Mikrobiologisk evaluering og klinisk 24-måneders oppfølging av limsystemer på karies dentin

Ett hundre og fire tenner fra 40 barn i alderen 6 til 9 år med ett eller to overfladiske løvfellende molare hulrom (okklusale og/eller proksimale okklusale hulrom), med høy kariesaktivitet, ble valgt ut for denne studien. 53 primære molarer ble valgt for klinisk/radiografisk evaluering og 51 primære molarer ble valgt for mikrobiologisk evaluering i to forskjellige øyeblikk.

Restorative behandlinger For denne delen av studien ble 53 primære molarer tilfeldig delt inn i Clearfil SE Bond (CB, n = 29) og Clearfil SE Protect (CP, n = 24). Alle restaurerende behandlinger ble utført av samme sensor ved Graduate Dental Clinic ved Fakultet for odontologi i Piracicaba / State University of Campinas. Et lokalbedøvelsesmiddel ble brukt til alle prosedyrer. Ved første konsultasjon ble den valgte tannen isolert med kofferdam og tannprofylakse utført med pimpsteinpasta. Deretter ble 0,2 % klorheksidinglukonat påført operasjonsområdet. Klasse I/II hulrom ble preparert ved bruk av en høyhastighets steril karbidbor (#245, KG Sorensen, Barueri, São Paulo, Brasil) for å fjerne frynsete emalje, om nødvendig, og en størrelseskompatibel steril rund stålbor, i en lav -speed håndstykke, ble brukt til å rense råtnet vev (infisert dentin) fra emalje-dentin-forbindelsen og sideveggene i hulrommet, og etterlot et påvirket dentinlag på hulrommets gulv for å forhindre eksponering av massen. Mykt og fargebart kariest dentin ble påvist ved hjelp av kariesdetektor (Kuraray) og deretter ble et av limsystemene CB eller CP påført på massegulvet. Etter produsentens instruksjoner ble primeren raskt påført med en mikrobørste (KG Sorensen, Barueri, SP, Brasil) på emalje og dentin og latt stå uforstyrret i 20 sekunder (sekunder). Deretter ble limet påført hele hulromsoverflaten med en mikrobørste (KG Sorensen, Barueri, SP, Brasil). En forsiktig strøm av oljefri luft ble tilført, og lysaktivering ble utført i 10 sekunder med en Elipar Tri-light enhet (3M ESPE, Seefeld 82229, Tyskland) med en effekttetthet på 800 mW/cm2. Tennene ble restaurert med Filtek Z250 komposittharpiks (3M ESPE, St Paul, MN, USA) i trinn på 2-3 mm og aktivert av lys i 40 sekunder ved bruk av samme lysherdeenhet og effekttetthet. Okklusjonen ble sjekket med karbonpapir og justert. Restaureringene ble fullført med diamantbor (KG Sorensen, São Paulo, SP, Brasil) og Flex Discs (3M ESPE, St Paul, Minnesota, USA).

Direkte klinisk evaluering Hver restaurering ble evaluert for fargetilpasning, marginal passform, marginal misfarging, anatomisk form og sekundær karies ved å bruke USPHS-kriteriene. Alfa-skåren indikerer klinisk optimal restaurering, Bravo-skåren er en klinisk akseptabel situasjon, bortsett fra sekundær karies, og Charlie-skåren indikerer klinisk uakseptable restaureringer som må erstattes. Før evalueringen ble det utført profylakse med pimpstein og vandig pasta. Alle evalueringer ble utført under normale kliniske forhold med et tannkirurgisk lys, et munnspeil og en dental explorer. Evaluering av alle restaureringer ble utført etter 6, 12 og 24 måneder av to uavhengige undersøkere som var blindet for limsystemgruppen. Hvis det var uenighet mellom de to sensorene, ble det oppnådd enighet på siden av stolen.

