Reakce T buněk na různé úrovně zátěže při cvičení

Aktivní komparátor: Cvičení střední intenzity

Subjekty se zúčastní 100minutového cvičení pod vedením cvičebního fyziologa, který provádí stejná cvičení jako skupina s vysokou intenzitou, ale s nižší úrovní úsilí. Cvičení se skládá z mixu běžeckých aktivit (≤ 400 m); cvičení s tělesnou hmotností, jako jsou burpees a výpady; a cvičení, jako jsou kliky a dřepy s použitím 20,4 kg zátěžových talířů, ale prováděné tempem umožňujícím zotavení během sezení. Plánované 5minutové pauzy budou zahrnuty po 30, 60 a 85 minutách a subjekty s MI budou podobně povzbuzovány ke konzumaci vody a/nebo sacharidového/elektrolytového nápoje. Vědci od vás získají vzorek krve před a bezprostředně po cvičení a také jednu, čtyři a šest hodin po cvičení.

Jiný: Cvičení

Subjekty ve dvou skupinách předcvičily 90-100 minut cvičení s různou intenzitou.

Ostatní jména:

• Střední intenzita
• Vysoká intenzita

Experimentální: Cvičení s vysokou intenzitou

Subjekty v této skupině se zúčastní cvičení, které je reprezentativní pro výcvikovou akci kadetů připravujících se na vojenské soutěže. Všechna cvičení se budou skládat ze směsi běžeckých aktivit (≤ 400 m); cvičení s tělesnou hmotností, jako jsou burpees a výpady; a cvičení, jako jsou kliky a dřepy s použitím 20,4 kg zátěžových talířů; s rychle se vyskytujícími přechody cvičení, aby se zabránilo zotavení. Cvičení bude trvat celkem 100 min. Naplánované 5minutové přestávky budou vloženy na 30, 60 a 85 minut. Během plánované doby odpočinku budou subjekty vyzvány, aby konzumovaly vodu a/nebo sacharidový/elektrolytový nápoj. Vědci od vás získají vzorek krve před a bezprostředně po cvičení a také jednu, čtyři a šest hodin po cvičení.

Jiný: Cvičení

Subjekty ve dvou skupinách předcvičily 90-100 minut cvičení s různou intenzitou.

Ostatní jména:

• Střední intenzita
• Vysoká intenzita

Proliferace T buněk

Vzorky krve byly odebrány pomocí standardní techniky venepunkce. Vzorky krve byly odebrány na začátku, bezprostředně po cvičení (0 h), 1 hodinu po (1 h), 4 hodiny (4 h) a 6 hodin (6 h) po cvičení v heparinových vacutainerových zkumavkách. Mononukleární buňky periferní krve (PBMC) byly izolovány za použití Ficoll-Paque PLUS centrifugace v hustotním gradientu. Celkové T buňky byly purifikovány z promytých PBMC E-rozetováním. Proliferace T buněk byla analyzována jako odpověď na kostimulaci prostřednictvím CD3+CD28 s použitím protilátek vázaných na destičku nebo ošetření fytohemaglutininem (PHA), nebo bez simulace. Buňky byly inkubovány po dobu 6 dnů při 37 °C ve zvlhčeném inkubátoru s 5% CO2 a poté analyzovány průtokovou cytometrií. Buňky byly analyzovány průtokovou cytometrií s použitím anti-CD3-APC a anti-CD152-PE protilátek ihned po izolaci CD3+ T buněk (0 h) a po 6 dnech v kultuře s použitím průtokového cytometru Accuri C6.

Katecholaminy (hormony)

Krev bude odebrána do lahvičky obsahující EDTA (6 ml) pro analýzu katecholaminů. Plazma pro analýzy katecholaminů (epinefrinu a norepinefrinu) byla získána centrifugací při 2000 g po dobu 10 minut při 4 °C. Supernatant byl odstraněn a skladován při -80 °C až do analýzy. Koncentrace katecholaminů budou stanoveny pomocí souprav BI-CAT ELISA a provedeny podle pokynů výrobce. Vzorky byly měřeny při 450 nm pomocí čtečky mikrodestiček Synergy HT. Vzorky krve budou odebrány ve stejnou dobu jako u primárních výsledků (před a po cvičení a také jednu, čtyři a šest hodin po cvičení.

Kompletní krevní obraz

Periferní krev bude odebrána do lahvičky obsahující EDTA (6 ml) pro analýzu kompletního krevního obrazu (CBC). Tyto lahvičky budou odeslány do komerční klinické laboratoře (Quest Diagnostics) pro měření CBC. Vzorky krve budou odebrány ve stejnou dobu jako u primárních výsledků (před a po cvičení a také jednu, čtyři a šest hodin po cvičení).

Kortizol

Krev bude odebrána do lahvičky obsahující EDTA (6 ml) pro analýzu kortizolu. Tyto lahvičky budou odeslány do komerční klinické laboratoře (Quest Diagnostics) pro měření kortizolu. Vzorky krve budou odebrány ve stejnou dobu jako u primárních výsledků (před a po cvičení a také jednu, čtyři a šest hodin po cvičení).