Impacto dos miRNAs do leite materno na microbiota intestinal infantil (MiMilk)

Os primeiros 1.000 dias de vida são um período crítico que contribui significativamente para a programação da saúde do indivíduo. É cada vez mais evidente que o estabelecimento de uma microbiota intestinal saudável (GM) desempenha um papel importante na prevenção de problemas de saúde a curto e longo prazo.

Dentre os fatores que influenciam o estabelecimento da microbiota intestinal do bebê, o leite materno (LM) desempenha papel fundamental. Ao contrário do leite em pó, o leite materno contém miRNAs que são potenciais mediadores das interações entre o hospedeiro e a microbiota. Assim, levantamos a hipótese de que os miRNAs do leite materno podem estar presentes no conteúdo luminal do bebê e interagir com sua microbiota, modulando-a.

Objetivo principal: Explorar o efeito do leite materno na composição dos miRNAs fecais em bebês.

Critério de avaliação primário: Perfis e quantidades de miRNAs em diferentes momentos (D10, D30, D60, M6 e M12) nas fezes de bebês amamentados exclusivamente em comparação com aqueles alimentados com leite em pó.

Objetivos Secundários:

Estudar o efeito dos miRNAs do leite materno na composição da microbiota fecal do bebê, considerando fatores de confusão ambientais, incluindo a composição da microbiota materna.

Investigar o efeito da microbiota do leite materno nos perfis de miRNA presentes no leite.

Estude o efeito da microbiota do leite materno na microbiota intestinal de bebês. Explore as ligações entre os miRNAs do leite materno, a microbiota intestinal do bebê e a inflamação intestinal em bebês.

Critérios de Avaliação Secundária:

Correlações entre os perfis de miRNA do leite materno de D1 a D60 e a microbiota intestinal de bebês amamentados de D1 a M12.

Correlações entre a microbiota do leite materno e os perfis de miRNA do leite materno de D1 a D60.

Correlações entre a microbiota do leite materno de D1 a D60 e a microbiota fecal infantil de D1 a M12.

Correlações diretas entre (1) miRNAs do leite materno e a medição de calprotectina fecal em bebês de D1 a D60, e (2) a microbiota intestinal do bebê e calprotectina fecal em bebês de D1 a D60.

Para responder à questão da pesquisa, planejamos incluir 200 díades mãe-bebê. Nosso objetivo é ter 30 díades com amamentação exclusiva por pelo menos dois meses e 30 díades em que o bebê não tenha recebido leite materno. Cada díade participará do estudo por um período de 12 meses, sendo que a fase de recrutamento terá duração de 18 meses.

No nascimento do bebê, coletaremos amostras de fezes da mãe e do bebê, bem como uma amostra de leite materno da mãe.

Aos 10, 30 e 60 dias após o nascimento do bebê, solicitaremos uma amostra de leite materno da mãe e uma amostra de fezes do bebê.

Aos 6 e 12 meses, apenas uma amostra de fezes do bebê será coletada. Durante cada visita, um coordenador de pesquisa clínica entrará em contato com as mães para coletar informações sobre sua saúde e alimentação, bem como sobre a saúde e alimentação do bebê.

Análise de miRNAs em amostras de leite materno e fezes: miRNAs serão extraídos de amostras de fezes infantis e leite materno usando sequenciamento Illumina de última geração (NGS). Os 10 miRNAs mais abundantes serão então validados através de qPCR. Os perfis gerais de miRNA serão analisados ​​usando Análise de Coordenadas Principais (PCoA).

Análise da microbiota intestinal e do leite materno: Amostras de fezes e leite materno serão usadas para sequenciamento do gene 16S rRNA para analisar a composição microbiana. Os perfis da microbiota também serão examinados usando Análise de Coordenadas Principais (PCoA).