Supplementazione di curcumina nel cancro cervicale

BACKGROUND Il cancro cervicale (CC) continua a essere un grave problema di sanità pubblica in Messico. Oggi più di 4.000 donne muoiono ogni anno a causa di questa malattia, che richiede l’implementazione di strategie in grado di migliorare i trattamenti attuali, in particolare per la malattia localmente avanzata. Oggi è chiaro che le infezioni persistenti da Papillomavirus Umano ad alto rischio rappresentano il principale fattore di rischio per lo sviluppo di CC. Presso l'Istituto Nazionale del Cancro del Messico (INCan), l'80% dei pazienti viene diagnosticato in stadi localmente avanzati (IB3-IVA). Il trattamento standard per questi stadi è la chemioradioterapia concomitante (CCRT) seguita dalla brachiterapia (BT).

p53 limita la crescita del tumore, promuovendo la morte cellulare e diminuendo la vitalità cellulare. L'attivazione di p53 è vitale per la citotossicità indotta da CCRT, mentre l'inattivazione di p53 è stata associata a resistenza o insensibilità al trattamento. Diversi nutraceutici come la berberina e la curcumina possono riattivare la p53 endogena e mostrare i suoi effetti nel CC. L'oncoproteina E6 inattiva la via p53 nel CC; pertanto, il ripristino di p53 potrebbe essere una strategia terapeutica promettente.

I benefici per la salute associati al consumo di frutta, verdura, tè e spezie sono dovuti alla presenza di sostanze fitochimiche. Le diete caratterizzate dal consumo regolare di frutta e verdura sono state associate ad una diminuzione del rischio di CC. Un gruppo particolare di sostanze fitochimiche di interesse sono i polifenoli. Il polifenolo della curcumina è considerato sicuro e non tossico dalla FDA (Food and Drug Administration) e la sua somministrazione provoca effetti avversi minimi di basso grado (principalmente diarrea di grado 1). Sulla base del profilo di sicurezza e tossicità degli studi clinici, una dose fino a 8000 mg/giorno di curcumina può essere considerata sicura.

Le informazioni attuali sulla biodisponibilità delle sostanze fitochimiche continuano ad essere limitate, il che attribuisce grande importanza all’esplorazione dei polifenoli come possibili nuove terapie. Tuttavia, la bassa biodisponibilità e il complesso metabolismo legato ai polifenoli rendono difficile consigliare una dose per il consumo quotidiano. È stato dimostrato che l’aggiunta di piperina all’integrazione di curcumina aumenta l’assorbimento nell’intestino.

Diversi effetti biologici sono stati associati all’integrazione di curcumina nei pazienti affetti da cancro. I pazienti con cancro al pancreas hanno ricevuto una somministrazione orale di curcumina alla dose di 8 g/giorno per otto mesi in combinazione con gemcitabina, che è stata ben tollerata e ha mostrato un miglioramento della sopravvivenza globale. L’attività della curcumina è stata valutata in pazienti con cancro del colon metastatico, riscontrando che era sicura e tollerabile in combinazione con FOLFOX.

Nei pazienti con CC localmente avanzato, non è stato studiato l’effetto che la curcumina ha sull’espressione di p53 nelle cellule tumorali, sebbene studi in vitro abbiano dimostrato il suo effetto sull’inibizione delle oncoproteine, come E6, e la conseguente stabilizzazione di p53, che rende le cellule CC più suscettibili alla distruzione.

Il presente studio pilota cerca di dimostrare che l’integrazione di curcumina regolerà i marcatori molecolari, come p53 e l’apoptosi nelle cellule tumorali, il che potrebbe fornire la base per studiare ulteriormente se questa modulazione da parte della curcumina porta ad una maggiore suscettibilità del tumore al trattamento antitumorale standard e , quindi, una migliore risposta al trattamento.

METODI Il lavoro sarà condotto presso l'Istituto Nazionale del Cancro del Messico (INCan) in pazienti con CC localmente avanzato. Saranno inclusi sei gruppi di integrazione; in tre gruppi, la curcumina sarà somministrata in compresse in dosi orali di 1, 3 e 6 g/giorno rispettivamente, e negli altri tre gruppi, la curcumina sarà somministrata in compresse in dosi orali di 1, 3 e 6 g/giorno. giorno rispettivamente più 5 mg di piperina/g di curcumina (per facilitare l'assorbimento della curcumina).

