Laser nel trattamento della perimplantite

Lo studio è stato concepito come uno studio prospettico, randomizzato e controllato della durata di 6 mesi. I partecipanti sono stati reclutati dal Dipartimento di Parodontologia e Biologia Implantare della Facoltà di Odontoiatria, Scuola di Scienze della Salute, Università Aristotele di Salonicco. I pazienti che partecipano a questo studio devono avere almeno un impianto con diagnosi di perimplantite secondo la definizione del Workshop mondiale 2017 sulla parodontologia.

I due gruppi erano il gruppo di controllo (gruppo C), dove veniva eseguita la terapia chirurgica della perimplantite con l'utilizzo di un lembo di accesso e strumentazione meccanica della superficie implantare contaminata. Nel gruppo di test (gruppo Laser), il trattamento chirurgico è stato effettuato con l'uso combinato di irradiazione laser della superficie implantare contaminata.

Al fine di valutare la profondità del difetto osseo perimplantare, è stato eseguito un esame radiografico al basale.

L'assegnazione dei pazienti nei due gruppi dello studio è stata seguita da un processo di randomizzazione con l'uso di un software per computer (www.randomizer.org). Nei pazienti con più di un impianto affetto da perimplantite, una seconda procedura di randomizzazione con la stessa procedura ha determinato quale impianto sarebbe stato incluso. I risultati della randomizzazione sono stati collocati in buste opache accessibili solo dal supervisore (I.V.) e consegnati all'investigatore curante per ciascun paziente, appena prima dell'intervento terapeutico. Il presente studio di ricerca è stato approvato dal Comitato Etico della Scuola di Odontoiatria. Protocollo n. 83/15-06-2020. Tutti i partecipanti hanno ricevuto informazioni scritte riguardanti lo scopo e le procedure dello studio e, successivamente, è stato chiesto loro di firmare il proprio consenso.

Il calcolo della dimensione del campione è stato eseguito su un'analisi basata sul paziente al fine di rilevare una differenza clinicamente significativa nella profondità della tasca di sondaggio (PPD) di 1 mm ± 0,75 mm SD tra i due gruppi (controllo e laser). L'errore di tipo I è stato impostato a 0,05 e la potenza a 0,80. La dimensione minima del campione richiesta è stata calcolata in dieci pazienti per gruppo. Inoltre, al fine di rilevare una differenza clinicamente significativa nella PPD di 1 mm ± 1 mm DS tra i due periodi di tempo, all'interno del gruppo, con errore di tipo I di 0,05 e potenza di 0,80, la dimensione minima del campione richiesta è stata stimata in dieci pazienti per gruppo pure.

Cronologia del trattamento:

Dopo un primo esame clinico e radiografico, i pazienti sono stati sottoposti a screening e, di conseguenza, è stata confermata l'idoneità all'arruolamento nello studio. All'esame di riferimento, sono state eseguite le misurazioni cliniche e la raccolta del liquido crevicolare perimplantare (PICF) per il campionamento dei biomarcatori. Il PICF è stato recuperato prima del sondaggio e almeno 24 ore dopo l'esame iniziale per evitare la contaminazione con il sangue. Alla seduta basale, dopo la valutazione iniziale, i pazienti hanno ricevuto indicazioni di igiene orale e terapia non chirurgica dei difetti perimplantari in termini di scaling e levigatura radicolare con curette in titanio e l'uso aggiuntivo di clorexidina 0,20% irrigazione del solco perimplantare . Lo sbrigliamento meccanico con ultrasuoni e strumenti manuali è stato eseguito anche su tutta la dentatura prima dell'intervento chirurgico. Quattro-sei settimane dopo il trattamento non chirurgico è stato programmato l'intervento chirurgico. Ogni paziente è stato seguito per due settimane, tre mesi e sei mesi dopo l'intervento chirurgico ed è stato eseguito un rafforzamento dell'igiene orale. Le misurazioni cliniche e le valutazioni dei biomarcatori sono state condotte al basale e sei mesi dopo l'intervento. I seguenti parametri clinici sono stati registrati al basale e sei mesi dopo il trattamento: punteggio della placca a bocca piena (FMPS), percentuale di siti positivi al sanguinamento al sondaggio (BoP), profondità della tasca al sondaggio (PPD), recessione gengivale (REC) e sondaggio livelli di attaccamento (PAL).

