Vliv miRNA mateřského mléka na střevní mikrobiotu kojenců (MiMilk)

Prvních 1000 dní života je kritickým obdobím, které významně přispívá k programování zdraví jedince. Je stále více zřejmé, že vytvoření zdravé střevní mikroflóry (GM) hraje důležitou roli v prevenci krátkodobých i dlouhodobých zdravotních problémů.

Mezi faktory, které ovlivňují ustavení střevní mikroflóry kojence, hraje zásadní roli mateřské mléko (BM). Na rozdíl od umělého mléka obsahuje mateřské mléko miRNA, které jsou potenciálními mediátory interakcí mezi hostitelem a mikrobiotou. Předpokládáme tedy, že miRNA z mateřského mléka mohou být přítomny v luminálním obsahu kojence a interagovat s jejich mikrobiotou, čímž ji modulují.

Hlavní cíl: Prozkoumat vliv mateřského mléka na složení fekálních miRNA u kojenců.

Primární hodnotící kritérium: Profily a množství miRNA v různých časových bodech (D10, D30, D60, M6 a M12) ve stolici výlučně kojených dětí ve srovnání s těmi, které byly krmeny umělým mlékem.

Sekundární cíle:

Studujte vliv miRNA z mateřského mléka na složení fekální mikroflóry dítěte s ohledem na faktory ovlivňující životní prostředí, včetně složení mateřské mikroflóry.

Zkoumejte vliv mikrobioty mateřského mléka na profily miRNA přítomné v mléce.

Studujte vliv mikrobioty mateřského mléka na střevní mikroflóru kojenců. Prozkoumejte souvislosti mezi miRNA mateřského mléka, střevní mikrobiotou kojence a střevním zánětem u kojenců.

Sekundární hodnotící kritéria:

Korelace mezi profily miRNA mateřského mléka od D1 do D60 a střevní mikroflórou kojených dětí od D1 do M12.

Korelace mezi mikrobiotou mateřského mléka a profily miRNA mateřského mléka od D1 do D60.

Korelace mezi mikrobiotou mateřského mléka od D1 do D60 a fekální mikrobiotou kojence od D1 do M12.

Přímé korelace mezi (1) miRNA mateřského mléka a měřením fekálního kalprotektinu u kojenců od D1 do D60 a (2) střevní mikroflórou kojence a fekálním kalprotektinem u kojenců od D1 do D60.

Pro řešení výzkumné otázky plánujeme zahrnout 200 dyád matka-dítě. Naším cílem je mít 30 dyád s výhradním kojením po dobu alespoň dvou měsíců a 30 dyád, kdy kojenec nebude dostávat žádné mateřské mléko. Každá dyáda se bude účastnit studie po dobu 12 měsíců a fáze náboru bude trvat 18 měsíců.

Při narození kojence odebereme vzorky stolice od matky i kojence a také vzorek mateřského mléka od matky.

V 10., 30. a 60. dni po narození kojence si vyžádáme jak vzorek mateřského mléka od matky, tak vzorek stolice od kojence.

V 6. a 12. měsíci se odebere pouze vzorek stolice od kojence. Během každé návštěvy bude koordinátor klinického výzkumu kontaktovat matky, aby shromáždil informace o jejich zdraví a stravě a také o zdraví a stravě jejich kojenců.

Analýza miRNA ve vzorcích mateřského mléka a stolice: miRNA budou extrahovány ze vzorků kojenecké stolice a mateřského mléka pomocí sekvenování Illumina nové generace (NGS). Top 10 nejhojnějších miRNA pak bude ověřeno pomocí qPCR. Celkové profily miRNA budou analyzovány pomocí hlavní souřadnicové analýzy (PCoA).

Analýza mikrobioty střeva a mateřského mléka: Vzorky stolice a mateřského mléka budou použity pro sekvenování genu 16S rRNA k analýze mikrobiálního složení. Profily mikroflóry budou také zkoumány pomocí hlavní souřadnicové analýzy (PCoA).