Effetti in vivo degli inibitori dell'amilasi-tripsina (ATI)
Effetti in vivo degli inibitori dell'amilasi-tripsina dal grano nell'intestino umano: prova della causa della sensibilità al grano non celiaca nella sindrome dell'intestino irritabile?
Il grano è l'alimento base più importante consumato nel mondo occidentale e fornisce effetti benefici sulla salute e proprietà funzionali. Tuttavia, una percentuale crescente della popolazione generale sta evitando o riducendo il consumo di prodotti a base di grano a causa di sintomi gastrointestinali (GI) auto-riferiti, come i pazienti con sensibilità al grano non celiaca (NCWS) e/o sindrome dell'intestino irritabile (IBS) . Vi è una crescente evidenza che gli inibitori dell'amilasi tripsina (ATI), che rappresentano fino al 15% delle proteine del grano, svolgono un ruolo nella generazione dei sintomi in NCWS e IBS. Studi in vitro hanno dimostrato che gli ATI possono indurre una risposta immunitaria innata attraverso l'interazione diretta con il recettore toll-like 4 (TLR4), attivando il complesso TLR4-MD2-CD14 con successivo rilascio di citochine pro-infiammatorie. Questi risultati sono stati confermati nei topi. Inoltre, nei topi le ATI hanno innescato la linfocitosi epiteliale intestinale e la disfunzione della barriera e la composizione e il metabolismo del microbiota modificati. Finora, non sono stati condotti studi controllati con placebo che indagassero questi effetti di ATI isolati in soggetti umani. Comprendere il ruolo delle ATI nella generazione dei sintomi nei pazienti NCWS e IBS è importante per fornire a questi pazienti consigli dietetici appropriati, migliorando la loro qualità di vita e diminuendo il rischio di carenze nutrizionali.
I ricercatori mirano a eseguire uno studio di prova per valutare l'effetto degli ATI sulla barriera intestinale e sulla funzione immunitaria in volontari sani. I ricercatori ipotizzano che gli ATI influenzino direttamente la funzione della barriera intestinale o indirettamente attivando una risposta immunitaria tramite TLR4.
Lo studio è conforme a un disegno incrociato randomizzato, in doppio cieco, controllato con placebo, utilizzando volontari umani sani (maschi e femmine), di età compresa tra 18 e 65 anni. I volontari saranno sottoposti ciascuno a due giorni di test, separati da un periodo di sospensione di almeno 4 settimane. Il giorno del test, i volontari ricevono ATI isolati o placebo (soluzione fisiologica), ingeriti utilizzando un catetere di alimentazione intraduodenale nasogastrico.
Panoramica dello studio
Stato
Intervento / Trattamento
Tipo di studio
Iscrizione (Anticipato)
Fase
- Non applicabile
Criteri di partecipazione
Criteri di ammissibilità
Età idonea allo studio
Accetta volontari sani
Sessi ammissibili allo studio
Descrizione
Criterio di inclusione:
- Sulla base dell'anamnesi e del precedente esame autoammesso, non è possibile definire disturbi e/o malattie gastrointestinali.
- Età compresa tra 18 e 65 anni.
- Indice di massa corporea (BMI) tra 20 e 30 kg/m2.
Criteri di esclusione:
- Anamnesi di gravi malattie cardiovascolari, respiratorie, urogenitali, gastrointestinali/epatiche, ematologiche/immunologiche, HEENT (testa, orecchie, occhi, naso, gola), dermatologiche/del tessuto connettivo, muscoloscheletriche, metaboliche/nutrizionali, endocrine, neurologiche/psichiatriche, allergia, chirurgia maggiore e/o valutazioni di laboratorio che potrebbero limitare la partecipazione o il completamento del protocollo di studio. La gravità della malattia (grande interferenza con l'esecuzione dell'esperimento o potenziale influenza sui risultati dello studio) sarà decisa dal ricercatore principale.
- Uso di farmaci, inclusa l'integrazione vitaminica, l'integrazione pre e probiotica, ad eccezione dei contraccettivi orali, entro 14 giorni prima del test.
- Somministrazione di farmaci sperimentali o partecipazione a qualsiasi studio di intervento scientifico, che potrebbe interferire con questo studio (da decidere dal ricercatore principale), nei 180 giorni precedenti lo studio.