Invito al protocollo dello studio: La diagnosi sarà confermata presso l'Unità di Oncologia Ginecologia Funzionale dell'INCan. Gli studi corrispondenti vengono condotti per confermare che il paziente soddisfa i criteri di inclusione. Il giorno dell'invito al paziente verrà spiegato in cosa consiste lo studio e verranno letti i Consensi Informati. Se la paziente accetta di partecipare e firma il consenso, verrà assegnata al gruppo di dose di curcumina corrispondente.

I pazienti saranno seguiti per quattro visite durante lo studio: (1) 2 settimane prima dell'inizio del trattamento; (2) all'inizio del CRT; (3) al terzo ciclo di CRT; e (4) a BT.

I pazienti saranno valutati in 4 visite:

• Visita 1: Verranno fornite indicazioni per una dieta standard in base alle esigenze del paziente. Alla paziente verrà fornita la curcumina e verranno fornite le istruzioni per il suo utilizzo in base al gruppo a cui è stata assegnata. Verranno raccolti campioni di urina e siero. Verrà prelevato un campione di tampone cervicale.
• Visita 2: il giorno di inizio del trattamento con CRT concomitante. Verranno raccolti campioni di feci, urina e siero. Verrà prelevato un campione di tampone cervicale.
• Visita 3: una volta completati i 3 cicli CRT. Verranno raccolti campioni di feci, urina e siero. Verrà prelevato un campione di tampone cervicale.
• Visita 4: Quando si inizia il trattamento con BT. Verranno raccolti campioni di urina e siero.

Campioni biologici:

Ad ogni visita verranno effettuate citologie cervicovaginali. I campioni verranno analizzati mediante citometria a flusso per quantificare le cellule positive a p53 e l'annessina verrà utilizzata per identificare l'apoptosi.

Verrà monitorata l'aderenza all'integrazione, verrà studiata la biodisponibilità, determinata la tossicità gastrointestinale e valutata la sicurezza dell'integrazione. I sintomi gastrointestinali saranno classificati ad ogni visita durante il trattamento secondo i comuni criteri di tossicità (CTCAE v. 5). Verranno monitorati test di funzionalità epatica, test di funzionalità renale, analisi del sangue e biometria ematica per valutare la sicurezza dell'integrazione di curcumina. Verranno prelevati campioni di feci, urina e siero, dai quali verrà valutata la biodisponibilità della curcumina mediante cromatografia liquida-ionizzazione elettrospray-spettrometria di massa. Verrà effettuata un'analisi comparativa di queste variabili tra i diversi gruppi di integrazione per stabilire la dose in cui si osserva un impatto sull'espressione di p53 e sull'apoptosi.

Analisi dei dati:

I dati verranno analizzati utilizzando il software Statistica e i grafici verranno realizzati in GraphPad Prism. Verrà eseguita un'analisi di misure ripetute a fattore singolo con misure ripetute in tutti i trattamenti. Il piano di analisi sarà composto da:

• Prova di normalità. Verrà eseguito il test di Shapiro-Wilk per sapere se la distribuzione delle variabili è normale.
• Analisi descrittiva. La distribuzione delle variabili quantitative indipendenti sarà determinata utilizzando il test di Kolmogorov-Smirnov. Verrà riportata la media ± deviazione standard per le variabili con distribuzione normale o la mediana con il 25° e 75° percentile per le variabili con distribuzione libera.
• Verrà eseguita l'ANOVA unidirezionale o bidirezionale per determinare la significatività delle differenze tra i gruppi, seguita dal test di Tukey per la significatività delle differenze. Gli intervalli di confidenza saranno costruiti al 95% e un valore sarà dichiarato statisticamente significativo quando p è <0,05.

• Analisi multivariata. I seguenti test verranno utilizzati per determinare se ci sono differenze tra i pazienti che hanno ricevuto l'integrazione con diverse dosi di curcumina e quelli che hanno ricevuto anche piperina:

  • Test T di Student per variabili quantitative con distribuzione normale.
  • Test U di Mann Whitney per variabili quantitative con distribuzione libera o variabili ordinali.
  • Test chi quadrato per variabili dicotomiche e politomiche.

RISULTATI ATTESI E PROSPETTIVE I ricercatori si aspettano che l'integrazione di curcumina stabilizzi l'espressione di p53 e aumenti l'apoptosi delle cellule tumorali. I ricercatori si aspettano inoltre che la piperina ne aumenti l'assorbimento. Inoltre, non è stata riportata una dose nell'uomo associata all'espressione di p53, quindi questo studio consentirà di identificare la dose che favorisce detta espressione nell'uomo. Oltre al suo effetto molecolare, dovuto alle sue proprietà antiossidanti, i ricercatori si aspettano che i pazienti migliorino i sintomi gastrointestinali associati al trattamento con CCRT.