• BoP: presenza (+) o assenza (-) di sanguinamento in percentuale (%) 30 s dopo l'inserimento della sonda nella tasca perimplantare
• FMPS: Punteggio della placca a bocca piena
• PPD: la distanza dal margine della mucosa al fondo della tasca perimplantare.
• REC: la distanza dalla spalla della corona protesica al margine della mucosa
• PAL: la distanza dalla spalla della corona protesica al fondo del solco o della tasca perimplantare.

Tutte le misurazioni sono state registrate in sei siti per impianto con una sonda parodontale in scala 15 mm e classificate per 1 mm (Hu-friedy® CP-12). I tre siti più profondi di ciascun impianto sono stati inclusi nell'analisi statistica per la valutazione PPD e PAL. Tutti gli esami sono stati eseguiti dallo stesso esaminatore (I.F.). La riproducibilità intra-esaminatore è stata calcolata durante due sessioni di calibrazione. L'accordo intra-esaminatore è stato valutato con un coefficiente di correlazione intraclasse (ICC) e ha mostrato un accordo di 0,93 (IC 95%: da 0,89 a 0,96).

Procedure chirurgiche È stata applicata l'anestesia locale e ciascun paziente ha utilizzato una soluzione per collutorio di clorexidina allo 0,20% per la disinfezione prechirurgica della bocca. Dopo un'incisione smussata interna, sono stati sollevati lembi a tutto spessore per accedere ai difetti ossei perimplantari.

• Gruppo di controllo (Gruppo C): sono state eseguite la rimozione del tessuto di granulazione e la strumentazione meccanica della superficie implantare con l'uso di scaler per impianti in titanio (@Hu-Friedy, IMPLG1/2T). Alla strumentazione è seguita un'accurata detersione della superficie implantare mediante garza sterilizzata imbevuta di soluzione di clorexidina 0,2%.
• Gruppo di test (Gruppo L): nel gruppo di test è stato utilizzato il laser Nd: YAG, 1064nm (Fotona, Light Walker AT, Ljubljana, Slovenia) combinato con il laser Er: YAG, 2940nm (Fotona, Light Walker AT, Ljubljana, Slovenia) . Inizialmente, la rimozione del tessuto di granulazione è stata eseguita utilizzando laser Er: YAG 160 mJ, 10 Hz, LP, punta cilindrica da 1,3 mm, manipolo H14-C, W/A: 6/4, 30 ml al minuto. Inoltre, la decontaminazione della superficie dell'impianto è stata eseguita con laser Er:YAG 2940nm, modalità QSP, 45mj, 20Hz, senza contatto, manipolo H02-C, W/A: 6/4. I punti di sanguinamento e la disinfezione ossea sono stati creati con l'applicazione di Εr: YAG laser 160mJ, 15Hz, senza contatto, manipolo H02-C, W/A: 6/4 (Fotona, Light Walker AT, Ljubljana, Slovenia). Successivamente, è stato applicato il laser Nd:YAG 1,5W, 15Hz, MSP, manipolo senza contatto R21-C3, fibra 300μm per la decontaminazione profonda dei tessuti e la riduzione della carica microbica. Si è prestata attenzione affinché la fibra non mirasse alla superficie dell'impianto. Infine, il laser Nd:YAG 0,5W, 10Hz, VLP, manipolo senza contatto R21-C3, fibra 300μm (Fotona, Light Walker AT, Ljubljana, Slovenia) a basso livello è stato applicato dopo la sutura per la fotobiomodulazione. Tutte le impostazioni del laser erano basate sulle proprietà fisiche del laser e sull'interazione con i tessuti e le superfici dell'impianto. Il protocollo è stato pianificato in collaborazione con l'azienda produttrice di laser considerando studi precedenti che utilizzavano laser Er:YAG nella perimplantite. Durante la radiazione laser, sia il personale odontoiatrico che i pazienti indossavano occhiali protettivi. Sia nel gruppo di controllo che in quello laser, l'osteoplastica è stata eseguita quando necessario per un migliore adattamento del lembo.

