Respuestas de las células T a diversos niveles de estrés por ejercicio

Comparador activo: Ejercicio de intensidad moderada

Los sujetos participarán en una serie de ejercicio de 100 minutos dirigida por un fisiólogo del ejercicio haciendo los mismos ejercicios que el grupo de alta intensidad, pero con un nivel de esfuerzo menor. El ejercicio consiste en una combinación de actividades de carrera (≤ 400 m); ejercicios de peso corporal, como burpees y estocadas; y ejercicios, como abdominales y sentadillas que utilizan discos de pesas de 20,4 kg, pero realizados a un ritmo que permita la recuperación durante la sesión. Se incluirán descansos programados de 5 minutos a los 30, 60 y 85 minutos y se alentará de manera similar a los sujetos con IM a consumir agua y/o la bebida de carbohidratos/electrolitos. Los investigadores obtendrán una muestra de sangre de usted antes e inmediatamente después del ejercicio, así como una, cuatro y seis horas después del ejercicio.

Otro: Ejercicio

Los sujetos de los dos grupos realizaron entre 90 y 100 minutos de ejercicio a diferentes intensidades.

Otros nombres:

• Intensidad moderada
• Alta intensidad

Experimental: Ejercicio de alta intensidad

Los sujetos de este grupo participarán en una sesión de ejercicio que es representativa de un evento de entrenamiento experimentado por cadetes que se preparan para competencias militares. Todos los ejercicios consistirán en una combinación de actividades de carrera (≤ 400 m); ejercicios de peso corporal, como burpees y estocadas; y ejercicios, como abdominales y sentadillas utilizando discos de pesas de 20,4 kg; con transiciones de ejercicio que ocurren rápidamente para prevenir la recuperación. La serie de ejercicios tendrá una duración total de 100 min. Se insertarán descansos programados de 5 min a los 30, 60 y 85 min. Durante los períodos de descanso programados, se alentará a los sujetos a consumir agua y/o la bebida de carbohidratos/electrolitos. Los investigadores obtendrán una muestra de sangre de usted antes e inmediatamente después del ejercicio, así como una, cuatro y seis horas después del ejercicio.

Otro: Ejercicio

Los sujetos de los dos grupos realizaron entre 90 y 100 minutos de ejercicio a diferentes intensidades.

Otros nombres:

• Intensidad moderada
• Alta intensidad

Proliferación de células T

Las muestras de sangre se recolectaron mediante la técnica estándar de punción venosa. Las muestras de sangre se obtuvieron al inicio del estudio, inmediatamente después del ejercicio (0 h), 1 hora después (1 h), 4 horas (4 h) y 6 horas (6 h) después del ejercicio en tubos vacutainer con heparina. Se aislaron células mononucleares de sangre periférica (PBMC) utilizando centrifugación en gradiente de densidad Ficoll-Paque PLUS. Las células T totales se purificaron a partir de PBMC lavadas mediante E-rosetación. La proliferación de células T se analizó en respuesta a la coestimulación a través de CD3+CD28 usando anticuerpos unidos a la placa, o tratamiento con fitohemaglutinina (PHA), o sin simulación. Las células se incubaron durante 6 días a 37ºC en una incubadora humidificada con 5% de CO2 y luego se analizaron mediante citometría de flujo. Las células se analizaron mediante citometría de flujo utilizando anticuerpos anti-CD3-APC y anti-CD152-PE inmediatamente después del aislamiento de células T CD3+ (0 h) y después de 6 días de cultivo utilizando un citómetro de flujo Accuri C6.

Catecolaminas (hormonas)

La sangre se recogerá en un vial que contiene EDTA (6 ml) para análisis de catecolaminas. El plasma para los análisis de catecolaminas (epinefrina y norepinefrina) se obtuvo mediante centrifugación a 2000 g durante 10 min a 4 ˚C. El sobrenadante se eliminó y se almacenó a -80˚C hasta el análisis. Las concentraciones de catecolaminas se determinarán utilizando kits BI-CAT ELISA y se realizarán según las instrucciones del fabricante. Las muestras se midieron a 450 nm utilizando un lector de microplacas Synergy HT. Las muestras de sangre se obtendrán al mismo tiempo que para los resultados primarios (antes y después del ejercicio, así como una, cuatro y seis horas después del ejercicio).

Conteo sanguíneo completo

La sangre periférica se recolectará en un vial que contiene EDTA (6 ml) para el análisis de hemogramas completos (CBC). Estos viales se enviarán a un laboratorio clínico comercial (Quest Diagnostics) para las medidas de CBC. Las muestras de sangre se obtendrán al mismo tiempo que para los resultados primarios (antes y después del ejercicio, así como una, cuatro y seis horas después del ejercicio).

Cortisol

La sangre se recogerá en un vial que contiene EDTA (6 ml) para analizar el cortisol. Estos viales se enviarán a un laboratorio clínico comercial (Quest Diagnostics) para las medidas de cortisol. Las muestras de sangre se obtendrán al mismo tiempo que para los resultados primarios (antes y después del ejercicio, así como una, cuatro y seis horas después del ejercicio).