Curcumin-Supplementierung bei Gebärmutterhalskrebs

HINTERGRUND Gebärmutterhalskrebs (CC) ist in Mexiko weiterhin ein großes Problem der öffentlichen Gesundheit. Heutzutage sterben jedes Jahr mehr als 4.000 Frauen an dieser Krankheit, was die Umsetzung von Strategien zur Verbesserung der aktuellen Behandlungen erfordert, insbesondere bei lokal fortgeschrittenen Erkrankungen. Heute ist klar, dass anhaltende Hochrisikoinfektionen mit humanen Papillomaviren der Hauptrisikofaktor für die Entwicklung von CC sind. Am National Cancer Institute of Mexico (INCan) werden 80 % der Patienten im lokal fortgeschrittenen Stadium diagnostiziert (IB3-IVA). Die Standardbehandlung für diese Stadien ist eine begleitende Radiochemotherapie (CCRT) gefolgt von einer Brachytherapie (BT).

p53 schränkt das Tumorwachstum ein, fördert den Zelltod und verringert die Lebensfähigkeit der Zellen. Die Aktivierung von p53 ist für die CCRT-induzierte Zytotoxizität von entscheidender Bedeutung, während die Inaktivierung von p53 mit Resistenz oder Unempfindlichkeit gegenüber der Behandlung in Verbindung gebracht wird. Verschiedene Nutrazeutika wie Berberin und Curcumin können endogenes p53 reaktivieren und seine Wirkung bei CC entfalten. Das E6-Onkoprotein inaktiviert den p53-Signalweg bei CC; Daher könnte die Wiederherstellung von p53 eine vielversprechende therapeutische Strategie sein.

Die gesundheitlichen Vorteile, die der Verzehr von Obst, Gemüse, Tees und Gewürzen mit sich bringt, sind auf das Vorhandensein sekundärer Pflanzenstoffe zurückzuführen. Diäten, die durch den regelmäßigen Verzehr von Obst und Gemüse gekennzeichnet sind, wurden mit einer Verringerung des CC-Risikos in Verbindung gebracht. Eine besondere Gruppe von sekundären Pflanzenstoffen sind Polyphenole. Das Polyphenol Curcumin wird von der FDA (Food and Drug Administration) als sicher und ungiftig eingestuft und seine Verabreichung verursacht nur minimale, geringfügige Nebenwirkungen (hauptsächlich Durchfall 1. Grades). Basierend auf dem Sicherheits- und Toxizitätsprofil klinischer Studien kann eine Dosis von bis zu 8000 mg Curcumin pro Tag als sicher angesehen werden.

Die aktuellen Informationen zur Bioverfügbarkeit von sekundären Pflanzenstoffen sind nach wie vor begrenzt, weshalb der Erforschung von Polyphenolen als möglichen neuen Therapeutika große Bedeutung beigemessen wird. Aufgrund der geringen Bioverfügbarkeit und des komplexen Stoffwechsels von Polyphenolen ist es jedoch schwierig, eine Dosis für den täglichen Verzehr zu empfehlen. Es wurde gezeigt, dass der Zusatz von Piperin zur Curcumin-Supplementierung die Absorption im Darm erhöht.

Verschiedene biologische Wirkungen wurden mit der Curcumin-Supplementierung bei Krebspatienten in Verbindung gebracht. Patienten mit Bauchspeicheldrüsenkrebs erhielten acht Monate lang orale Verabreichung von Curcumin in einer Dosis von 8 g/Tag in Kombination mit Gemcitabin, was gut verträglich war und eine Verbesserung des Gesamtüberlebens zeigte. Die Curcumin-Aktivität wurde bei Patienten mit metastasiertem Dickdarmkrebs untersucht und ergab, dass es in Kombination mit FOLFOX sicher und verträglich war.

Bei lokal fortgeschrittenen CC-Patienten wurde die Wirkung von Curcumin auf die Expression von p53 in Tumorzellen nicht untersucht, obwohl In-vitro-Studien seine Wirkung auf die Hemmung von Onkoproteinen wie E6 und die daraus resultierende Stabilisierung von p53 gezeigt haben macht CC-Zellen anfälliger für die Zerstörung.

Die vorliegende Pilotstudie soll zeigen, dass eine Curcumin-Supplementierung molekulare Marker wie p53 und Apoptose in Tumorzellen reguliert. Dies könnte die Grundlage für weitere Untersuchungen liefern, ob diese Modulation durch Curcumin zu einer größeren Anfälligkeit des Tumors für Standardkrebsbehandlungen führt , daher ein besseres Ansprechen auf die Behandlung.

METHODEN Die Arbeit wird am National Cancer Institute of Mexico (INCan) bei Patienten mit lokal fortgeschrittenem CC durchgeführt. Sechs Ergänzungsgruppen werden eingeschlossen; In drei Gruppen wird Curcumin in Tablettenform in oralen Dosen von 1, 3 und 6 g/Tag verabreicht, und in den anderen drei Gruppen wird Curcumin in Tablettenform in oralen Dosen von 1, 3 und 6 g/Tag verabreicht. Tag jeweils plus 5 mg Piperin/g Curcumin (um die Aufnahme von Curcumin zu erleichtern).

