Impacto de los miARN de la leche materna en la microbiota intestinal infantil (MiMilk)

Los primeros 1.000 días de vida son un período crítico que contribuye significativamente a la programación de la salud de un individuo. Es cada vez más evidente que establecer una microbiota intestinal (GM) saludable desempeña un papel importante en la prevención de problemas de salud tanto a corto como a largo plazo.

Entre los factores que influyen en el establecimiento de la microbiota intestinal del lactante, la leche materna (LM) juega un papel fundamental. A diferencia de la leche de fórmula, la leche materna contiene miARN que son mediadores potenciales de las interacciones entre el huésped y la microbiota. Por lo tanto, planteamos la hipótesis de que los miARN de la leche materna pueden estar presentes en el contenido luminal del bebé e interactuar con su microbiota, modulándola así.

Objetivo principal: Explorar el efecto de la leche materna sobre la composición de los miARN fecales en lactantes.

Criterio de evaluación principal: perfiles y cantidades de miARN en diferentes momentos (D10, D30, D60, M6 y M12) en las heces de lactantes amamantados exclusivamente en comparación con aquellos alimentados con leche de fórmula.

Objetivos secundarios:

Estudiar el efecto de los miARN de la leche materna sobre la composición de la microbiota fecal del lactante, considerando factores de confusión ambientales, incluida la composición de la microbiota materna.

Investigar el efecto de la microbiota de la leche materna sobre los perfiles de miARN presentes en la leche.

Estudiar el efecto de la microbiota de la leche materna sobre la microbiota intestinal de los lactantes. Explore los vínculos entre los miARN de la leche materna, la microbiota intestinal del bebé y la inflamación intestinal en los bebés.

Criterios de evaluación secundaria:

Correlaciones entre los perfiles de miARN de la leche materna de D1 a D60 y la microbiota intestinal de lactantes amamantados de D1 a M12.

Correlaciones entre la microbiota de la leche materna y los perfiles de miARN de la leche materna de D1 a D60.

Correlaciones entre la microbiota de la leche materna de D1 a D60 y la microbiota fecal infantil de D1 a M12.

Correlaciones directas entre (1) los miARN de la leche materna y la medición de la calprotectina fecal en bebés de D1 a D60, y (2) la microbiota intestinal del bebé y la calprotectina fecal en bebés de D1 a D60.

Para abordar la pregunta de investigación, planeamos incluir 200 díadas madre-hijo. Nuestro objetivo es tener 30 díadas con lactancia materna exclusiva durante al menos dos meses y 30 díadas en las que el bebé no haya recibido leche materna. Cada díada participará en el estudio por un período de 12 meses y la fase de reclutamiento tendrá una duración de 18 meses.

Al nacer el bebé, recolectaremos muestras de heces tanto de la madre como del bebé, así como una muestra de leche materna de la madre.

A los 10, 30 y 60 días después del nacimiento del bebé, solicitaremos tanto una muestra de leche materna a la madre como una muestra de heces del bebé.

A los 6 y 12 meses solo se recolectará una muestra de heces del bebé. Durante cada visita, un coordinador de investigación clínica se comunicará con las madres para recopilar información sobre su salud y dieta, así como sobre la salud y la dieta de su bebé.

Análisis de miARN en muestras de leche materna y heces: los miARN se extraerán de muestras de heces y leche materna de bebés mediante secuenciación Illumina (NGS) de próxima generación. Luego, los 10 miARN más abundantes se validarán mediante qPCR. Los perfiles generales de miARN se analizarán mediante el análisis de coordenadas principales (PCoA).

Análisis de la microbiota intestinal y de la leche materna: se utilizarán muestras de heces y leche materna para la secuenciación del gen 16S rRNA para analizar la composición microbiana. Los perfiles de microbiota también se examinarán mediante el análisis de coordenadas principales (PCoA).