Lasery v léčbě periimplantitidy

Studie byla navržena jako prospektivní, randomizovaná, kontrolovaná studie v délce 6 měsíců. Účastníci byli rekrutováni z katedry parodontologie a biologie implantátů Fakulty zubního lékařství, School of Health Sciences, Aristotelovy univerzity v Soluni. Pacienti účastnící se této studie by měli mít alespoň jeden implantát diagnostikovaný s periimplantitidou podle definice World Workshop on Pariodontology z roku 2017.

Dvě skupiny byly kontrolní skupinou (skupina C), kde byla prováděna chirurgická periimplantitidová terapie s použitím přístupové chlopně a mechanické instrumentace kontaminovaného povrchu implantátu. V testovací skupině (laserová skupina) byla provedena chirurgická léčba za současného použití laserového ozařování kontaminovaného povrchu implantátu.

Aby bylo možné posoudit hloubku periimplantátového kostního defektu, bylo na počátku provedeno radiografické vyšetření.

Zařazení pacientů do dvou skupin studie bylo následováno procesem randomizace s využitím počítačového softwaru (www.randomizer.org). U pacientů s více než jedním implantátem s periimplantitidou druhý randomizační postup se stejným postupem určil, který implantát bude zahrnut. Výsledky randomizace byly umístěny do neprůhledných obálek přístupných pouze supervizorovi (I.V.) a předány ošetřujícímu zkoušejícímu pro každého pacienta těsně před terapeutickou intervencí. Tato výzkumná studie byla schválena etickou komisí Fakulty zubního lékařství. Protokol č. 83/15-06-2020. Všichni účastníci obdrželi písemné informace o cíli a postupech studie a poté byli požádáni, aby podepsali svůj souhlas.

Výpočet velikosti vzorku byl proveden na základě analýzy pacienta, aby se zjistil klinicky významný rozdíl v hloubce sondy (PPD) 1 mm ± 0,75 mm SD mezi dvěma skupinami (kontrolní a laserová). Chyba typu I byla nastavena na úroveň 0,05 a výkon na 0,80. Minimální požadovaná velikost vzorku byla vypočtena na deset pacientů na skupinu. Kromě toho, aby bylo možné detekovat klinicky významný rozdíl v PPD 1 mm ± 1 mm SD mezi dvěma časovými obdobími, v rámci skupiny, s chybou 0,05 typu I a 0,80, byla minimální požadovaná velikost vzorku odhadnuta na deset pacientů na skupinu. také.

Časová osa ošetření:

Po úvodním klinickém a radiografickém vyšetření byli pacienti vyšetřeni a podle toho byla potvrzena vhodnost pro zařazení do studie. Při základním vyšetření byla provedena klinická měření a odběr periimplantační krevikulární tekutiny (PICF) pro odběr biomarkerů. PICF byl získán před sondováním a alespoň 24 hodin po počátečním vyšetření, aby se zabránilo kontaminaci krví. Na základním sezení, po vstupním posouzení, pacienti dostávali indikace ústní hygieny a nechirurgickou terapii periimplantátových defektů ve smyslu škálování a hoblování kořenů titanovými kyretami a doplňkové použití chlorhexidinu 0,20% irigaci periimplantátového sulku . Před operací byl také proveden mechanický debridement celého chrupu pomocí ultrazvuku a ručních nástrojů. Čtyři šest týdnů po nechirurgické léčbě byla naplánována operace. Každý pacient byl sledován po dobu dvou týdnů, tří měsíců a šesti měsíců po operaci a bylo provedeno posílení ústní hygieny. Klinická měření a hodnocení biomarkerů byla provedena na začátku a šest měsíců po operaci. Na začátku a šest měsíců po léčbě byly zaznamenány následující klinické parametry: skóre plaku v plných ústech (FMPS), procento míst pozitivních na krvácení při sondování (BoP), hloubka kapsy sondy (PPD), gingivální recese (REC) a sondování úrovně připojení (PAL).

• BoP: přítomnost (+) nebo absence (-) krvácení v procentech (%) 30 s po zavedení sondy do periimplantační kapsy
• FMPS: Plnoústní plaketa skóre
• PPD: vzdálenost od okraje sliznice ke dnu periimplantátové kapsy.
• REC: vzdálenost od ramene protetické korunky k okraji sliznice
• PAL: vzdálenost od ramene protetické korunky ke spodní části sulku nebo periimplantační kapsy.

Všechna měření byla zaznamenána na šesti místech na implantát pomocí 15mm měřítka periodontální sondy a odstupňována po 1 mm (Hu-friedy® CP-12). Tři nejhlubší místa u každého implantátu byla zahrnuta do statistické analýzy pro hodnocení PPD a PAL. Všechna vyšetření byla provedena stejným zkoušejícím (I.F.). Reprodukovatelnost v rámci vyšetřovatele byla vypočtena během dvou kalibračních sezení. Shoda v rámci vyšetřovatele byla hodnocena pomocí korelačního koeficientu uvnitř třídy (ICC) a vykazovala shodu 0,93 (95% CI: 0,89 až 0,96).

Chirurgické postupy Byla aplikována lokální anestezie a každý pacient použil ústní vodu roztok 0,20 % chlorhexidinu pro předchirurgickou dezinfekci úst. Po vnitřní zkosené incizi byly zvednuty chlopně plné tloušťky, aby se dosáhlo periimplantátových kostních defektů.