Einladung zum Studienprotokoll: Die Diagnose wird in der INCan Functional Gynecology Oncology Unit bestätigt. Die entsprechenden Studien werden durchgeführt, um zu bestätigen, dass der Patient die Einschlusskriterien erfüllt. Am Tag der Einladung an den Patienten wird ihm erklärt, woraus die Studie besteht, und die Einverständniserklärung wird verlesen. Wenn die Patientin der Teilnahme zustimmt und die Einwilligung unterzeichnet, wird sie der entsprechenden Curcumin-Dosisgruppe zugeordnet.

Die Patienten werden während der gesamten Studie bei vier Besuchen beobachtet: (1) 2 Wochen vor Beginn der Behandlung; (2) zu Beginn der CRT; (3) im dritten CRT-Zyklus; und (4) bei BT.

Die Patienten werden in 4 Besuchen untersucht:

• Besuch 1: Indikationen für eine Standarddiät werden entsprechend den Anforderungen des Patienten gestellt. Der Patientin wird Curcumin zur Verfügung gestellt und es werden Anweisungen zu dessen Verwendung entsprechend der Gruppe gegeben, der sie zugeordnet wurde. Es werden Urin- und Serumproben gesammelt. Es wird eine Abstrichprobe des Gebärmutterhalses entnommen.
• Besuch 2: Der Tag des Behandlungsbeginns mit begleitender CRT. Es werden Kot-, Urin- und Serumproben entnommen. Es wird eine Abstrichprobe des Gebärmutterhalses entnommen.
• Besuch 3: Sobald die 3 CRT-Zyklen abgeschlossen sind. Es werden Kot-, Urin- und Serumproben entnommen. Es wird eine Abstrichprobe des Gebärmutterhalses entnommen.
• Besuch 4: Zu Beginn der Behandlung mit BT. Es werden Urin- und Serumproben gesammelt.

Biologische Proben:

Bei jedem Besuch werden zervikovaginale Zytologien durchgeführt. Die Proben werden mittels Durchflusszytometrie analysiert, um p53-positive Zellen zu quantifizieren, und Annexin wird zur Identifizierung von Apoptose verwendet.

Die Einhaltung der Nahrungsergänzung wird überwacht, die Bioverfügbarkeit wird untersucht, die gastrointestinale Toxizität bestimmt und die Sicherheit der Nahrungsergänzung bewertet. Gastrointestinale Symptome werden bei jedem Besuch während der Behandlung nach allgemeinen Toxizitätskriterien (CTCAE v. 5) klassifiziert. Leberfunktionstests, Nierenfunktionstests, Blutchemie und hämatische Biometrie werden überwacht, um die Sicherheit einer Curcumin-Supplementierung zu beurteilen. Es werden Stuhl-, Urin- und Serumproben entnommen, aus denen die Bioverfügbarkeit von Curcumin mittels Flüssigkeitschromatographie-Elektrospray-Ionisations-Massenspektrometrie beurteilt wird. Eine vergleichende Analyse dieser Variablen wird zwischen den verschiedenen Ergänzungsgruppen durchgeführt, um die Dosis zu ermitteln, bei der ein Einfluss auf die Expression von p53 und Apoptose beobachtet wird.

Datenanalyse:

Die Daten werden mit der Statistica-Software analysiert und Diagramme werden in GraphPad Prism erstellt. Es wird eine Ein-Faktor-Analyse wiederholter Messungen mit wiederholten Messungen über alle Behandlungen hinweg durchgeführt. Der Analyseplan besteht aus:

• Normalitätstest. Der Shapiro-Wilk-Test wird durchgeführt, um festzustellen, ob die Variablenverteilung normal ist.
• Beschreibende Analyse. Die Verteilung der quantitativen unabhängigen Variablen wird mithilfe des Kolmogorov-Smirnov-Tests bestimmt. Der Mittelwert ± Standardabweichung wird für Variablen mit Normalverteilung oder der Median mit dem 25. und 75. Perzentil für Variablen mit freier Verteilung angegeben.
• Zur Bestimmung der Signifikanz von Unterschieden zwischen Gruppen wird eine einfaktorielle oder zweifaktorielle ANOVA durchgeführt, gefolgt vom Tukey-Test für die Signifikanz der Unterschiede. Konfidenzintervalle werden bei 95 % erstellt und ein Wert wird als statistisch signifikant erklärt, wenn p <0,05 ist.

• Multivariate Analyse. Die folgenden Tests werden verwendet, um festzustellen, ob es Unterschiede zwischen den Patienten gibt, denen die verschiedenen Curcumin-Dosen verabreicht wurden, und denen, die zusätzlich Piperin erhielten:

  • Student-T-Test für quantitative Variablen mit Normalverteilung.
  • Mann-Whitney-U-Test für quantitative Variablen mit freier Verteilung oder ordinale Variablen.
  • Chi-Quadrat-Test für dichotome und polytome Variablen.

ERWARTETE ERGEBNISSE UND PERSPEKTIVEN Die Forscher erwarten, dass eine Curcumin-Supplementierung die Expression von p53 stabilisiert und die Apoptose von Tumorzellen erhöht. Die Forscher erwarten außerdem, dass Piperin seine Absorption erhöht. Darüber hinaus wurde nicht über eine Dosis beim Menschen berichtet, die mit der Expression von p53 in Zusammenhang steht, so dass diese Studie die Identifizierung der Dosis ermöglichen wird, die diese Expression beim Menschen begünstigt. Zusätzlich zu seiner molekularen Wirkung erwarten die Forscher aufgrund seiner antioxidativen Eigenschaften, dass Patienten die mit der Behandlung mit CCRT verbundenen Magen-Darm-Symptome verbessern.