- Chirurgia addominale maggiore che interferisce con la funzione gastrointestinale (appendicectomia non complicata, colecistectomia e isterectomia consentite e altri interventi chirurgici a giudizio del ricercatore principale).
- Gravidanza, allattamento.
- Eccessivo consumo di alcol (> 14 consumi alcolici a settimana).
- Fumare.
- Uso di droga.
- Donazione di sangue entro 3 mesi prima o dopo il periodo di studio.
- Stato sieropositivo autoammesso.
- Programmare di perdere peso o seguire una dieta specifica (ad es. perdita di peso o dieta priva di glutine) durante il periodo di studio.
Piano di studio
Come è strutturato lo studio?
Dettagli di progettazione
- Scopo principale: Scienza basilare
- Assegnazione: Randomizzato
- Modello interventistico: Assegnazione incrociata
- Mascheramento: Doppio
Armi e interventi
Gruppo di partecipanti / Arm |
Intervento / Trattamento |
|---|---|
|
Sperimentale: Inibitori dell'amilasi tripsina (ATI), quindi placebo
Test giorno 1: somministrazione intraduodenale di inibitori dell'amilasi tripsina (ATI) isolati da Triticum aestivum (frumento tenero), sciolti in soluzione fisiologica.
Dopo un periodo di wash-out di 4-6 settimane, giorno 2 del test: somministrazione intraduodenale di placebo (soluzione fisiologica).
|
Somministrazione intraduodenale di inibitori dell'amilasi tripsina (ATI) isolati da Triticum aestivum (frumento), sciolti in soluzione fisiologica.
Somministrazione intraduodenale di placebo (soluzione fisiologica).
|
|
Sperimentale: Placebo, quindi inibitori della tripsina dell'amilasi
Test giorno 1: somministrazione intraduodenale di placebo (soluzione fisiologica).
Dopo un periodo di wash-out di 4-6 settimane, giorno 2 del test: somministrazione intraduodenale di inibitori dell'amilasi-tripsina (ATI) isolati da Triticum aestivum (frumento tenero), sciolti in soluzione fisiologica.
|
Somministrazione intraduodenale di inibitori dell'amilasi tripsina (ATI) isolati da Triticum aestivum (frumento), sciolti in soluzione fisiologica.
Somministrazione intraduodenale di placebo (soluzione fisiologica).
|
Cosa sta misurando lo studio?
Misure di risultato primarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
|---|---|---|
|
Differenza nell'espressione genica associata alla funzione di barriera intestinale, misurata nelle biopsie duodenali raccolte dopo l'intervento con ATI o placebo
Lasso di tempo: Le biopsie verranno raccolte 2 ore dopo la somministrazione di ATI o placebo, in due giorni di test separati. I giorni del test sono separati da un periodo di wash-out di 4-6 settimane.
|
Espressione genica associata alla funzione di barriera intestinale, come l'espressione genica delle proteine della giunzione stretta e della giunzione aderente: ad es. Factina peri-giunzionale, miosina, ZO-1, claudina-3, occludente, chinasi della catena leggera della miosina, catena leggera della miosina fosforilata, E-caderina. Le biopsie duodenali saranno ottenute mediante endoscopia del tratto gastrointestinale superiore. |
Le biopsie verranno raccolte 2 ore dopo la somministrazione di ATI o placebo, in due giorni di test separati. I giorni del test sono separati da un periodo di wash-out di 4-6 settimane.
|
Misure di risultato secondarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
|---|---|---|
|
Differenza nei livelli proteici associati alla funzione di barriera intestinale, misurata nelle biopsie duodenali raccolte dopo l'intervento con ATI o placebo.
Lasso di tempo: Le biopsie verranno raccolte 2 ore dopo la somministrazione di ATI o placebo, in due giorni di test separati. I giorni del test sono separati da un periodo di wash-out di 4-6 settimane.
|
Espressione di proteine associate alla funzione di barriera intestinale, come giunzione stretta e giunzione aderente mediante Western blot e colorazione immunofluorescente.
