Suplementacja kurkuminy w raku szyjki macicy

KONTEKST Rak szyjki macicy (CC) w dalszym ciągu stanowi główny problem zdrowia publicznego w Meksyku. Obecnie co roku z powodu tej choroby umiera ponad 4000 kobiet, co wymaga wdrożenia strategii mogących ulepszyć obecne metody leczenia, szczególnie w przypadku chorób miejscowo zaawansowanych. Obecnie jest jasne, że utrzymujące się zakażenia wirusem brodawczaka ludzkiego wysokiego ryzyka są głównym czynnikiem ryzyka rozwoju CC. W Meksykańskim Narodowym Instytucie Raka (INCan) u 80% pacjentów diagnozuje się stadium miejscowo zaawansowane (IB3-IVA). Standardowym leczeniem w tych stadiach jest jednoczesna chemioradioterapia (CCRT), a następnie brachyterapia (BT).

p53 ogranicza wzrost nowotworu, sprzyjając śmierci komórek i zmniejszając ich żywotność. Aktywacja p53 jest niezbędna dla cytotoksyczności indukowanej CCRT, podczas gdy inaktywację p53 powiązano z opornością lub niewrażliwością na leczenie. Różne nutraceutyki, takie jak berberyna i kurkumina, mogą reaktywować endogenny p53 i wykazywać jego działanie w CC. Onkoproteina E6 inaktywuje szlak p53 w CC; dlatego przywrócenie p53 może być obiecującą strategią terapeutyczną.

Korzyści zdrowotne związane ze spożywaniem owoców, warzyw, herbat i przypraw wynikają z obecności fitochemikaliów. Diety charakteryzujące się regularnym spożywaniem owoców i warzyw powiązano ze zmniejszeniem ryzyka CC. Szczególną grupą fitochemikaliów będących przedmiotem zainteresowania są polifenole. Kurkumina polifenolowa jest uważana przez FDA (Agencja ds. Żywności i Leków) za bezpieczną i nietoksyczną, a jej podawanie powoduje minimalne skutki uboczne o niskim stopniu nasilenia (głównie biegunkę 1. stopnia). Na podstawie profilu bezpieczeństwa i toksyczności badań klinicznych, dawkę kurkuminy do 8000 mg/dzień można uznać za bezpieczną.

Obecne informacje na temat biodostępności fitochemikaliów są w dalszym ciągu ograniczone, co kładzie duży nacisk na badanie polifenoli jako możliwych nowych środków terapeutycznych. Jednak niska biodostępność i złożony metabolizm związany z polifenolami utrudniają zalecenie dawki do codziennego spożycia. Wykazano, że dodatek piperyny do suplementacji kurkuminą zwiększa wchłanianie w jelitach.

Z suplementacją kurkuminy u pacjentów chorych na raka powiązano różne skutki biologiczne. Pacjenci z rakiem trzustki otrzymywali doustnie kurkuminę w dawce 8 g/dzień przez osiem miesięcy w skojarzeniu z gemcytabiną, co było dobrze tolerowane i wykazywało poprawę całkowitego przeżycia. Aktywność kurkuminy oceniano u pacjentów z przerzutowym rakiem okrężnicy, stwierdzając, że jest ona bezpieczna i tolerowana w połączeniu z FOLFOX.

U pacjentów z miejscowo zaawansowanym CC nie badano wpływu kurkuminy na ekspresję p53 w komórkach nowotworowych, chociaż badania in vitro wykazały jej wpływ na hamowanie onkoprotein, takich jak E6, i w konsekwencji stabilizację p53, co sprawia, że ​​komórki CC są bardziej podatne na zniszczenie.

Niniejsze badanie pilotażowe ma na celu wykazanie, że suplementacja kurkuminą będzie regulować markery molekularne, takie jak p53 i apoptoza w komórkach nowotworowych, co może stanowić podstawę do dalszych badań, czy ta modulacja przez kurkuminę prowadzi do większej podatności guza na standardowe leczenie raka i tym samym lepszą odpowiedź na leczenie.

METODY Praca będzie prowadzona w Narodowym Instytucie Raka w Meksyku (INCan) u pacjentów z miejscowo zaawansowanym CC. Uwzględnionych zostanie sześć grup suplementacyjnych; w trzech grupach kurkumina będzie podawana w tabletkach w doustnych dawkach odpowiednio 1, 3 i 6 g/dzień, a w pozostałych trzech grupach kurkumina będzie podawana w tabletkach w doustnych dawkach 1, 3 i 6 g/dzień dziennie plus 5 mg piperyny/g kurkuminy (w celu ułatwienia wchłaniania kurkuminy).

Zaproszenie do protokołu badania: Diagnoza zostanie potwierdzona w Oddziale Ginekologii Funkcjonalnej INCan. Przeprowadzane są odpowiednie badania w celu potwierdzenia, że ​​pacjent spełnia kryteria włączenia. W dniu zaproszenia pacjent zostanie wyjaśniony na czym polega badanie i odczytana zostanie Świadoma Zgoda. Jeżeli pacjentka wyrazi zgodę na udział i podpisze zgodę, zostanie przydzielona do odpowiedniej grupy dawkowania kurkuminy.

