Valutazione microbiologica e follow-up clinico a 24 mesi dei sistemi adesivi su dentina cariata

Per questo studio sono stati selezionati centoquattro denti di 40 bambini di età compresa tra 6 e 9 anni con una o due cavità molari decidue superficiali (cavità occlusali e/o prossimali-occlusali), che presentavano un'elevata attività cariosa. Cinquantatré molari primari sono stati selezionati per la valutazione clinica/radiografica e 51 molari primari sono stati selezionati per la valutazione microbiologica in due momenti diversi.

Trattamenti restaurativi Per questa parte dello studio, 53 molari primari sono stati divisi casualmente in Clearfil SE Bond (CB, n = 29) e Clearfil SE Protect (CP, n = 24). Tutti i trattamenti restaurativi sono stati eseguiti dallo stesso esaminatore presso la Graduate Dental Clinic della Facoltà di Odontoiatria di Piracicaba / Università Statale di Campinas. Per tutte le procedure è stato utilizzato un agente anestetico locale. Nella prima visita il dente prescelto è stato isolato con diga di gomma e profilassi dentale eseguita con pasta di pomice. Successivamente, è stata applicata all'area operatoria clorexidina gluconato allo 0,2%. Le cavità di classe I/II sono state preparate utilizzando una fresa in carburo sterile ad alta velocità (n. -speed, è stato utilizzato per pulire il tessuto cariato (dentina infetta) dalla giunzione smalto-dentina e dalle pareti laterali della cavità, lasciando uno strato di dentina interessata sul pavimento della cavità per prevenire l'esposizione della polpa. La dentina cariata morbida e colorabile è stata rilevata utilizzando il rilevatore di carie (Kuraray) e quindi uno dei sistemi adesivi CB o CP è stato applicato sul pavimento pulpare. Seguendo le istruzioni del produttore, il primer è stato rapidamente applicato con un microbrush (KG Sorensen, Barueri, SP, Brasile) su smalto e dentina e lasciato indisturbato per 20 secondi. Successivamente, l'adesivo è stato applicato all'intera superficie della cavità con un microbrush (KG Sorensen, Barueri, SP, Brasile). È stato applicato un flusso delicato di aria priva di olio e l'attivazione della luce è stata eseguita per 10 secondi con un'unità Elipar Tri-light (3M ESPE, Seefeld 82229, Germania) con una densità di potenza di 800 mW/cm2. I denti sono stati restaurati con resina composita Filtek Z250 (3M ESPE, St Paul, MN, USA) con incrementi di 2-3 mm e attivati ​​dalla luce per 40 secondi utilizzando la stessa unità di fotopolimerizzazione e densità di potenza. L'occlusione è stata controllata con carta carbone e aggiustata. I restauri sono stati completati con frese diamantate (KG Sorensen, São Paulo, SP, Brasile) e Flex Disc (3M ESPE, St Paul, Minnesota, USA).

Valutazione clinica diretta Ciascun restauro è stato valutato per corrispondenza cromatica, adattamento marginale, decolorazione marginale, forma anatomica e carie secondaria utilizzando i criteri USPHS. Il punteggio Alpha indica un restauro clinicamente ottimale, il punteggio Bravo è una situazione clinicamente accettabile, fatta eccezione per la carie secondaria, e il punteggio Charlie indica restauri clinicamente inaccettabili che devono essere sostituiti. Prima della valutazione è stata eseguita la profilassi con pomice e pasta acquosa. Tutte le valutazioni sono state effettuate in condizioni cliniche normali con una lampada chirurgica dentale, uno specchietto per la bocca e un esploratore dentale. La valutazione di tutti i restauri è stata effettuata a 6, 12 e 24 mesi da due esaminatori indipendenti che erano all'oscuro del gruppo del sistema adesivo. Se c'era disaccordo tra i due esaminatori, si raggiungeva un consenso dalla parte della sedia.