• Kontrolní skupina (skupina C): Bylo provedeno odstranění granulační tkáně a mechanické instrumentace povrchu implantátu s použitím titanových implantátových scalerů (@Hu-Friedy, IMPLG1/2T). Po instrumentaci následovalo důkladné očištění povrchu implantátu pomocí sterilizované gázy napuštěné 0,2% roztokem chlorhexidinu.
• Testovací skupina (skupina L): V testovací skupině byl použit laser Nd: YAG, 1064nm (Fotona, Light Walker AT, Lublaň, Slovinsko) kombinovaný s laserem Er:YAG, 2940nm (Fotona, Light Walker AT, Lublaň, Slovinsko). . Zpočátku bylo odstranění granulační tkáně prováděno s využitím Er: YAG laseru 160 mJ, 10 Hz, LP, 1,3 mm válcový hrot, násadec H14-C, W/A: 6/4, 30 ml za minutu. Navíc byla provedena dekontaminace povrchu implantátu Er: YAG laserem 2940nm, režim QSP, 45mj, 20Hz, bezkontaktní, násadec H02-C, W/A: 6/4 . Krvácející místa a dezinfekce kostí byly vytvořeny aplikací Εr: YAG laser 160mJ, 15Hz, bezkontaktní, H02-C násadec, W/A: 6/4 (Fotona, Light Walker AT, Lublaň, Slovinsko). Následně byl použit Nd:YAG laser 1,5W, 15Hz, MSP, bezkontaktní násadec R21-C3, vlákno 300μm pro hloubkovou dekontaminaci tkání a snížení mikrobiální zátěže. Dbalo se na to, aby vlákno nemířilo na povrch implantátu. Nakonec byl po sešití pro fotobiomodulaci aplikován Nd: YAG laser 0,5W, 10Hz, VLP, bezkontaktní násadec R21-C3, vlákno 300μm (Fotona, Light Walker AT, Ljubljana, Slovinsko) v nízké úrovni. Všechna nastavení laseru byla založena na fyzikálních vlastnostech laseru a interakci s tkáněmi a povrchy implantátů. Protokol byl naplánován ve spolupráci s laserovou společností s ohledem na předchozí studie využívající Er:YAG lasery u periimplantitidy. Během laserového záření měli zubní personál i pacienti nasazeny ochranné brýle. V kontrolní i laserové skupině byla v případě potřeby provedena osteoplastika pro lepší adaptaci laloku.

Koncový bod debridementu pro každé ošetření byl stanoven makroskopickou kontrolou místa defektu. Po sešití byly pacientům podávány pooperační pokyny a analgetika (ibuprofen 400 mg třikrát denně po dobu čtyř dnů). Stehy byly odstraněny asi 14 dní po operaci a všem pacientům byly poskytnuty pooperační pokyny. Ty zahrnovaly chlorhexidin 0,12% ústní vodu dvakrát denně po dobu dvou týdnů, pouze pro kontrolní skupinu, a pečlivé čištění zubů měkkým zubním kartáčkem tak, aby sešitá oblast byla účinně vyčištěna, ale ne traumatizovaná pro obě skupiny.

Sběr a hodnocení biomarkeru Peri-implantační crevikulární tekutina (PICF) a vzorky byly odebrány z jednoho místa implantátu každého jednotlivce účastnícího se studie. Vzorky byly odebrány alespoň 24 hodin po počátečním klinickém vyšetření, aby se zabránilo kontaminaci krví z míst v periimplantátu, která vykazují nejhlubší hloubku sondování. Vzorky byly odebrány pomocí techniky filtračního papíru. Stručně řečeno, místa odběru vzorků byla izolována, sušena na vzduchu a izolována bavlněnými smotky, supragingivální biofilm byl jemně odstraněn a poté byl do periimplantátového sulku/kapsy vložen jemný sterilní papírový proužek, dokud nebyl pociťován mírný odpor a ponechán. na místě po dobu 30s. Proužky, které byly vizuálně kontaminovány krví nebo slinami, byly zlikvidovány. Získaný objem vzorku tekutiny v proužku byl měřen výpočtem objemu resorbovaného PICF za 30 s a papírové proužky byly vloženy do mikrocentrifugačních plastových zkumavek. Získané vzorky byly skladovány při -80 °C, dokud nebyly zpracovány pro biochemickou analýzu pomocí enzymatických imunosorbčních testů (ELISA).

Před analýzou byly vzorky zředěny roztokem fosfátového pufru (PBS), centrifugovány po dobu 20 minut při 4000 g, aby se oddělily buňky a zbytky, a poté byly papírové proužky odstraněny. Získané vzorky byly skladovány při 20 °C až do zpracování pro biochemickou analýzu. K měření koncentrací kostních biomarkerů byly použity komerčně dostupné soupravy ELISA: sRANKL a OPG, z PICF (Biovendor sRANKL (total) Human ELISA (Osteoprotegerin Ligand, OPG (total) Human Osteoprotegerin, Biovendor - Labolatorni medicina as - Česká republika) . Minimální detekční limity byly: sRANKL (0,4 pmol/l) a OPG (0,03 pmol/l). Stručně řečeno, ELISA a monoklonální protilátky specifické pro tyto biomarkery byly předem potaženy na mikrodestičku. Po promytí nenavázaných látek byla do každé jamky přidána polyklonální protilátka spojená s enzymem specifická pro biomarker. Destička byla inkubována při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny a jamky byly znovu promyty. Po jedné hodině inkubace byl přidán zastavovací roztok a reakce byla zastavena. Vyvolaná barva, úměrná množství biomarkeru navázaného v počátečním kroku, umožnila měření její intenzity pomocí spektrofotometrie (450/620 nm, procesor ELISA). Regresní analýzou byla vynesena kalibrační křivka a k odhadu koncentrace biomarkerů byla použita optická hustota vzorku. Koncentrace byly vyjádřeny jako biomarker za 30 sekund (pg/30s). Během laboratorní analýzy byly vzorky pro laboratorního technika slepé.