Wpływ miRNA mleka matki na mikroflorę jelitową niemowlęcia (MiMilk)

Pierwsze 1000 dni życia to okres krytyczny, który znacząco wpływa na programowanie zdrowia jednostki. Coraz bardziej oczywiste jest, że stworzenie zdrowej mikroflory jelitowej (GM) odgrywa ważną rolę w zapobieganiu zarówno krótko-, jak i długoterminowym problemom zdrowotnym.

Wśród czynników wpływających na rozwój mikroflory jelitowej niemowlęcia zasadniczą rolę odgrywa mleko matki. W przeciwieństwie do mleka modyfikowanego, mleko matki zawiera miRNA, które są potencjalnymi mediatorami interakcji między gospodarzem a mikroflorą. W związku z tym stawiamy hipotezę, że miRNA z mleka matki mogą być obecne w świetle niemowlęcia i oddziaływać z jego mikroflorą, modulując ją w ten sposób.

Cel główny: Zbadanie wpływu mleka matki na skład miRNA w kale u niemowląt.

Podstawowe kryterium oceny: Profile i ilości miRNA w różnych punktach czasowych (D10, D30, D60, M6 i M12) w kale niemowląt karmionych wyłącznie piersią w porównaniu z dziećmi karmionymi mlekiem modyfikowanym.

Cele drugorzędne:

Zbadaj wpływ miRNA z mleka matki na skład mikroflory kałowej niemowlęcia, biorąc pod uwagę czynniki zakłócające środowisko, w tym skład mikroflory matki.

Zbadaj wpływ mikroflory mleka matki na profile miRNA obecne w mleku.

Zbadaj wpływ mikroflory mleka matki na mikroflorę jelitową niemowląt. Poznaj powiązania między miRNA mleka matki, mikroflorą jelitową niemowlęcia i zapaleniem jelit u niemowląt.

Dodatkowe kryteria oceny:

Korelacje między profilami miRNA mleka matki od D1 do D60 a mikroflorą jelitową niemowląt karmionych piersią od D1 do M12.

Korelacje między mikroflorą mleka matki a profilami miRNA mleka matki od D1 do D60.

Korelacje między mikroflorą mleka matki od D1 do D60 a mikroflorą kału niemowlęcia od D1 do M12.

Bezpośrednie korelacje między (1) miRNA mleka matki a pomiarem kalprotektyny w kale u niemowląt od D1 do D60 oraz (2) mikroflorą jelitową niemowlęcia i kalprotektyną w kale u niemowląt od D1 do D60.

Aby odpowiedzieć na pytanie badawcze, planujemy uwzględnić 200 diad matka-dziecko. Naszym celem jest, aby 30 diad karmiło wyłącznie piersią przez co najmniej dwa miesiące i 30 diad, w których niemowlę nie będzie otrzymywało mleka matki. Każda diada będzie uczestniczyć w badaniu przez okres 12 miesięcy, a etap rekrutacji potrwa 18 miesięcy.

Po urodzeniu dziecka pobierzemy próbki kału od matki i niemowlęcia, a także próbkę mleka matki.

Po 10, 30 i 60 dniach od urodzenia dziecka poprosimy zarówno o pobranie próbki mleka matki, jak i kału niemowlęcia.

W wieku 6 i 12 miesięcy pobierana będzie wyłącznie próbka kału od niemowlęcia. Podczas każdej wizyty koordynator badań klinicznych będzie kontaktował się z matkami w celu zebrania informacji zarówno na temat ich zdrowia i diety, jak i zdrowia i diety ich niemowlęcia.

Analiza miRNA w mleku matki i próbkach kału: miRNA zostaną ekstrahowane z próbek kału niemowląt i mleka matki za pomocą sekwencjonowania Illumina nowej generacji (NGS). 10 najliczniej występujących miRNA zostanie następnie zweryfikowanych metodą qPCR. Ogólne profile miRNA zostaną przeanalizowane przy użyciu analizy głównych współrzędnych (PCoA).

Analiza mikroflory jelitowej i mleka matki: Próbki kału i mleka matki zostaną wykorzystane do sekwencjonowania genu 16S rRNA w celu analizy składu mikrobiologicznego. Profile mikroflory zostaną również zbadane za pomocą analizy głównych współrzędnych (PCoA).