O efeito do tratamento com metilfenidato nos níveis de estresse oxidativo em crianças diagnosticadas com transtorno de déficit de atenção déficit (TDAH)

Grupo de pacientes

Grupo de pacientes com déficit de atenção e transtorno de hiperatividade. O grupo planejava iniciar o tratamento de metilfenidato independente do estudo

Outro: Este não é um estudo intervencionista. Pacientes planejados para iniciar o tratamento com metilfenidato foram convidados a participar do estudo.

Este não é um estudo intervencionista. Os pacientes diagnosticados com transtorno de déficit de atenção do déficit de atenção (TDAH), para quem o tratamento com metilfenidato é planejado, foram convidados a participar do estudo. Os pacientes foram incluídos no acompanhamento e nossas informações de contato foram fornecidas a eles. Como parte dos cuidados de rotina, os pacientes foram chamados uma vez por mês. Os ajustes de dose necessários foram feitos de acordo com as diretrizes médicas, sem nenhuma intervenção para o estudo. Pacientes com queixas ou aqueles que precisavam ser vistos anteriormente foram vistos no meio. Como resultado, os pacientes foram seguidos por um total de 3 meses para este estudo. As amostras de soro para marcadores de estresse oxidativo foram coletadas na linha de base (antes do início do tratamento) e no terceiro mês (após o início do tratamento).

Outros nomes:

• metilfenidato
• Tratamento do TDAH

Mudança no status total do oxidante

O nível total de status oxidante (TOS) foi medido de acordo com o protocolo do kit ELISA humano. Amostras de soro de 39 pacientes foram comparadas imediatamente antes e após 3 meses de tratamento. O TOS foi medido de acordo com o Protocolo Human ELISA Kit da seguinte maneira (Laboratório de Tecnologia de Bioensaio, Cat.No E1599HU):

Padrões adicionados ao Wells. 40μL da amostra sérica foi adicionada aos poços da amostra, seguidos por 10μL de anticorpo anti-TOS. Incubado a 37 ° C por 60 minutos. A placa foi lavada 5 vezes com tampão de lavagem. 50μl de solução de substrato A foi adicionado aos poços e, em seguida, foi adicionado 50μl de solução de substrato B a cada poço. A placa foi incubada por 10 minutos a 37 ° C no escuro. 50μL de solução de parada foi adicionado aos poços e a cor azul foi imediatamente alterada para amarelo. A densidade óptica (valor da OD) de cada poço foi determinada usando um leitor de microplacas definido como 450 nm dentro de 10 minutos após a adição da solução de parada.

Mudança no status antioxidante total

O nível total de status antioxidante (TAS) foi medido de acordo com o protocolo do kit ELISA humano. As amostras de soro de 39 pacientes foram comparadas imediatamente antes e após 3 meses de tratamento. Os TAs foram medidos de acordo com o Protocolo Human ELISA Kit da seguinte maneira (Bioensay Technology Laboratory, Cat.No E4350HU):

Padrões adicionados ao Wells. 40μL da amostra sérica foi adicionada aos poços da amostra, seguidos por 10μL de anticorpo anti-TOS. Incubado a 37 ° C por 60 minutos. A placa foi lavada 5 vezes com tampão de lavagem. 50μl de solução de substrato A foi adicionado aos poços e, em seguida, foi adicionado 50μl de solução de substrato B a cada poço. A placa foi incubada por 10 minutos a 37 ° C no escuro. 50μL de solução de parada foi adicionado aos poços e a cor azul foi imediatamente alterada para amarelo. A densidade óptica (valor da OD) de cada poço foi determinada usando um leitor de microplacas definido como 450 nm dentro de 10 minutos após a adição da solução de parada.

