Avaliação microbiológica e acompanhamento clínico de 24 meses de sistemas adesivos em dentina cariada

Cento e quatro dentes de 40 crianças de 6 a 9 anos com uma ou duas cavidades molares decíduos superficiais (cavidades oclusais e/ou oclusais proximais), apresentando alta atividade de cárie, foram selecionados para este estudo. Cinqüenta e três molares decíduos foram selecionados para avaliação clínica/radiográfica e 51 molares decíduos foram selecionados para avaliação microbiológica em dois momentos distintos.

Tratamentos restauradores Para esta parte do estudo, 53 molares decíduos foram aleatoriamente divididos em Clearfil SE Bond (CB, n = 29) e Clearfil SE Protect (CP, n = 24). Todos os tratamentos restauradores foram realizados pelo mesmo examinador na Clínica Odontológica de Graduação da Faculdade de Odontologia de Piracicaba/Universidade Estadual de Campinas. Um agente anestésico local foi usado para todos os procedimentos. Na primeira consulta, o dente selecionado foi isolado com dique de borracha e a profilaxia dentária realizada com pasta de pedra-pomes. Em seguida, foi aplicado gluconato de clorexidina 0,2% na área operada. Cavidades classe I/II foram preparadas com broca de metal duro estéril de alta velocidade (#245, KG Sorensen, Barueri, São Paulo, Brasil) para remover esmalte desgastado, se necessário, e broca redonda estéril de aço de tamanho compatível, em baixa -speed, foi usado para limpar o tecido cariado (dentina infectada) da junção esmalte-dentina e paredes laterais da cavidade, deixando uma camada de dentina afetada no assoalho da cavidade para evitar a exposição da polpa. Dentina cariosa mole e manchada foi detectada usando o Caries Detector (Kuraray) e então um dos sistemas adesivos CB ou CP foi aplicado no assoalho pulpar. Seguindo as instruções do fabricante, o primer foi aplicado rapidamente com um microbrush (KG Sorensen, Barueri, SP, Brasil) em esmalte e dentina e deixado em repouso por 20s (segundos). Em seguida, o adesivo foi aplicado em toda a superfície da cavidade com um microbrush (KG Sorensen, Barueri, SP, Brasil). Um jato suave de ar isento de óleo foi aplicado e a ativação da luz foi realizada por 10 segundos com uma unidade Elipar Tri-light (3M ESPE, Seefeld 82229, Alemanha) com uma densidade de potência de 800 mW/cm2. Os dentes foram restaurados com resina composta Filtek Z250 (3M ESPE, St Paul, MN, EUA) em incrementos de 2-3 mm e ativados por luz por 40s usando a mesma unidade de fotopolimerização e densidade de potência. A oclusão foi verificada com papel carbono e ajustada. As restaurações foram finalizadas com pontas diamantadas (KG Sorensen, São Paulo, SP, Brasil) e Flex Discs (3M ESPE, St Paul, Minnesota, EUA).

Avaliação clínica direta Cada restauração foi avaliada quanto à correspondência de cores, ajuste marginal, descoloração marginal, formato anatômico e cárie secundária usando os critérios da USPHS. O escore Alpha indica restauração clinicamente ótima, o escore Bravo é uma situação clinicamente aceitável, exceto para cárie secundária, e o escore Charlie indica restaurações clinicamente inaceitáveis ​​que devem ser substituídas. Antes da avaliação, foi realizada profilaxia com pedra-pomes e pasta aquosa. Todas as avaliações foram realizadas em condições clínicas normais com lupa cirúrgica odontológica, espelho bucal e sonda exploradora. A avaliação de todas as restaurações foi realizada aos 6, 12 e 24 meses por dois examinadores independentes que desconheciam o grupo do sistema adesivo. Caso houvesse discordância entre os dois examinadores, chegava-se a um consenso do lado da cadeira.

