плотных контактов и адгезивных контактов, с помощью вестерн-блоттинга и иммунофлуоресцентного окрашивания.
Биопсия двенадцатиперстной кишки будет получена с помощью эндоскопии верхних отделов желудочно-кишечного тракта.
|
Биопсии будут собираться через 2 часа после введения ATI или плацебо, в два отдельных дня тестирования. Дни тестирования разделены периодом вымывания продолжительностью 4-6 недель.
|
|
Различия в экспрессии генов, связанные с иммунной функцией, измеренные в биоптатах двенадцатиперстной кишки, собранных после вмешательства с помощью АТИ или плацебо.
Временное ограничение: Биопсии будут собираться через 2 часа после введения ATI или плацебо, в два отдельных дня тестирования. Дни тестирования разделены периодом вымывания продолжительностью 4-6 недель.
|
Экспрессия генов, связанных с иммунной активацией, таких как TLR4, а также провоспалительных цитокинов и антимикробных пептидов. Биопсия двенадцатиперстной кишки будет получена с помощью эндоскопии верхних отделов желудочно-кишечного тракта. |
Биопсии будут собираться через 2 часа после введения ATI или плацебо, в два отдельных дня тестирования. Дни тестирования разделены периодом вымывания продолжительностью 4-6 недель.
|
|
Различия в инфильтрации иммунными клетками ткани двенадцатиперстной кишки, измеренные в биоптатах двенадцатиперстной кишки, собранных после вмешательства с помощью АТИ или плацебо.
Временное ограничение: Биопсии будут собираться через 2 часа после введения ATI или плацебо, в два отдельных дня тестирования. Дни тестирования разделены периодом вымывания продолжительностью 4-6 недель.
|
Инфильтрация иммунных клеток (нейтрофилов, тучных клеток, дендритных клеток) в ткань двенадцатиперстной кишки методом иммунофлуоресцентного окрашивания.
Биопсия двенадцатиперстной кишки будет получена с помощью эндоскопии верхних отделов желудочно-кишечного тракта.
|
Биопсии будут собираться через 2 часа после введения ATI или плацебо, в два отдельных дня тестирования. Дни тестирования разделены периодом вымывания продолжительностью 4-6 недель.
|
|
Разница в изменении желудочно-кишечных симптомов по сравнению с исходным уровнем после вмешательства с помощью АТИ или плацебо.
Временное ограничение: Различные временные точки в течение каждого дня тестирования: за 1 час до и за 5 минут до вмешательства с применением ИТИ или плацебо и через 1 час, 2 часа и 12 часов после вмешательства с применением ИТИ или плацебо.
|
Измеряется по визуальной аналоговой шкале в диапазоне от 0 до 100, где 0 — отсутствие симптомов, 100 — выраженные симптомы; АТИ против плацебо
|
Различные временные точки в течение каждого дня тестирования: за 1 час до и за 5 минут до вмешательства с применением ИТИ или плацебо и через 1 час, 2 часа и 12 часов после вмешательства с применением ИТИ или плацебо.
|
|
Различия в популяциях иммунных клеток крови после вмешательства с помощью АТИ или плацебо
Временное ограничение: Образцы крови будут собираться непосредственно после эндоскопии верхних отделов желудочно-кишечного тракта, в два отдельных дня тестирования. Дни тестирования разделены периодом вымывания продолжительностью 4-6 недель.
|
Количественное определение популяций иммунных клеток (Т-клетки-хелперы, цитотоксические Т-клетки, CD25+ эффекторные Т-клетки, CD69+ эффекторные Т-клетки, регуляторные Т-клетки и NK-клетки) в цельной крови.
|
Образцы крови будут собираться непосредственно после эндоскопии верхних отделов желудочно-кишечного тракта, в два отдельных дня тестирования. Дни тестирования разделены периодом вымывания продолжительностью 4-6 недель.
|
|
Разница в биомаркерах иммунной стимуляции в крови после вмешательства с помощью АТИ или плацебо
Временное ограничение: Образцы крови будут собираться непосредственно после эндоскопии верхних отделов желудочно-кишечного тракта, в два отдельных дня тестирования. Дни тестирования разделены периодом вымывания продолжительностью 4-6 недель.
