Účinek léčby methylfenidátu na hladinu oxidačního stresu u dětí diagnostikovaných s poruchou hyperaktivity pozornosti (ADHD)

Skupina pacientů

Skupina pacientů s poruchou pozornosti a poruchou hyperaktivity. Skupina plánovala zahájit léčbu methylfenidátu nezávisle na studii

Jiný: Toto není intervenční studie. Pacienti, u nichž se plánuje zahájit léčbu methylfenidátu, byli pozváni k účasti na studii.

Toto není intervenční studie. Pacienti s diagnózou poruchy pozornosti s hyperaktivitou (ADHD), pro které je plánována léčba methylfenidátu, byli pozváni k účasti na studii. Pacienti byli zapsáni do sledování a byly jim poskytnuty naše kontaktní informace. V rámci rutinní péče byli pacienti povoláni jednou měsíčně. Nezbytné úpravy dávkování byly provedeny v souladu s lékařskými pokyny, bez jakéhokoli zásahu do studie. Pacienti se stížnostmi nebo ti, kteří museli být viděni dříve, byli vidět mezi nimi. Výsledkem bylo, že pacienti byli pro tuto studii dodržováni celkem 3 měsíce. Vzorky séra pro markery oxidačního stresu byly odebrány na začátku (před zahájením léčby) a ve 3. měsíci (po zahájení léčby).

Ostatní jména:

• methylfenidát
• Léčba ADHD

Změna celkového stavu oxidantů

Hladina celkového stavu oxidantu (TOS) byla měřena podle protokolu lidské soupravy ELISA. Vzorky séra od 39 pacientů byly porovnány bezprostředně před a po 3 měsících léčby. TOS byl měřen podle protokolu Human ELISA Kit následujícím způsobem (BioAssay Technology Laboratory, Cat.No E1599HU):

Standardy přidané do Wells. Do vzorkových jamek bylo přidáno 40 μl vzorku séra, následovalo 10 μl anti-TOS protilátky. Inkubován při 37 ° C po dobu 60 minut. Deska byla promyta 5krát pomocí promývacího pufru. Do jamek bylo přidáno 50 μl roztoku substrátu A a do každé jamky bylo přidáno 50 μl roztoku substrátu B. Destička byla inkubována po dobu 10 minut při 37 ° C ve tmě. Do studny bylo přidáno 50 μl roztoku zastavení a modrá barva se okamžitě změnila na žlutou. Optická hustota (hodnota OD) každé jamky byla stanovena pomocí čtečky mikrodestiček nastaveného na 450 nm během 10 minut po přidání roztoku zastavení.

Změna celkového stavu antioxidantu

Úroveň celkové úrovně antioxidantu (TAS) byla měřena podle protokolu lidské soupravy ELISA. Vzorky v séru od 39 pacientů byly porovnány bezprostředně před a po 3 měsících léčby .Ta byly měřeny podle protokolu lidské soupravy ELISA následovně (BioAssay Technology Laboratory, Cat.No E4350HU):

Standardy přidané do Wells. Do vzorkových jamek bylo přidáno 40 μl vzorku séra, následovalo 10 μl anti-TOS protilátky. Inkubován při 37 ° C po dobu 60 minut. Deska byla promyta 5krát pomocí promývacího pufru. Do jamek bylo přidáno 50 μl roztoku substrátu A a do každé jamky bylo přidáno 50 μl roztoku substrátu B. Destička byla inkubována po dobu 10 minut při 37 ° C ve tmě. Do studny bylo přidáno 50 μl roztoku zastavení a modrá barva se okamžitě změnila na žlutou. Optická hustota (hodnota OD) každé jamky byla stanovena pomocí čtečky mikrodestiček nastaveného na 450 nm během 10 minut po přidání roztoku zastavení.