Avaliação clínica indireta

1. Avaliação fotográfica A cada momento foram tiradas fotos das restaurações com câmera digital semi-profissional (Sony Cyber-shot DSC-H7, Sony Brasil Ltda, São Paulo, São Paulo), para avaliação comparativa de possíveis alterações clínicas ocorridas durante o período experimental. A avaliação foi realizada usando parâmetros semelhantes aos da avaliação clínica direta: combinação de cores, descoloração marginal, forma anatômica e cárie secundária, e excluindo a integridade marginal. As imagens com zoom de 1,4X foram analisadas no mesmo computador por dois examinadores em momentos diferentes. Pontuações individuais foram registradas para posterior análise.
2. Modelos de gesso Uma impressão de polivinil siloxano (Elite HD + Putty Soft, Zhermack, Itália) foi feita de cada dente restaurado e colocada em gesso especial tipo IV. Os modelos foram inspecionados por um examinador (AMS) utilizando um estereomicroscópio com aumento de 16x. Os conjuntos selecionados não apresentaram alterações estruturais (bolhas positivas ou negativas) ou outras deformações que pudessem interferir na avaliação. A integridade marginal e as estruturas anatômicas das restaurações foram avaliadas. Os critérios foram comparados com a avaliação registrada no modelo de linha de base. A presença de desgaste foi classificada como alteração na forma anatômica inicial e fratura como alteração na integridade marginal das restaurações.

Coletas de dentina e procedimentos microbiológicos Para esta segunda parte do estudo, 51 molares decíduos foram aleatoriamente divididos em Clearfil SE Bond (CB, n = 24) e Clearfil SE Protect (CP, n = 27). Após o preparo cavitário e remoção seletiva de cárie, conforme descrito acima, a coleta inicial (linha de base) da dentina afetada pela cárie foi realizada com uma colher escavadeira estéril e transferida para um instrumento estéril modificado para padronizar a quantidade de dentina (ca. 0,6 mg) removido de cada dente. A dentina coletada foi colocada em tubos contendo 1 mL de solução estéril de NaCl a 0,9% para posterior procedimento laboratorial. Posteriormente, a parede pulpar foi completamente coberta com um dos sistemas adesivos, CB ou CP. As cavidades foram provisoriamente restauradas com cimento de ionômero de vidro (Maxxion R, FGM, Joinville, SC, Brasil). Após 3 meses, os indivíduos retornaram e seus dentes foram avaliados clínica e radiograficamente. Após anestesia local e isolamento com dique de borracha, a restauração provisória foi removida e a coleta final (reentrada) da dentina cariada foi realizada seguindo os mesmos procedimentos descritos na coleta inicial. Os dentes foram restaurados definitivamente com resina composta Filtek Z 250 (3M ESPE, St Paul, MN, EUA), mantendo o mesmo sistema adesivo utilizado anteriormente.

As amostras de dentina foram dispersas ultrassonicamente por 15s (Ultrasonic, LC30, Alemanha) e diluídas em séries decimais em NaCl 0,9%. Posteriormente, alíquotas triplicadas obtidas das diluições foram semeadas em ágar Mitis Salivarius (Difco-BD, Sparks, MD, EUA) suplementado com sacarose e bacitracina (0,2 U/mL) para isolamento de estreptococos mutans (MS), ágar Rogosa (Merck, Darmstadt, Alemanha) para lactobacilos (LB) e ágar Brain Heart Infusion (Difco-BD, Sparks, MD, EUA) com 5% de sangue de carneiro desfibrinado para avaliar o microrganismo total (TM). Estas placas foram incubadas por 24-48h a 37o C em uma atmosfera de 5% de CO2. Após a incubação, as placas foram fotografadas e o software Image J contado o número total de unidades formadoras de colônias por mililitro (UFC/mL).

Critérios para avaliação clínica do substrato de dentina Após a remoção da dentina infectada, a dentina cariada remanescente foi avaliada de acordo com os seguintes critérios: consistência da dentina: 0 = dura (semelhante à dentina normal), 1 = bastante dura (colher de dentina remove tecido cariado quando forçado) e 2 = macio (tecido facilmente removido pela colher de dentina); cor da dentina: 0 = marrom escuro, 1 = marrom claro e 2 = amarelo; e umidade da dentina: 0 = seco e 1 = úmido.