Změny hladin interleukinu 8 a 10 v zubech s nekrotickou dřeň a apikální parodontitidou

Tato observační studie si klade za cíl prozkoumat změny v biomarkerech v gingivální crevikulární tekutině (GCF) a periapikální tekutině během léčby kořenového kanálku u pacientů s nekrotickou pulpou a apikální periodontitidou. Etické schválení bylo získáno od Etické komise pro výzkum (REC) Fakulty zubního lékařství pro dívky na univerzitě Al-Azhar (P-EN-23-04). Po vysvětlení cílů a důležitosti studie bude od všech účastníků získán písemný informovaný souhlas.

Design studie:

Pacienti vyžadující ošetření kořenových kanálků na Endodontické klinice Fakulty zubního lékařství pro dívky Univerzity Al-Azhar budou přijímáni na základě kritérií pro zařazení a vyloučení.

Kritéria zahrnutí:

Dospělí ve věku 18-45 let. Pacienti bez systémových onemocnění. Pacienti s diagnózou nekrotické dřeně a apikální parodontitidy v jednokořenovém zubu s jedním kanálkem.

Pacienti bez předchozího endodontického ošetření nebo souvisejících terapeutických postupů.

Pacienti s normálním stavem parodontu.

Kritéria vyloučení:

Pacienti, kteří odmítají účast. Pacienti dlouhodobě užívající protizánětlivé léky, imunosupresivní chemoterapii nebo antibiotika během posledních 3 týdnů.

Pacienti se systémovými zdravotními stavy (např. kardiovaskulární onemocnění, diabetes mellitus, HIV, hepatitida).

Těhotné ženy, kuřáci a lidé s neopravitelnými zuby.

Postupy odběru vzorků:

1. Krevní tekutina dásní (GCF):

   Načasování: Vzorky budou sbírány ve dvou časových bodech:

   Před zahájením přístupu do kořenového kanálku (období 1). Před plněním kanálku (2. období).

   Postup:

   Izolace oblasti pomocí bavlněných rolí. Odstranění plaku a šetrné vysušení zubu vzduchem. Umístění sterilizovaných papírových proužků do gingiválního sulku, dokud neucítíte minimální odpor.

   Proužky zůstanou po dobu jedné minuty a budou umístěny na meziální nebo distální vestibulární povrchy.

   Pokud dojde ke kontaminaci krve, pokusí se o odběr z jiného místa. Přetrvávající krvácení povede k vyloučení vzorku.

   Skladování:

   Proužky se umístí do zkumavek Eppendorf s fyziologickým roztokem pufrovaným fosfátem a zmrazí se při -80 °C až do analýzy.

2. Periapická tekutina:

Načasování: Vzorky budou sbírány:

Hned po korunovém přístupu. Před plněním kořenového kanálku.

Postup:

Do kořenového kanálku budou vloženy tři sekvenční body sterilního absorpčního papíru, které přesahují 2 mm za radiografický apex.

Body zůstanou nerušeny po dobu jedné minuty. Hroty (4 mm) budou odříznuty a umístěny do zkumavek Eppendorf obsahujících 2 ml redukované transportní tekutiny (RTF).

Skladování:

Zkumavky budou až do analýzy skladovány při -80 °C.

Protokol ošetření kořenových kanálků:

Anestezie a izolace:

Lokální anestezie s 2% lidokainem obsahujícím adrenalin 1:80 000. Gumová přehrada izolace.

Přístup a čištění:

Přístup k preparaci dutiny pomocí kulatých fréz z karbidu wolframu. Frézy Gates Glidden pro přímý přístup. Čištění a tvarování nerezovými K-pilníky. Výplach 10 ml 2,5% chlornanu sodného (celková doba: 30 minut). Závěrečné proplachování 2 ml 17% EDTA po dobu 1 minuty a následně 2 ml sterilního fyziologického roztoku.

Vzorová kolekce:

Po počáteční přípravě budou vzorky periapické tekutiny odebrány, jak je popsáno.

K utěsnění přístupové dutiny bude použit provizorní výplňový materiál.

Dokončení léčby:

O sedm dní později budou odstraněny dočasné výplně a budou odebrány druhé vzorky GCF a periapikální tekutiny.

Kořenové kanálky budou vyplněny gutaperčou a epoxidovým pryskyřičným tmelem prostřednictvím bočního zhutnění.

Kompozitní pryskyřice utěsní přístupovou dutinu.

Úložiště a analýza:

Všechny vzorky budou uchovány při -80 °C, dokud nebude provedena analýza biomarkerů. Studie se zaměřuje na hodnocení změn klíčových biomarkerů (např. interleukiny) spojených se zánětem a hojením během léčby.

Tento popis zajišťuje srozumitelnost, technické podrobnosti a dodržování etických a procedurálních standardů a zabraňuje duplicitě informací z jiných oddílů