Mikrobiologické hodnocení a klinické 24měsíční sledování adhezivních systémů na kazivém dentinu

Pro tuto studii bylo vybráno sto čtyři zubů od 40 dětí ve věku 6 až 9 let s jednou nebo dvěma povrchovými dočasnými molárními dutinami (okluzní a/nebo proximálně-okluzní dutinou), které vykazují vysokou kazivost. Padesát tři primárních molárů bylo vybráno pro klinické/radiografické hodnocení a 51 primárních molárů bylo vybráno pro mikrobiologické hodnocení ve dvou různých okamžicích.

Výplňové ošetření Pro tuto část studie bylo 53 primárních molárů náhodně rozděleno do Clearfil SE Bond (CB, n = 29) a Clearfil SE Protect (CP, n = 24). Všechny restorativní ošetření byly prováděny stejným zkoušejícím na Graduate Dental Clinic Fakulty zubního lékařství Piracicaba / State University of Campinas. U všech zákroků bylo použito lokální anestetikum. V první konzultaci byl vybraný zub izolován kofferdamem a provedena dentální profylaxe pemzovou pastou. Dále byl na operační plochu aplikován 0,2% chlorhexidin glukonát. Dutiny třídy I/II byly připraveny pomocí vysokorychlostní sterilní frézy z karbidu (#245, KG Sorensen, Barueri, São Paulo, Brazílie) k odstranění roztřepené skloviny, je-li to nutné, a velikosti kompatibilní sterilní frézy z kulaté oceli v nízkém -speed handpiece, byl použit k čištění zkažené tkáně (infikovaného dentinu) ze sklovina-dentinového spojení a bočních stěn kavity, přičemž na dně kavity zůstala postižená dentinová vrstva, aby se zabránilo expozici dřeně. Měkký a barvitelný kazivý dentin byl detekován pomocí Caries Detector (Kuraray) a poté byl na dřeňovou podlahu aplikován jeden z adhezivních systémů CB nebo CP. Podle pokynů výrobce byl primer rychle nanesen mikroštětcem (KG Sorensen, Barueri, SP, Brazílie) na sklovinu a dentin a ponechán v klidu po dobu 20 s (sekund). Poté bylo lepidlo naneseno na celý povrch dutiny mikroštětcem (KG Sorensen, Barueri, SP, Brazílie). Byl aplikován jemný proud bezolejového vzduchu a světelná aktivace byla prováděna po dobu 10 s pomocí jednotky Elipar Tri-light (3M ESPE, Seefeld 82229, Německo) s hustotou výkonu 800 mW/cm2. Zuby byly obnoveny kompozitní pryskyřicí Filtek Z250 (3M ESPE, St Paul, MN, USA) v krocích 2-3 mm a aktivovány světlem po dobu 40 s za použití stejné jednotky pro vytvrzování světlem a hustoty výkonu. Okluze byla zkontrolována uhlíkovým papírem a upravena. Výplně byly dokončeny diamantovými frézami (KG Sorensen, São Paulo, SP, Brazílie) a Flex Discs (3M ESPE, St Paul, Minnesota, USA).

Přímé klinické hodnocení Každá výplň byla hodnocena na shodu barev, okrajové přizpůsobení, okrajové zbarvení, anatomický tvar a sekundární kaz pomocí kritérií USPHS. Skóre Alfa označuje klinicky optimální výplň, skóre Bravo je klinicky přijatelná situace s výjimkou sekundárního kazu a skóre Charlie označuje klinicky nepřijatelné výplně, které je nutné vyměnit. Před vyhodnocením byla provedena profylaxe pemzou a vodnou pastou. Všechna hodnocení byla prováděna za normálních klinických podmínek s dentálním chirurgickým světlem, ústním zrcátkem a zubním průzkumníkem. Hodnocení všech výplní bylo provedeno po 6, 12 a 24 měsících dvěma nezávislými zkoušejícími, kteří byli zaslepeni vůči skupině adhezivních systémů. Pokud došlo k neshodě mezi dvěma zkoušejícími, bylo dosaženo konsensu na straně předsedy.