|
Измерение биомаркеров иммунной стимуляции (таких как цитокины человека IL-10, TGF-β, субъединица IL-12p40, субъединица IL-12p70, IL-1β, IL-2, IL-6, IL-4, IL-17, IL-22 и IFN-γ, TNFα) в цельной крови.
|
Образцы крови будут собираться непосредственно после эндоскопии верхних отделов желудочно-кишечного тракта, в два отдельных дня тестирования. Дни тестирования разделены периодом вымывания продолжительностью 4-6 недель.
|
|
Маркеры крови для функции кишечного барьера после вмешательства с помощью АТИ или плацебо
Временное ограничение: Образцы крови будут собираться непосредственно после эндоскопии верхних отделов желудочно-кишечного тракта, в два отдельных дня тестирования. Дни тестирования разделены периодом вымывания продолжительностью 4-6 недель.
|
Маркеры барьерной функции кишечника (плазменный цитрулин, метаболиты) и повреждения ткани слизистой оболочки тонкого кишечника (кишечный белок, связывающий жирные кислоты (I-FABP)), измеряемые в цельной крови.
|
Образцы крови будут собираться непосредственно после эндоскопии верхних отделов желудочно-кишечного тракта, в два отдельных дня тестирования. Дни тестирования разделены периодом вымывания продолжительностью 4-6 недель.
|
Другие показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Характеристики участников
Временное ограничение: Данные о демографических факторах и истории болезни будут собраны во время скринингового визита.
|
Для оценки пригодности для участия или характеристики исследуемой популяции будут собираться демографические и медицинские данные с использованием скрининговых вопросников.
|
Данные о демографических факторах и истории болезни будут собраны во время скринингового визита.
|
|
Однодневная запись о еде, чтобы убедиться, что потребление пищи одинаково в течение 24 часов до тестового дня 1 и тестового дня 2.
Временное ограничение: За 24 часа до 1-го дня испытаний и после периода вымывания в течение 4–6 недель, а также в течение 24 часов до 2-го дня испытаний
|
Участников попросят повторить прием перед днем тестирования 1 за день до дня тестирования 2. Таким образом, потребление записывается в течение 24 часов до дня тестирования 1 и повторяется (и снова записывается) в течение 24 часов до дня тестирования. 1-й тестовый день, то есть через 4-6 недель после 1-го тестового дня.
|
За 24 часа до 1-го дня испытаний и после периода вымывания в течение 4–6 недель, а также в течение 24 часов до 2-го дня испытаний
|
Соавторы и исследователи
Здесь вы найдете людей и организации, участвующие в этом исследовании.
Спонсор
Следователи
- Главный следователь: Daisy MAE Jonkers, Prof, PhD, Maastricht University
Даты записи исследования
Эти даты отслеживают ход отправки отчетов об исследованиях и сводных результатов на сайт ClinicalTrials.gov. Записи исследований и сообщаемые результаты проверяются Национальной медицинской библиотекой (NLM), чтобы убедиться, что они соответствуют определенным стандартам контроля качества, прежде чем публиковать их на общедоступном веб-сайте.
Изучение основных дат
Начало исследования (Ожидаемый)
1 сентября 2023 г.
Первичное завершение (Ожидаемый)
1 сентября 2024 г.
Завершение исследования (Ожидаемый)
1 сентября 2024 г.
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
6 октября 2021 г.
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
1 декабря 2021 г.
Первый опубликованный (Действительный)
15 декабря 2021 г.
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Действительный)
27 марта 2023 г.
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
24 марта 2023 г.
Последняя проверка
1 марта 2023 г.
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Ключевые слова
Дополнительные соответствующие термины MeSH
- Заболевания пищеварительной системы
- Патологические процессы
- Заболевания иммунной системы
- Болезнь
- Желудочно-кишечные заболевания
- Болезни толстой кишки, функциональные
- Заболевания толстой кишки
- Кишечные заболевания
- Гиперчувствительность
- Синдром
- Синдром раздраженного кишечника
- Молекулярные механизмы фармакологического действия
- Ингибиторы ферментов
- Ингибиторы протеазы
- Ингибиторы сериновых протеиназ
- Ингибиторы трипсина
Другие идентификационные номера исследования
- NL77666.608.21
Планирование данных отдельных участников (IPD)
Планируете делиться данными об отдельных участниках (IPD)?
НЕТ
Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы
Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.
Нет
Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.
Нет
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .