Virkningen av morsmelk miRNA på spedbarnets tarmmikrobiota (MiMilk)

De første 1000 dagene av livet er en kritisk periode som i betydelig grad bidrar til programmeringen av et individs helse. Det er stadig tydeligere at etablering av en sunn tarmmikrobiota (GM) spiller en viktig rolle i å forebygge både kort- og langsiktige helseproblemer.

Blant faktorene som påvirker etableringen av spedbarnets tarmmikrobiota, spiller morsmelk (BM) en grunnleggende rolle. I motsetning til formelmelk inneholder morsmelk miRNA som er potensielle mediatorer av interaksjonene mellom verten og mikrobiotaen. Derfor antar vi at miRNA-er fra morsmelk kan være tilstede i spedbarnets luminale innhold og samhandle med mikrobiotaen deres, og dermed modulere den.

Hovedmål: Utforske effekten av morsmelk på sammensetningen av fekale miRNA hos spedbarn.

Primært evalueringskriterium: Profiler og mengder av miRNA på forskjellige tidspunkter (D10, D30, D60, M6 og M12) i avføringen til spedbarn som utelukkende ammes sammenlignet med de som blir matet med morsmelkerstatning.

Sekundære mål:

Studer effekten av miRNA fra morsmelk på sammensetningen av spedbarnets fekale mikrobiota, med tanke på miljøforvirrende faktorer, inkludert sammensetningen av mors mikrobiota.

Undersøk effekten av morsmelkmikrobiota på miRNA-profilene som finnes i melken.

Studer effekten av morsmelkmikrobiota på tarmmikrobiotaen til spedbarn. Utforsk koblingene mellom morsmelk miRNA, spedbarnets tarmmikrobiota og tarmbetennelse hos spedbarn.

Sekundære evalueringskriterier:

Korrelasjoner mellom morsmelk miRNA-profiler fra D1 til D60 og tarmmikrobiotaen til spedbarn som ammes fra D1 til M12.

Korrelasjoner mellom morsmelkmikrobiotaen og morsmelk miRNA-profilene fra D1 til D60.

Korrelasjoner mellom morsmelk mikrobiota fra D1 til D60 og spedbarns fekal mikrobiota fra D1 til M12.

Direkte korrelasjoner mellom (1) morsmelk miRNA og måling av fekalt kalprotektin hos spedbarn fra D1 til D60, og (2) spedbarnets tarmmikrobiota og fekalt kalprotektin hos spedbarn fra D1 til D60.

For å løse forskningsspørsmålet planlegger vi å inkludere 200 mor-spedbarn-dyader. Målet vårt er å ha 30 dyader med eksklusiv amming i minst to måneder, og 30 dyader der spedbarnet ikke skal ha fått morsmelk. Hver dyade vil delta i studien i en periode på 12 måneder, og rekrutteringsfasen vil vare i 18 måneder.

Ved spedbarnets fødsel vil vi samle inn avføringsprøver fra både mor og spedbarn, samt morsmelkprøve fra mor.

10, 30 og 60 dager etter spedbarnets fødsel vil vi be om både morsmelkprøve fra mor og avføringsprøve fra spedbarnet.

Ved 6 og 12 måneder vil kun en avføringsprøve fra spedbarnet bli tatt. Under hvert besøk vil en klinisk forskningskoordinator kontakte mødrene for å samle informasjon om både deres helse og kosthold, samt deres spedbarns helse og kosthold.

Analyse av miRNA i brystmelk og avføringsprøver: miRNA vil bli ekstrahert fra spedbarns avføringsprøver og morsmelk ved bruk av neste generasjons Illumina-sekvensering (NGS). De 10 mest tallrike miRNAene vil deretter bli validert gjennom qPCR. De overordnede miRNA-profilene vil bli analysert ved hjelp av Principal Coordinate Analysis (PCoA).

Analyse av tarm- og morsmelkmikrobiota: Avførings- og morsmelkprøver vil bli brukt til 16S rRNA-gensekvensering for å analysere den mikrobielle sammensetningen. Mikrobiotaprofiler vil også bli undersøkt ved hjelp av Principal Coordinate Analysis (PCoA).