Valutazione clinica indiretta

1. Valutazione fotografica Ad ogni punto temporale, sono state scattate foto dei restauri con una fotocamera digitale semi-professionale (Sony Cyber-shot DSC-H7, Sony Brasil Ltda, São Paulo, São Paulo), per una valutazione comparativa dei possibili cambiamenti clinici che si sono verificati durante il periodo sperimentale. La valutazione è stata eseguita utilizzando parametri simili a quelli della valutazione clinica diretta: combinazione di colori, decolorazione marginale, forma anatomica e carie secondaria, escludendo l'integrità marginale. Le immagini con uno zoom 1,4X sono state analizzate sullo stesso computer da due esaminatori in momenti diversi. I punteggi individuali sono stati registrati per ulteriori analisi.
2. Modelli in gesso Da ogni dente restaurato è stata presa un'impronta in polivinilsilossano (Elite HD + Putty Soft, Zhermack, Italia) e posta su uno speciale gesso di tipo IV. I modelli sono stati ispezionati da un esaminatore (AMS) utilizzando uno stereomicroscopio con ingrandimento 16x. I set selezionati non presentavano cambiamenti strutturali (bolle positive o negative) o altre deformazioni che potessero interferire con la valutazione. Sono state valutate l'integrità marginale e le strutture anatomiche dei restauri. I criteri sono stati confrontati con la valutazione registrata nel modello di riferimento. La presenza di usura è stata classificata come un cambiamento nella forma anatomica iniziale e le fratture sono state considerate come un cambiamento nell'integrità marginale dei restauri.

Raccolte di dentina e procedure microbiologiche Per questa seconda parte dello studio, 51 molari primari sono stati divisi casualmente in Clearfil SE Bond (CB, n = 24) e Clearfil SE Protect (CP, n = 27). Dopo la preparazione della cavità e la rimozione selettiva della carie, come descritto sopra, la raccolta iniziale (baseline) della dentina affetta da carie è stata eseguita con un escavatore a cucchiaio sterile e trasferita su uno strumento sterile modificato per standardizzare la quantità di dentina (ca. 0,6 mg) rimossi da ciascun dente. La dentina raccolta è stata posta in provette contenenti 1 mL di soluzione sterile di NaCl allo 0,9% per le successive procedure di laboratorio. Successivamente, la parete pulpare è stata completamente ricoperta con uno dei sistemi adesivi, CB o CP. Le cavità sono state restaurate provvisoriamente con cemento vetroionomerico (Maxxion R, FGM, Joinville, SC, Brasile). Dopo 3 mesi, gli individui sono tornati ei loro denti sono stati valutati clinicamente e radiograficamente. Dopo anestesia locale e isolamento con diga di gomma, è stato rimosso il restauro provvisorio ed è stato effettuato il prelievo definitivo (rientro) della dentina cariata seguendo le stesse modalità descritte nel prelievo iniziale. I denti sono stati restaurati definitivamente con la resina composita Filtek Z 250 (3M ESPE, St Paul, MN, USA), mantenendo lo stesso sistema adesivo utilizzato in precedenza.

I campioni di dentina sono stati dispersi ad ultrasuoni per 15 secondi (Ultrasonic, LC30, Germania) e diluiti in serie decimali in NaCl allo 0,9%. Successivamente, aliquote triplicate ottenute dalle diluizioni sono state distribuite su agar Mitis Salivarius (Difco-BD, Sparks, MD, USA) addizionato con saccarosio e bacitracina (0,2 U/mL) per l'isolamento di streptococchi mutans (MS), Rogosa Agar (Merck, Darmstadt, Germania) per i lattobacilli (LB) e Brain Heart Infusion agar (Difco-BD, Sparks, MD, USA) con sangue di montone defibrinato al 5% per valutare il microrganismo totale (TM). Queste piastre sono state incubate per 24-48 ore a 37°C in un'atmosfera del 5% di CO2. Dopo l'incubazione, le piastre sono state fotografate e il software Image J è stato utilizzato per contare il numero totale di unità formanti colonie per millilitro (CFU/mL).

Criteri per la valutazione clinica del substrato dentinale Dopo la rimozione della dentina infetta, la restante dentina cariata è stata valutata secondo i seguenti criteri: consistenza della dentina: 0 = dura (simile alla dentina normale), 1 = piuttosto dura (il cucchiaio per dentina rimuove il tessuto cariato quando forzato), e 2 = morbido (tessuto facilmente rimosso dal cucchiaio per dentina); colore della dentina: 0 = marrone scuro, 1 = marrone chiaro e 2 = giallo; e umidità della dentina: 0 = secco e 1 = umido.