Změna superoxidových despitací

Hladina superoxidů desítky byla měřena podle protokolu Human ELISA Kit. Vzorky séra od 39 pacientů byly porovnány bezprostředně před a po 3 měsících léčby. Superoxidové desítky byly měřeny podle protokolu Human ELISA Kit následujícím způsobem (BioAssay Technology Laboratory, Cat.No E0918HU): standardy přidané do Wells. Do vzorkových jamek bylo přidáno 40 μl vzorku séra, následovalo 10 μl anti-TOS protilátky. Inkubován při 37 ° C po dobu 60 minut. Deska byla promyta 5krát pomocí promývacího pufru. Do jamek bylo přidáno 50 μl roztoku substrátu A a do každé jamky bylo přidáno 50 μl roztoku substrátu B. Destička byla inkubována po dobu 10 minut při 37 ° C ve tmě. Do studny bylo přidáno 50 μl roztoku zastavení a modrá barva se okamžitě změnila na žlutou. Optická hustota (hodnota OD) každé jamky byla stanovena pomocí čtečky mikrodestiček nastaveného na 450 nm během 10 minut po přidání roztoku zastavení.

Změna malondialdehydu

Hladina malondialdehydu (MDA) byla měřena podle protokolu Human ELISA Kit. Vzorky séra od 39 pacientů byly porovnány bezprostředně před a po 3 měsících léčby. MDA byla měřena podle protokolu Human ELISA Kit následujícím způsobem (BioAssay Technology Laboratory, Cat.No E1371HU):

Standardy přidané do Wells. Do vzorkových jamek bylo přidáno 40 μl vzorku séra, následovalo 10 μl anti-TOS protilátky. Inkubován při 37 ° C po dobu 60 minut. Deska byla promyta 5krát pomocí promývacího pufru. Do jamek bylo přidáno 50 μl roztoku substrátu A a do každé jamky bylo přidáno 50 μl roztoku substrátu B. Destička byla inkubována po dobu 10 minut při 37 ° C ve tmě. Do studny bylo přidáno 50 μl roztoku zastavení a modrá barva se okamžitě změnila na žlutou. Optická hustota (hodnota OD) každé jamky byla stanovena pomocí čtečky mikrodestiček nastaveného na 450 nm během 10 minut po přidání roztoku zastavení.

Změna v ox-LDL

Hladina OX-LDL byla měřena podle protokolu Human ELISA Kit. Vzorky séra od 39 pacientů byly porovnány bezprostředně před a po 3 měsících léčby. OX-LDL byl měřen podle protokolu Human ELISA Kit následujícím způsobem (BioAssay Technology Laboratory, Cat.No E1521HU):

Standardy přidané do Wells. Do vzorkových jamek bylo přidáno 40 μl vzorku séra, následovalo 10 μl anti-TOS protilátky. Inkubován při 37 ° C po dobu 60 minut. Deska byla promyta 5krát pomocí promývacího pufru. Do jamek bylo přidáno 50 μl roztoku substrátu A a do každé jamky bylo přidáno 50 μl roztoku substrátu B. Destička byla inkubována po dobu 10 minut při 37 ° C ve tmě. Do studny bylo přidáno 50 μl roztoku zastavení a modrá barva se okamžitě změnila na žlutou. Optická hustota (hodnota OD) každé jamky byla stanovena pomocí čtečky mikrodestiček nastaveného na 450 nm během 10 minut po přidání roztoku zastavení.

Změna indexu oxidačního stresu (OSI)

Hladina indexu oxidačního stresu (OSI) byla měřena podle protokolu Human ELISA Kit. Vzorky séra od 39 pacientů byly porovnány bezprostředně před a po 3 měsících léčby.

OSI je index vytvořený poměrem TOS k TAS. OSI je parametr, který ukazuje směr, ve kterém se posune rovnováha oxidačního napětí těla. Zvýšení nebo snížení hodnoty OSI naznačuje, že se oxidační rovnováha změnila. Zatímco zvýšení hodnoty OSI naznačuje změnu rovnováhy ve prospěch oxidantů; Snížení hodnoty OSI naznačuje změnu rovnováhy ve prospěch antioxidantů.