Indirekte klinisk evaluering

1. Fotografisk evaluering Ved hvert tidspunkt ble bilder av restaureringene tatt med et semi-profesjonelt digitalkamera (Sony Cyber-shot DSC-H7, Sony Brasil Ltda, São Paulo, São Paulo), for sammenlignende evaluering av mulige kliniske endringer som har skjedd i løpet av forsøksperioden. Vurderingen ble utført ved å bruke parametere som ligner på den kliniske direkte vurderingen: fargekombinasjon, marginal misfarging, anatomisk form og sekundær karies, og ekskluderer marginal integritet. Bilder med 1,4X zoom ble analysert på samme datamaskin av to sensorer til forskjellige tider. Individuelle skårer ble registrert for videre analyse.
2. Gipsmodeller Et polyvinylsiloksanavtrykk (Elite HD + Putty Soft, Zhermack, Italia) ble tatt av hver restaurert tann og plassert på spesiell type IV-gips. Modellene ble inspisert av en undersøker (AMS) ved bruk av et stereomikroskop med 16x forstørrelse. De valgte settene presenterte ikke strukturelle endringer (positive eller negative bobler) eller andre deformasjoner som kunne forstyrre vurderingen. Den marginale integriteten og anatomiske strukturene til restaureringene ble vurdert. Kriteriene ble sammenlignet med vurderingen registrert i grunnmodellen. Tilstedeværelsen av slitasje ble klassifisert som en endring i den opprinnelige anatomiske formen, og brudd ble ansett som en endring i den marginale integriteten til restaureringene.

Dentinsamlinger og mikrobiologiske prosedyrer For denne andre delen av studien ble 51 primære molarer tilfeldig delt inn i Clearfil SE Bond (CB, n = 24) og Clearfil SE Protect (CP, n = 27). Etter forberedelse av hulrom og selektiv kariesfjerning, som beskrevet ovenfor, ble den innledende samlingen (grunnlinje) av dentin påvirket av karies utført med en steril skjegravemaskin og overført til et modifisert sterilt instrument for å standardisere mengden dentin (ca. 0,6 mg) fjernet fra hver tann. Det oppsamlede dentinet ble plassert i rør som inneholdt 1 ml steril 0,9 % NaCl-løsning for påfølgende laboratorieprosedyrer. Deretter ble masseveggen fullstendig dekket med et av limsystemene, CB eller CP. Hulrommene ble provisorisk restaurert med glassionomersement (Maxxion R, FGM, Joinville, SC, Brasil). Etter 3 måneder kom personene tilbake, og tennene deres ble evaluert klinisk og radiografisk. Etter lokalbedøvelse og isolering med en kofferdam, ble den provisoriske restaureringen fjernet og den endelige innsamlingen (gjeninnføring) av det nedbrutte dentinet ble utført etter de samme prosedyrene beskrevet i den første innsamlingen. Tennene ble definitivt restaurert med Filtek Z 250 komposittharpiks (3M ESPE, St Paul, MN, USA), med samme limsystem som tidligere.

Dentinprøvene ble dispergert med ultralyd i 15 sekunder (Ultrasonic, LC30, Tyskland) og fortynnet i desimalserier i 0,9 % NaCl. Deretter ble trippelprøver oppnådd fra fortynningene spredt på Mitis Salivarius agar (Difco-BD, Sparks, MD, USA) supplert med sukrose og bacitracin (0,2 U/mL) for isolering av mutans streptokokker (MS), Rogosa Agar (Merck, Darmstadt, Tyskland) for laktobaciller (LB) og Brain Heart Infusion agar (Difco-BD, Sparks, MD, USA) med 5 % defibrinert saueblod for å vurdere den totale mikroorganismen (TM). Disse platene ble inkubert i 24-48 timer ved 37°C i en atmosfære på 5 % CO2. Etter inkubering ble platene fotografert, og Image J-programvare ble brukt til å telle det totale antallet kolonidannende enheter per milliliter (CFU/ml).

Kriterier for klinisk evaluering av dentinsubstratet Etter fjerning av det infiserte dentinet, ble det gjenværende kariestannbenet evaluert i henhold til følgende kriterier: dentinkonsistens: 0 = hardt (likt normalt dentin), 1 = ganske hardt (dentinskje fjerner vev som er forfalt når tvunget), og 2 = myk (vevet fjernes lett med dentinskjeen); dentinfarge: 0 = mørkebrun, 1 = lysebrun og 2 = gul; og dentinfuktighet: 0 = tørr og 1 = våt.