Suplementace kurkuminem u rakoviny děložního čípku

DOSAVADNÍ STAV TECHNIKY Rakovina děložního čípku (CC) je i nadále hlavním problémem veřejného zdraví v Mexiku. V současnosti na toto onemocnění ročně zemře více než 4 000 žen, což vyžaduje zavedení strategií, které mohou zlepšit současnou léčbu, zejména u lokálně pokročilého onemocnění. Dnes je jasné, že přetrvávající vysoce rizikové infekce lidským papilomavirem jsou hlavním rizikovým faktorem pro rozvoj CC. V National Cancer Institute of Mexico (INCan) je 80 % pacientů diagnostikováno v lokálně pokročilých stadiích (IB3-IVA). Standardní léčbou těchto stadií je konkomitantní chemoradioterapie (CCRT) následovaná brachyterapií (BT).

p53 omezuje růst nádoru, podporuje buněčnou smrt a snižuje životaschopnost buněk. Aktivace p53 je životně důležitá pro cytotoxicitu indukovanou CCRT, zatímco inaktivace p53 byla spojena s rezistencí nebo necitlivostí na léčbu. Různá nutraceutika, jako je berberin a kurkumin, mohou reaktivovat endogenní p53 a projevit jeho účinky v CC. Onkoprotein E6 inaktivuje dráhu p53 v CC; proto může být obnovení p53 slibnou terapeutickou strategií.

Zdravotní přínosy spojené s konzumací ovoce, zeleniny, čajů a koření jsou způsobeny přítomností fytochemikálií. Diety charakterizované pravidelnou konzumací ovoce a zeleniny byly spojeny se snížením rizika CC. Zvláštní skupinou fytochemikálií zájmu jsou polyfenoly. Polyfenol kurkumin je FDA (Food and Drug Administration) považován za bezpečný a netoxický a jeho podávání způsobuje minimální nežádoucí účinky nízkého stupně (hlavně průjem 1. stupně). Na základě profilu bezpečnosti a toxicity klinických studií lze dávku kurkuminu až 8000 mg/den považovat za bezpečnou.

Současné informace o biologické dostupnosti fytochemikálií jsou i nadále omezené, což klade velký důraz na výzkum polyfenolů jako možných nových terapeutik. Nízká biologická dostupnost a složitý metabolismus spojený s polyfenoly však ztěžují doporučení dávky pro denní spotřebu. Bylo prokázáno, že přidání piperinu ke suplementaci kurkuminem zvyšuje absorpci ve střevě.

Různé biologické účinky byly spojeny se suplementací kurkuminu u pacientů s rakovinou. Pacientům s karcinomem pankreatu byl perorálně podáván kurkumin v dávce 8 g/den po dobu osmi měsíců v kombinaci s gemcitabinem, který byl dobře tolerován a vykazoval zlepšení celkového přežití. Aktivita kurkuminu byla hodnocena u pacientů s metastatickým karcinomem tlustého střeva, přičemž bylo zjištěno, že je bezpečný a tolerovatelný v kombinaci s FOLFOX.

U lokálně pokročilých pacientů s CC nebyl zkoumán účinek, který má kurkumin na expresi p53 v nádorových buňkách, i když studie in vitro prokázaly jeho účinek na inhibici onkoproteinů, jako je E6, a následnou stabilizaci p53, která činí CC buňky náchylnějšími ke zničení.

Tato pilotní studie se snaží prokázat, že suplementace kurkuminem bude regulovat molekulární markery, jako je p53 a apoptóza v nádorových buňkách, což by mohlo poskytnout základ pro další studium, zda tato modulace kurkuminem vede k větší náchylnosti nádoru ke standardní léčbě rakoviny a , tedy lepší odpověď na léčbu.

METODY Práce bude prováděna v National Cancer Institute of Mexico (INCan) u pacientů s lokálně pokročilým CC. Bude zahrnuto šest suplementačních skupin; ve třech skupinách bude kurkumin podáván v tabletách v perorálních dávkách 1, 3 a 6 g / den a v dalších třech skupinách bude kurkumin podáván v tabletách v perorálních dávkách 1, 3 a 6 g / den, respektive plus 5 mg piperinu/g kurkuminu (pro usnadnění vstřebávání kurkuminu).

Pozvánka do protokolu studie: Diagnóza bude potvrzena na oddělení funkční gynekologie onkologie INCan. Odpovídající studie se provádějí, aby se potvrdilo, že pacient splňuje kritéria pro zařazení. V den pozvání pacientovi bude pacientovi vysvětleno, z čeho se studie skládá, a budou přečteny Informované souhlasy. Pokud pacientka souhlasí s účastí a podepíše souhlas, bude zařazena do odpovídající dávkové skupiny kurkuminu.