Nepřímé klinické hodnocení

1. Fotografické vyhodnocení V každém časovém bodě byly fotografie výplní pořízeny poloprofesionálním digitálním fotoaparátem (Sony Cyber-shot DSC-H7, Sony Brasil Ltda, São Paulo, São Paulo) pro srovnávací hodnocení možných klinických změn, ke kterým došlo. během experimentálního období. Hodnocení bylo provedeno s použitím parametrů podobných těm z klinického přímého hodnocení: barevná kombinace, okrajová změna barvy, anatomický tvar a sekundární kaz, s vyloučením okrajové integrity. Snímky s 1,4x zoomem byly analyzovány na stejném počítači dvěma zkoušejícími v různých časech. Jednotlivá skóre byla zaznamenána pro další analýzu.
2. Modely sádry Z každého sanovaného zubu byl odebrán otisk z polyvinylsiloxanu (Elite HD + Putty Soft, Zhermack, Itálie) a umístěn na speciální sádru typu IV. Modely byly kontrolovány examinátorem (AMS) pomocí stereomikroskopu s 16násobným zvětšením. Vybrané soubory nevykazovaly strukturální změny (pozitivní či negativní bubliny) ani jiné deformace, které by mohly narušit posouzení. Byla hodnocena okrajová integrita a anatomické struktury výplní. Kritéria byla porovnána s hodnocením zaznamenaným v základním modelu. Přítomnost opotřebení byla klasifikována jako změna výchozího anatomického tvaru a zlomeniny byly považovány za změnu okrajové celistvosti výplní.

Odběry dentinu a mikrobiologické postupy Pro tuto druhou část studie bylo 51 primárních molárů náhodně rozděleno do Clearfil SE Bond (CB, n = 24) a Clearfil SE Protect (CP, n = 27). Po preparaci kavity a selektivním odstranění kazu, jak je popsáno výše, byl proveden počáteční odběr (základní linie) dentinu postiženého kazem pomocí sterilního lžícového rypadla a přenesen do upraveného sterilního nástroje pro standardizaci množství dentinu (cca. 0,6 mg) odebrané z každého zubu. Odebraný dentin byl umístěn do zkumavek obsahujících 1 ml sterilního 0,9% roztoku NaCl pro následné laboratorní postupy. Následně byla stěna buničiny zcela pokryta jedním z adhezivních systémů, CB nebo CP. Dutiny byly provizorně obnoveny skloionomerním cementem (Maxxion R, FGM, Joinville, SC, Brazílie). Po 3 měsících se jedinci vrátili a jejich zuby byly hodnoceny klinicky a rentgenově. Po lokální anestezii a izolaci kofferdamem byla provizorní náhrada odstraněna a konečný odběr (reentry) rozpadlého dentinu byl proveden podle stejných postupů, jaké byly popsány v úvodním odběru. Zuby byly definitivně obnoveny kompozitní pryskyřicí Filtek Z 250 (3M ESPE, St Paul, MN, USA), přičemž byl zachován stejný adhezivní systém jako dříve.

Vzorky dentinu byly ultrazvukově dispergovány po dobu 15 s (Ultrasonic, LC30, Německo) a naředěny v desítkové řadě v 0,9% NaCl. Následně byly trojnásobné alikvoty získané z ředění rozetřeny na agar Mitis Salivarius (Difco-BD, Sparks, MD, USA) doplněný sacharózou a bacitracinem (0,2 U/ml) pro izolaci streptokoků mutans (MS), Rogosa Agar (Merck, Darmstadt, Německo) pro laktobacily (LB) a Brain Heart Infusion agar (Difco-BD, Sparks, MD, USA) s 5% defibrinovanou ovčí krví k posouzení celkového mikroorganismu (TM). Tyto destičky byly inkubovány po dobu 24-48 hodin při 37 °C v atmosféře 5 % CO2. Po inkubaci byly destičky vyfotografovány a software Image J byl použit k počítání celkového počtu jednotek tvořících kolonie na mililitr (CFU/ml).

Kritéria pro klinické hodnocení dentinového substrátu Po odstranění infikovaného dentinu byl zbývající kazivý dentin hodnocen podle následujících kritérií: konzistence dentinu: 0 = tvrdá (podobná normálnímu dentinu), 1 = poměrně tvrdá (zubová lžička odstraňuje zkaženou tkáň při vynucení) a 2 = měkká (tkáň snadno odstranitelná dentinovou lžičkou); barva dentinu: 0 = tmavě hnědá, 1 = světle hnědá a 2 = žlutá; a vlhkost dentinu: 0 = suchý a 1 = vlhký.