Le biopsie duodenali saranno ottenute mediante endoscopia del tratto gastrointestinale superiore.
|
Le biopsie verranno raccolte 2 ore dopo la somministrazione di ATI o placebo, in due giorni di test separati. I giorni del test sono separati da un periodo di wash-out di 4-6 settimane.
|
|
Differenze nell'espressione genica associate alla funzione immunitaria, misurate nelle biopsie duodenali raccolte dopo l'intervento con ATI o placebo.
Lasso di tempo: Le biopsie verranno raccolte 2 ore dopo la somministrazione di ATI o placebo, in due giorni di test separati. I giorni del test sono separati da un periodo di wash-out di 4-6 settimane.
|
Espressione genica associata all'attivazione immunitaria, come TLR4, e citochine pro-infiammatorie e peptidi antimicrobiota. Le biopsie duodenali saranno ottenute mediante endoscopia del tratto gastrointestinale superiore. |
Le biopsie verranno raccolte 2 ore dopo la somministrazione di ATI o placebo, in due giorni di test separati. I giorni del test sono separati da un periodo di wash-out di 4-6 settimane.
|
|
Differenze nell'infiltrazione di cellule immunitarie nel tessuto duodenale, misurate nelle biopsie duodenali raccolte dopo l'intervento con ATI o placebo.
Lasso di tempo: Le biopsie verranno raccolte 2 ore dopo la somministrazione di ATI o placebo, in due giorni di test separati. I giorni del test sono separati da un periodo di wash-out di 4-6 settimane.
|
Infiltrazione di cellule immunitarie (neutrofili, mastociti, cellule dendritiche) nel tessuto duodenale mediante colorazione immunofluorescente.
Le biopsie duodenali saranno ottenute mediante endoscopia del tratto gastrointestinale superiore.
|
Le biopsie verranno raccolte 2 ore dopo la somministrazione di ATI o placebo, in due giorni di test separati. I giorni del test sono separati da un periodo di wash-out di 4-6 settimane.
|
|
Differenza nella variazione dei sintomi gastrointestinali rispetto al basale dopo l'intervento con ATI o placebo.
Lasso di tempo: Vari punti temporali durante ogni giornata di test: 1 ora prima e 5 minuti prima dell'intervento con ATI o placebo e 1 ora, 2 ore e 12 ore dopo l'intervento con ATI o placebo
|
Misurato sulla scala analogica visiva variava da 0 a 100, in cui 0 è assenza di sintomi e 100 sono sintomi gravi; ATI vs placebo
|
Vari punti temporali durante ogni giornata di test: 1 ora prima e 5 minuti prima dell'intervento con ATI o placebo e 1 ora, 2 ore e 12 ore dopo l'intervento con ATI o placebo
|
|
Differenza nelle popolazioni di cellule immunitarie del sangue dopo l'intervento con ATI o placebo
Lasso di tempo: I campioni di sangue verranno raccolti direttamente dopo l'endoscopia del tratto gastrointestinale superiore, in due giorni di test separati. I giorni del test sono separati da un periodo di wash-out di 4-6 settimane.
|
Quantificazione delle popolazioni di cellule immunitarie (cellule T helper, cellule T citotossiche, cellule T effettrici CD25+, cellule T effettrici CD69+, cellule T regolatorie e cellule NK) nel sangue intero.
|
I campioni di sangue verranno raccolti direttamente dopo l'endoscopia del tratto gastrointestinale superiore, in due giorni di test separati. I giorni del test sono separati da un periodo di wash-out di 4-6 settimane.
|
|
Differenza nei biomarcatori ematici di stimolazione immunitaria dopo l'intervento con ATI o placebo
Lasso di tempo: I campioni di sangue verranno raccolti direttamente dopo l'endoscopia del tratto gastrointestinale superiore, in due giorni di test separati. I giorni del test sono separati da un periodo di wash-out di 4-6 settimane.
|
Misurazione di biomarcatori di stimolazione immunitaria (come le citochine umane IL-10, TGF-β, subunità IL-12p40, subunità IL-12p70, IL-1β, IL-2, IL-6, IL-4, IL-17, IL-22 e IFN-γ, TNFα) nel sangue intero.
|
I campioni di sangue verranno raccolti direttamente dopo l'endoscopia del tratto gastrointestinale superiore, in due giorni di test separati. I giorni del test sono separati da un periodo di wash-out di 4-6 settimane.