L'endpoint dello sbrigliamento per ciascun trattamento è stato determinato mediante ispezione macroscopica del sito del difetto. Dopo la sutura, ai pazienti sono state somministrate istruzioni post-chirurgiche e analgesici (ibuprofene 400 mg tre volte al giorno per quattro giorni). Le suture sono state rimosse circa 14 giorni dopo l'intervento chirurgico e sono state fornite a tutti i pazienti le istruzioni post-chirurgiche. Questi includevano un risciacquo della bocca con clorexidina allo 0,12% due volte al giorno per due settimane, solo per il gruppo di controllo, e un'attenta spazzolatura dei denti con uno spazzolino morbido in modo che l'area suturata fosse pulita in modo efficiente ma non traumatizzata per entrambi i gruppi.

Raccolta e valutazione del biomarcatore Il liquido crevicolare perimplantare (PICF) ei campioni sono stati prelevati da un sito implantare di ogni individuo che ha partecipato allo studio. I campioni sono stati prelevati almeno 24 ore dopo l'esame clinico iniziale per evitare la contaminazione con il sangue dai siti perimplantari che dimostravano la massima profondità di sondaggio. I campioni sono stati recuperati utilizzando la tecnica della carta da filtro. In breve, i siti di campionamento sono stati isolati, asciugati all'aria e isolati con rulli di cotone, il biofilm sopragengivale è stato rimosso delicatamente, quindi è stata inserita una sottile striscia di carta sterile nel solco/tasca perimplantare fino a quando non è stata avvertita una leggera resistenza e lasciato in atto da 30 anni. Le strisce visivamente contaminate da sangue o saliva sono state scartate. Il volume del fluido campionato ottenuto nella striscia è stato misurato calcolando il volume PICF riassorbito per 30 secondi e le strisce di carta sono state inserite in provette di plastica per microcentrifuga. I campioni ottenuti sono stati conservati a -80°C fino a quando non sono stati processati per l'analisi biochimica mediante test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA).

Prima dell'analisi, i campioni sono stati diluiti con soluzione tampone fosfato (PBS), centrifugati per 20 minuti a 4000 g per separare le cellule e i detriti, quindi sono state rimosse le strisce di carta. I campioni ottenuti sono stati conservati a 20°C fino al trattamento per l'analisi biochimica. I kit ELISA disponibili in commercio sono stati utilizzati per misurare le concentrazioni dei biomarcatori ossei: sRANKL e OPG, dal PICF (Biovendor sRANKL (total) Human ELISA (Osteoprotegerin Ligand, OPG (total) Human Osteoprotegerin, Biovendor - Labolatorni medicina a.s - Repubblica Ceca) . I limiti di rilevazione minimi erano: sRANKL (0,4 pmol/l) e OPG (0,03 pmol/l). L'ELISA in breve e gli anticorpi monoclonali specifici per questi biomarcatori sono stati pre-rivestiti in una micropiastra. Dopo aver lavato via le sostanze non legate, a ciascun pozzetto è stato aggiunto un anticorpo policlonale legato all'enzima specifico per il biomarcatore. La piastra è stata incubata a temperatura ambiente per 1 ora e i pozzetti sono stati nuovamente lavati. Dopo un'ora di incubazione, è stata aggiunta una soluzione di arresto e la reazione è stata arrestata. Il colore sviluppato, essendo proporzionale alla quantità di biomarcatore legato nella fase iniziale, ha permesso di misurarne l'intensità mediante spettrofotometria (450/620 nm, processore ELISA). Una curva di calibrazione è stata tracciata mediante analisi di regressione e la densità ottica del campione è stata utilizzata per stimare la concentrazione dei biomarcatori. Le concentrazioni sono state espresse come biomarcatore per 30 secondi (pg/30s). Durante l'analisi di laboratorio, i campioni erano ciechi per il tecnico di laboratorio.