Mudança no superóxido dismutas

O nível de superóxido Dismutas foi medido de acordo com o Protocolo Human ELISA Kit. Amostras de soro de 39 pacientes foram comparadas imediatamente antes e após 3 meses de tratamento. O Superóxido Dismutas foi medido de acordo com o Protocolo Human ELISA Kit, como segue (Laboratório de Tecnologia de Bioensaio, Cat.No E0918HU): padrões adicionados aos poços. 40μL da amostra sérica foi adicionada aos poços da amostra, seguidos por 10μL de anticorpo anti-TOS. Incubado a 37 ° C por 60 minutos. A placa foi lavada 5 vezes com tampão de lavagem. 50μl de solução de substrato A foi adicionado aos poços e, em seguida, foi adicionado 50μl de solução de substrato B a cada poço. A placa foi incubada por 10 minutos a 37 ° C no escuro. 50μL de solução de parada foi adicionado aos poços e a cor azul foi imediatamente alterada para amarelo. A densidade óptica (valor da OD) de cada poço foi determinada usando um leitor de microplacas definido como 450 nm dentro de 10 minutos após a adição da solução de parada.

Mudança no malondialdeído

O nível de malondialdeído (MDA) foi medido de acordo com o Protocolo Human ELISA Kit. Amostras de soro de 39 pacientes foram comparadas imediatamente antes e após 3 meses de tratamento. O MDA foi medido de acordo com o Protocolo Human ELISA Kit da seguinte maneira (Laboratório de Tecnologia de Bioensaio, Cat.No E1371HU):

Padrões adicionados ao Wells. 40μL da amostra sérica foi adicionada aos poços da amostra, seguidos por 10μL de anticorpo anti-TOS. Incubado a 37 ° C por 60 minutos. A placa foi lavada 5 vezes com tampão de lavagem. 50μl de solução de substrato A foi adicionado aos poços e, em seguida, foi adicionado 50μl de solução de substrato B a cada poço. A placa foi incubada por 10 minutos a 37 ° C no escuro. 50μL de solução de parada foi adicionado aos poços e a cor azul foi imediatamente alterada para amarelo. A densidade óptica (valor da OD) de cada poço foi determinada usando um leitor de microplacas definido como 450 nm dentro de 10 minutos após a adição da solução de parada.

Mudança no OX-LDL

O nível de LDL de OX foi medido de acordo com o protocolo do kit ELISA humano. Amostras de soro de 39 pacientes foram comparadas imediatamente antes e após 3 meses de tratamento. O OX-LDL foi medido de acordo com o Protocolo Human ELISA Kit, como segue (Laboratório de Tecnologia de Bioensaio, Cat.No E1521HU):

Padrões adicionados ao Wells. 40μL da amostra sérica foi adicionada aos poços da amostra, seguidos por 10μL de anticorpo anti-TOS. Incubado a 37 ° C por 60 minutos. A placa foi lavada 5 vezes com tampão de lavagem. 50μl de solução de substrato A foi adicionado aos poços e, em seguida, foi adicionado 50μl de solução de substrato B a cada poço. A placa foi incubada por 10 minutos a 37 ° C no escuro. 50μL de solução de parada foi adicionado aos poços e a cor azul foi imediatamente alterada para amarelo. A densidade óptica (valor da OD) de cada poço foi determinada usando um leitor de microplacas definido como 450 nm dentro de 10 minutos após a adição da solução de parada.

Mudança no Índice de Estresse Oxidativo (OSI)

O nível do índice de estresse oxidativo (OSI) foi medido de acordo com o protocolo do kit ELISA humano. Amostras de soro de 39 pacientes foram comparadas imediatamente antes e após 3 meses de tratamento.

OSI é um índice criado pela razão de TOS para TAS. OSI é um parâmetro que mostra a direção em que o equilíbrio de estresse oxidativo do corpo muda. Um aumento ou diminuição no valor OSI indica que o balanço oxidativo mudou. Enquanto um aumento no valor OSI indica uma mudança no equilíbrio em favor dos oxidantes; Uma diminuição no valor OSI indica uma mudança no equilíbrio em favor dos anti-oxidantes.