Impatto dei miRNA del latte materno sul microbiota intestinale del neonato (MiMilk)

I primi 1.000 giorni di vita rappresentano un periodo critico che contribuisce in modo significativo alla programmazione della salute dell'individuo. È sempre più evidente che la creazione di un microbiota intestinale (GM) sano svolge un ruolo importante nella prevenzione di problemi di salute sia a breve che a lungo termine.

Tra i fattori che influenzano la costituzione del microbiota intestinale del neonato, il latte materno (BM) gioca un ruolo fondamentale. A differenza del latte artificiale, il latte materno contiene miRNA che sono potenziali mediatori delle interazioni tra l’ospite e il microbiota. Pertanto, ipotizziamo che i miRNA del latte materno possano essere presenti nel contenuto luminale del bambino e interagire con il loro microbiota, modulandolo.

Obiettivo principale: esplorare l'effetto del latte materno sulla composizione dei miRNA fecali nei neonati.

Criterio di valutazione primario: profili e quantità di miRNA in diversi momenti (D10, D30, D60, M6 e M12) nelle feci di neonati allattati esclusivamente al seno rispetto a quelli alimentati con latte artificiale.

Obiettivi secondari:

Studiare l'effetto dei miRNA del latte materno sulla composizione del microbiota fecale del neonato, considerando i fattori confondenti ambientali, inclusa la composizione del microbiota materno.

Studiare l'effetto del microbiota del latte materno sui profili di miRNA presenti nel latte.

Studiare l’effetto del microbiota del latte materno sul microbiota intestinale dei neonati. Esplora i collegamenti tra i miRNA del latte materno, il microbiota intestinale del neonato e l'infiammazione intestinale nei neonati.

Criteri di valutazione secondari:

Correlazioni tra i profili dei miRNA del latte materno da D1 a D60 e il microbiota intestinale dei neonati allattati al seno da D1 a M12.

Correlazioni tra il microbiota del latte materno e i profili dei miRNA del latte materno da D1 a D60.

Correlazioni tra il microbiota del latte materno da D1 a D60 e il microbiota fecale infantile da D1 a M12.

Correlazioni dirette tra (1) miRNA del latte materno e misurazione della calprotectina fecale nei neonati da D1 a D60 e (2) microbiota intestinale del neonato e calprotectina fecale nei neonati da D1 a D60.

Per rispondere alla domanda di ricerca, prevediamo di includere 200 diadi madre-bambino. Il nostro obiettivo è quello di avere 30 diadi con allattamento esclusivo al seno per almeno due mesi e 30 diadi in cui il bambino non avrà ricevuto latte materno. Ciascuna diade parteciperà allo studio per un periodo di 12 mesi e la fase di reclutamento durerà 18 mesi.

Alla nascita del bambino, raccoglieremo campioni di feci sia della madre che del bambino, nonché un campione di latte materno della madre.

A 10, 30 e 60 giorni dalla nascita del bambino, richiederemo sia un campione di latte materno alla madre che un campione di feci al bambino.

A 6 e 12 mesi verrà raccolto solo un campione di feci del bambino. Durante ogni visita, un coordinatore della ricerca clinica contatterà le madri per raccogliere informazioni sia sulla loro salute e dieta, sia sulla salute e la dieta del loro bambino.

Analisi dei miRNA nel latte materno e nei campioni di feci: i miRNA verranno estratti dai campioni di feci e dal latte materno dei neonati utilizzando il sequenziamento Illumina di nuova generazione (NGS). I primi 10 miRNA più abbondanti verranno quindi validati tramite qPCR. I profili complessivi dei miRNA verranno analizzati utilizzando l'analisi delle coordinate principali (PCoA).

Analisi del microbiota dell'intestino e del latte materno: i campioni di feci e latte materno verranno utilizzati per il sequenziamento del gene 16S rRNA per analizzare la composizione microbica. I profili del microbiota saranno esaminati anche utilizzando l'analisi delle coordinate principali (PCoA).