Pacjenci będą obserwowani podczas czterech wizyt w trakcie badania: (1) 2 tygodnie przed rozpoczęciem leczenia; (2) na początku CRT; (3) w trzecim cyklu CRT; oraz (4) w firmie BT.

Pacjenci będą oceniani podczas 4 wizyt:

• Wizyta 1: Wskazania do stosowania diety standardowej zostaną podane zgodnie z wymaganiami pacjenta. Kurkumina zostanie dostarczona pacjentce i udzielona zostanie instrukcja jej stosowania według grupy, do której została przydzielona. Zostaną pobrane próbki moczu i surowicy. Zostanie pobrany wymaz z szyjki macicy.
• Wizyta 2: Dzień rozpoczęcia leczenia skojarzoną CRT. Zostaną pobrane próbki kału, moczu i surowicy. Zostanie pobrany wymaz z szyjki macicy.
• Wizyta 3: Po zakończeniu 3 cykli CRT. Zostaną pobrane próbki kału, moczu i surowicy. Zostanie pobrany wymaz z szyjki macicy.
• Wizyta 4: Rozpoczynanie leczenia BT. Zostaną pobrane próbki moczu i surowicy.

Próbki biologiczne:

Podczas każdej wizyty będą wykonywane badania cytologiczne szyjki macicy i pochwy. Próbki będą analizowane za pomocą cytometrii przepływowej w celu ilościowego określenia komórek p53-dodatnich, a aneksyna zostanie użyta do identyfikacji apoptozy.

Monitorowane będzie przestrzeganie suplementacji, badana będzie biodostępność, określana będzie toksyczność żołądkowo-jelitowa i oceniane będzie bezpieczeństwo suplementacji. Objawy żołądkowo-jelitowe będą klasyfikowane podczas każdej wizyty w trakcie leczenia zgodnie z powszechnymi kryteriami toksyczności (CTCAE v. 5). Aby ocenić bezpieczeństwo suplementacji kurkuminą, monitorowane będą badania czynności wątroby, badania czynności nerek, skład chemiczny krwi i biometria krwi. Zostaną pobrane próbki kału, moczu i surowicy, z których zostanie oceniona biodostępność kurkuminy za pomocą chromatografii cieczowej, jonizacji przez elektrorozpylanie i spektrometrii mas. Przeprowadzona zostanie analiza porównawcza tych zmiennych pomiędzy różnymi grupami suplementacyjnymi w celu ustalenia dawki, w której obserwuje się wpływ na ekspresję p53 i apoptozę.

Analiza danych:

Dane będą analizowane przy użyciu programu Statistica, a wykresy zostaną wykonane w programie GraphPad Prism. Przeprowadzona zostanie jednoczynnikowa analiza powtarzanych pomiarów z powtarzanymi pomiarami we wszystkich przypadkach leczenia. Plan analizy będzie się składał z:

• Próba normalności. Aby sprawdzić, czy rozkład zmiennych jest normalny, zostanie przeprowadzony test Shapiro-Wilka.
• Analiza opisowa. Rozkład ilościowych zmiennych niezależnych zostanie wyznaczony za pomocą testu Kołmogorowa-Smirnowa. Średnia ± odchylenie standardowe zostanie podana dla zmiennych o rozkładzie normalnym lub mediana z 25. i 75. percentylem dla zmiennych o rozkładzie swobodnym.
• W celu określenia istotności różnic między grupami zostanie przeprowadzona jednokierunkowa lub dwukierunkowa analiza ANOVA, po której nastąpi test Tukeya pod kątem istotności różnic. Przedziały ufności zostaną zbudowane na poziomie 95%, a wartość zostanie uznana za istotną statystycznie, gdy p będzie <0,05.

• Analiza wielowymiarowa. Poniższe testy zostaną wykorzystane w celu ustalenia, czy istnieją różnice między pacjentami, którzy otrzymywali suplementację różnymi dawkami kurkuminy, a pacjentami, którzy otrzymywali również piperynę:

  • Test T-Studenta dla zmiennych ilościowych o rozkładzie normalnym.
  • Test U Manna Whitneya dla zmiennych ilościowych o rozkładzie swobodnym lub zmiennych porządkowych.
  • Test chi-kwadrat dla zmiennych dychotomicznych i politomicznych.

OCZEKIWANE WYNIKI I PERSPEKTYWY Badacze spodziewają się, że suplementacja kurkuminą ustabilizuje ekspresję p53 i zwiększy apoptozę komórek nowotworowych. Badacze spodziewają się również, że piperyna zwiększy jej wchłanianie. Ponadto nie opisano dawki u ludzi związanej z ekspresją p53, więc to badanie umożliwi identyfikację dawki, która sprzyja tej ekspresji u ludzi. Oprócz działania molekularnego, ze względu na właściwości przeciwutleniające, badacze oczekują, że u pacjentów nastąpi złagodzenie objawów żołądkowo-jelitowych związanych z leczeniem CCRT.