Pacienti budou sledováni po dobu čtyř návštěv v průběhu studie: (1) 2 týdny před začátkem léčby; (2) na začátku CRT; (3) ve třetím cyklu CRT; a (4) ve společnosti BT.

Pacienti budou hodnoceni ve 4 návštěvách:

• Návštěva 1: Indikace pro standardní dietu budou podány dle požadavků pacienta. Pacientce bude poskytnut kurkumin a podle skupiny, do které byla zařazena, budou uvedeny pokyny k jeho použití. Odeberou se vzorky moči a séra. Bude odebrán vzorek cervikálního výtěru.
• Návštěva 2: Den zahájení léčby souběžnou CRT. Budou odebrány vzorky stolice, moči a séra. Bude odebrán vzorek cervikálního výtěru.
• Návštěva 3: Po dokončení 3 cyklů CRT. Budou odebrány vzorky stolice, moči a séra. Bude odebrán vzorek cervikálního výtěru.
• Návštěva 4: Při zahájení léčby BT. Odeberou se vzorky moči a séra.

Biologické vzorky:

Při každé návštěvě budou odebrány cervikovaginální cytologie. Vzorky budou analyzovány průtokovou cytometrií pro kvantifikaci buněk pozitivních na p53 a annexin bude použit k identifikaci apoptózy.

Bude monitorováno dodržování suplementace, zkoumána biologická dostupnost, stanovena gastrointestinální toxicita a hodnocena bezpečnost suplementace. Gastrointestinální symptomy budou klasifikovány při každé návštěvě během léčby podle běžných kritérií toxicity (CTCAE v. 5). K posouzení bezpečnosti suplementace kurkuminem budou monitorovány jaterní funkční testy, testy renálních funkcí, krevní chemie a hematická biometrie. Budou odebrány vzorky stolice, moči a séra, ze kterých bude stanovena biologická dostupnost kurkuminu kapalinovou chromatografií-elektrosprej ionizační-hmotnostní spektrometrií. Mezi různými skupinami suplementace bude provedena srovnávací analýza těchto proměnných, aby se stanovila dávka, ve které je pozorován vliv na expresi p53 a apoptózu.

Analýza dat:

Data budou analyzována pomocí softwaru Statistica a grafy budou vytvořeny v GraphPad Prism. Bude provedena jednofaktorová analýza opakovaných měření s opakovanými měřeními napříč všemi ošetřeními. Plán analýzy se bude skládat z:

• Test normality. Bude proveden Shapiro-Wilkův test, aby se zjistilo, zda je rozložení proměnných normální.
• Popisná analýza. Rozdělení kvantitativních nezávislých proměnných bude stanoveno pomocí Kolmogorova-Smirnovova testu. Průměr ± standardní odchylka bude uvedena pro proměnné s normálním rozdělením nebo medián s 25. a 75. percentilem pro proměnné s volným rozdělením.
• Pro stanovení významnosti rozdílů mezi skupinami bude provedena jednocestná nebo dvoucestná ANOVA, po níž bude následovat Tukeyův test na významnost rozdílů. Intervaly spolehlivosti budou konstruovány na 95 % a hodnota bude prohlášena za statisticky významnou, když p je <0,05.

• Vícerozměrná analýza. Následující testy budou použity k určení, zda existují rozdíly mezi pacienty, kteří byli suplementováni různými dávkami kurkuminu, a těmi, kteří také dostávali piperin:

  • Studentův T test pro kvantitativní proměnné s normálním rozdělením.
  • Mann Whitney U test pro kvantitativní proměnné s volnou distribucí nebo ordinálními proměnnými.
  • Chí-kvadrát test pro dichotomické a polytomické proměnné.

OČEKÁVANÉ VÝSLEDKY A PERSPEKTIVY Výzkumníci očekávají, že suplementace kurkuminem stabilizuje expresi p53 a zvýší apoptózu nádorových buněk. Vyšetřovatelé také očekávají, že piperin zvýší jeho absorpci. Navíc dávka u lidí spojená s expresí p53 nebyla hlášena, takže tato studie umožní identifikaci dávky, která podporuje uvedenou expresi u lidí. Kromě jeho molekulárního účinku, díky jeho antioxidačním vlastnostem, výzkumníci očekávají, že pacienti zlepší gastrointestinální symptomy spojené s léčbou CCRT.