Reakcje komórek T na różne poziomy stresu wysiłkowego

Aktywny komparator: Ćwiczenia o umiarkowanej intensywności

Uczestnicy wezmą udział w 100-minutowej sesji ćwiczeń prowadzonej przez fizjologa wykonującego te same ćwiczenia, co grupa o wysokiej intensywności, ale przy niższym poziomie wysiłku. Ćwiczenia składają się z kombinacji biegów (≤ 400 m); ćwiczenia z wykorzystaniem masy ciała, takie jak burpees i wypady; oraz ćwiczenia, takie jak brzuszki i przysiady z wykorzystaniem ciężarków o masie 20,4 kg, ale wykonywane w tempie pozwalającym na regenerację w trakcie sesji. Zaplanowane 5-minutowe przerwy zostaną uwzględnione po 30, 60 i 85 minutach, a osoby z zawałem serca będą w podobny sposób zachęcane do spożywania wody i/lub napoju węglowodanowo-elektrolitowego. Badacze pobiorą od Ciebie próbkę krwi przed i bezpośrednio po ćwiczeniach, a także jedną, cztery i sześć godzin po ćwiczeniach.

Inny: Ćwiczenia

Badani w obu grupach wykonywali 90–100 minut ćwiczeń o różnej intensywności.

Inne nazwy:

• Umiarkowana intensywność
• Wysoka intensywność

Eksperymentalny: Ćwiczenia o dużej intensywności

Osoby z tej grupy wezmą udział w sesji ćwiczeń, która jest reprezentatywna dla wydarzenia szkoleniowego, jakiego doświadczają kadeci przygotowujący się do zawodów wojskowych. Wszystkie ćwiczenia będą stanowić mieszankę ćwiczeń biegowych (≤ 400 m); ćwiczenia z wykorzystaniem masy ciała, takie jak burpees i wypady; oraz ćwiczenia typu brzuszki i przysiady z wykorzystaniem ciężarków o masie 20,4 kg; z szybko występującymi zmianami ćwiczeń, aby zapobiec regeneracji. Seria ćwiczeń będzie trwała łącznie 100 minut. Zaplanowane 5-minutowe przerwy będą wstawiane po 30, 60 i 85 minutach. Podczas zaplanowanych okresów odpoczynku uczestnicy będą zachęcani do spożywania wody i/lub napoju węglowodanowo-elektrolitowego. Badacze pobiorą od Ciebie próbkę krwi przed i bezpośrednio po ćwiczeniach, a także jedną, cztery i sześć godzin po ćwiczeniach.

Inny: Ćwiczenia

Badani w obu grupach wykonywali 90–100 minut ćwiczeń o różnej intensywności.

Inne nazwy:

• Umiarkowana intensywność
• Wysoka intensywność

Proliferacja komórek T

Próbki krwi pobrano przy użyciu standardowej techniki wkłucia żyły. Próbki krwi pobierano na początku badania, bezpośrednio po wysiłku (0 godz.), 1 godzinę po (1 godz.), 4 godz. (4 godz.) i 6 godz. (6 godz.) po wysiłku w probówkach próżniowych z heparyną. Komórki jednojądrzaste krwi obwodowej (PBMC) wyizolowano za pomocą wirowania w gradiencie gęstości Ficoll-Paque PLUS. Całkowite komórki T oczyszczono z przemytych PBMC metodą E-rozety. Proliferację komórek T analizowano w odpowiedzi na kostymulację przez CD3+CD28 przy użyciu przeciwciał związanych z płytką, traktowanie fitohemaglutyniną (PHA) lub brak symulacji. Komórki inkubowano przez 6 dni w temperaturze 37°C w nawilżonym inkubatorze z 5% CO2, a następnie analizowano metodą cytometrii przepływowej. Komórki analizowano metodą cytometrii przepływowej przy użyciu przeciwciał anty-CD3-APC i anty-CD152-PE bezpośrednio po izolacji komórek T CD3+ (0 godzin) i po 6 dniach hodowli przy użyciu cytometru przepływowego Accuri C6.

Katecholaminy (hormony)

Krew będzie pobierana do fiolki zawierającej EDTA (6 ml) do analizy katecholamin. Osocze do analiz katecholamin (adrenaliny i noradrenaliny) otrzymano przez wirowanie przy 2000 g przez 10 minut w temperaturze 4°C. Supernatant usunięto i przechowywano w temperaturze -80°C do czasu analizy. Stężenia katecholamin zostaną określone przy użyciu zestawów BI-CAT ELISA i wykonane zgodnie z instrukcjami producenta. Próbki mierzono przy 450 nm przy użyciu czytnika mikropłytek Synergy HT. Próbki krwi zostaną pobrane w tym samym czasie, co w przypadku głównych wyników badań (przed i po ćwiczeniach, a także jedną, cztery i sześć godzin po ćwiczeniach.

Pełna morfologia krwi

Krew obwodowa zostanie pobrana do fiolki zawierającej EDTA (6 ml) w celu analizy pełnej morfologii krwi (CBC). Fiolki te zostaną wysłane do komercyjnego laboratorium klinicznego (Quest Diagnostics) w celu wykonania pomiarów CBC. Próbki krwi zostaną pobrane w tym samym czasie, co w przypadku głównych wyników badań (przed i po ćwiczeniach, a także jedną, cztery i sześć godzin po ćwiczeniach).

Kortyzol

Krew zostanie pobrana do fiolki zawierającej EDTA (6 ml) w celu analizy kortyzolu. Fiolki te zostaną wysłane do komercyjnego laboratorium klinicznego (Quest Diagnostics) w celu zmierzenia poziomu kortyzolu. Próbki krwi zostaną pobrane w tym samym czasie, co w przypadku głównych wyników badań (przed i po ćwiczeniach, a także jedną, cztery i sześć godzin po ćwiczeniach).