|
|
Marcatori ematici per la funzione della barriera intestinale dopo l'intervento con ATI o placebo
Lasso di tempo: I campioni di sangue verranno raccolti direttamente dopo l'endoscopia del tratto gastrointestinale superiore, in due giorni di test separati. I giorni del test sono separati da un periodo di wash-out di 4-6 settimane.
|
Marcatori per la funzione di barriera intestinale (citrulina plasmatica, metaboliti) e lesioni del tessuto della mucosa dell'intestino tenue (proteina legante gli acidi grassi intestinali (I-FABP)), misurati nel sangue intero.
|
I campioni di sangue verranno raccolti direttamente dopo l'endoscopia del tratto gastrointestinale superiore, in due giorni di test separati. I giorni del test sono separati da un periodo di wash-out di 4-6 settimane.
|
Altre misure di risultato
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
|---|---|---|
|
Caratteristiche dei partecipanti
Lasso di tempo: I dati sui fattori demografici e sulla storia medica saranno raccolti durante la visita di screening
|
Per valutare l'idoneità alla partecipazione per caratterizzare la popolazione dello studio, i dati saranno raccolti su dati demografici e anamnesi utilizzando questionari di screening.
|
I dati sui fattori demografici e sulla storia medica saranno raccolti durante la visita di screening
|
|
Il registro alimentare di un giorno per garantire che l'assunzione dietetica sia simile durante le 24 ore prima del giorno 1 e del giorno 2 del test.
Lasso di tempo: 24 ore prima del giorno 1 del test e dopo un periodo di sospensione di 4-6 settimane, anche durante le 24 ore prima del giorno 2 del test
|
Ai partecipanti verrà chiesto di ripetere l'assunzione prima del testday 1 il giorno prima del testday 2. Pertanto, l'assunzione viene annotata durante le 24 ore prima del test day 1 e ripetuta (e nuovamente annotata) durante le 24 ore precedenti testday 1, ovvero 4-6 settimane dopo il test day 1.
|
24 ore prima del giorno 1 del test e dopo un periodo di sospensione di 4-6 settimane, anche durante le 24 ore prima del giorno 2 del test
|
Collaboratori e investigatori
Sponsor
Investigatori
- Investigatore principale: Daisy MAE Jonkers, Prof, PhD, Maastricht University
Studiare le date dei record
Studia le date principali
Inizio studio (Anticipato)
Completamento primario (Anticipato)
Completamento dello studio (Anticipato)
Date di iscrizione allo studio
Primo inviato
Primo inviato che soddisfa i criteri di controllo qualità
Primo Inserito (Effettivo)
Aggiornamenti dei record di studio
Ultimo aggiornamento pubblicato (Effettivo)
Ultimo aggiornamento inviato che soddisfa i criteri QC
Ultimo verificato
Maggiori informazioni
Termini relativi a questo studio
Parole chiave
Termini MeSH pertinenti aggiuntivi
- Malattie dell'apparato digerente
- Processi patologici
- Malattie del sistema immunitario
- Patologia
- Malattie gastrointestinali
- Malattie del colon, funzionali
- Malattie del colon
- Malattie intestinali
- Ipersensibilità
- Sindrome
- Sindrome dell'intestino irritabile
- Meccanismi molecolari dell'azione farmacologica
- Inibitori enzimatici
- Inibitori della proteasi
- Inibitori della Serina Proteinasi
- Inibitori della tripsina
Altri numeri di identificazione dello studio
- NL77666.608.21
Piano per i dati dei singoli partecipanti (IPD)
Hai intenzione di condividere i dati dei singoli partecipanti (IPD)?
Informazioni su farmaci e dispositivi, documenti di studio
Studia un prodotto farmaceutico regolamentato dalla FDA degli Stati Uniti
Studia un dispositivo regolamentato dalla FDA degli Stati Uniti
Queste informazioni sono state recuperate direttamente dal sito web clinicaltrials.gov senza alcuna modifica. In caso di richieste di modifica, rimozione o aggiornamento dei dettagli dello studio, contattare register@clinicaltrials.gov. Non appena verrà implementata una modifica su clinicaltrials.gov, questa verrà aggiornata automaticamente anche sul nostro sito web .