Multicentrická studie o rezistenci na klopidogrel v DAPT pro CAS (MULTI-RESCLOSA)

Záznamy pacientů budou přezkoumány na klinická data (věk, pohlaví, výška a hmotnost), přítomnost kardiovaskulárních rizikových faktorů (diabetes mellitus, hypertenze, dyslipidémie, kouření, ischemická choroba srdeční, chronická obstrukční plicní nemoc), rysy karotidy plaku (typ plaku a stupeň stenózy karotidy podle měření ECST) a stav kontralaterální karotidy. Bude rovněž zaznamenáván výskyt předoperačních neurologických příznaků v průběhu předchozích 6 měsíců podle hodnocení neurologa.

Bude sledován předoperační a pooperační příjem léků se zvláštním zřetelem na statiny, betablokátory, inhibitory angiotenzin-konvertujícího enzymu (ACE), protidestičková léčba a antikoagulační léčba.

Budou také hodnoceny laboratorní údaje, jako je sérový kreatinin, počet krevních destiček, distribuce červených krvinek (RDW), protrombinový čas (PT), mezinárodní normalizovaný poměr (INR), aktivovaný parciální tromboplastinový čas (aPTT) a poměr.

Po operaci budou pacienti sledováni třikrát v prvním roce (v 1. měsíci, 6. měsíci a 12. měsíci) a poté každý rok pomocí ultrazvuku. Pokud byly při ultrazvukovém vyšetření zjištěny komplikace, bude vyžadováno vyšetření angio-počítačovou tomografií. Během sledování budou shromažďována data o výskytu úmrtí, trombóze stentu, cerebrovaskulárních příhodách, srdečních příhodách, závažných hemoragických příhodách.

Stanovení účinnosti protidestičkových léků Účinnost protidestičkových léků bude hodnocena pomocí testu impedance agregometrie, prováděného s analýzou funkce krevních destiček Multiplate® V2.03.11 (Roche, Basel, Švýcarsko).

Technologie Multiplate® je založena na principu elektrické impedanční agregometrie pro stanovení funkce krevních destiček v plné krvi.

Přístroj má pět nezávislých kanálů pro paralelní měření a je připojen k počítači vybavenému specifickým softwarem pro analýzu a zobrazení výsledků v reálném čase.

Krev a reagencie jsou umístěny do jednorázové kyvety obsahující dva páry elektrod, které představují dvě nezávislé senzorové jednotky pro duplicitní měření. Destičky aktivované specifickým agonistou ulpívají na kovovém povrchu senzorů, vytvářejí izolační vrstvu a zvyšují elektrickou impedanci mezi elektrodami. Změna impedance v důsledku adheze a agregace krevních destiček je reprezentována jako funkce času. Plocha zahrnutá v agregační křivce, použitá k měření agregace, je vyjádřena v libovolných agregačních jednotkách (U). Protože se změna impedance měří současně na dvou snímačích, jsou výsledky každého testu vyjádřeny jako průměrná hodnota dvou získaných agregačních křivek.

Odběr krve k posouzení agregace trombocytů byl proveden při hospitalizaci pacienta (v případě, že již klopidogrel užíval), nebo minimálně 6 hodin po zahájení protidestičkové léčby klopidogrelem.

Agregometrickým testem se hodnotí účinnost salicylátů (ASPI-test, agregace s použitím kyseliny arachidonové: normální referenční hodnoty 71-115 U) a účinnost léků působících na receptor adenosindifosfátu (ADP), jako jsou thienopyridiny. (ADP-test, ADP-spouštěná agregace: normální referenční hodnoty 57-113 U), ve srovnání s pozitivní kontrolou pro reaktivitu krevních destiček peptidem aktivujícím trombin-receptor (TRAP)-6 (TRAP-test: normální referenční hodnoty 84-128 U).

Konkrétně budou odebrány 4 ml buď arteriální nebo venózní plné krve do zkumavky obsahující specifické antikoagulační činidlo hirudin. 300 µl plné krve zředěné 300 µL fyziologického roztoku se umístí do jednorázové kyvety pomocí automatické pipety a nechá se inkubovat při 37 ºC po dobu 3 minut. Po inkubaci bude přidán specifický agonista pro požadované vyšetření. Hodnota agregace krevních destiček bude měřena během následujících 6 minut.

Účinnost klopidogrelu je definována průkazem ADP-testu, jehož výsledky jsou pod normálními referenčními hodnotami, jinak je pacient považován za rezistentního vůči účinku léku.