Sliny a extracelulární váčky pro neurodegenerativní onemocnění (MINERVA)
Nová metoda pro diagnostiku neurodegenerativních onemocnění založených na biochemickém profilování slin
Přehled studie
Postavení
Podmínky
Intervence / Léčba
Detailní popis
Pozadí: Neurodegenerativní onemocnění (NDD) jsou různá skupina poruch, která variabilně ovlivňují jednotlivce, s mnoha jemnými rozdíly a různými rychlostmi napříč jednotlivci a syndromy. Vývoj NDD zahrnuje poznání, chování a motorické domény klinického hodnocení, které vedou k celoživotním funkčním a sociálním poškozením s vysokými ekonomickými a sociálními náklady. Biochemické patofyziologické řidiče se vyskytují daleko dříve, než se objevuje příznaky, což činí identifikaci subjektů s předklinickým onemocněním základem pro včasnou diagnózu, potřebnou pro účinnou terapii.
Klinická definice NDD je v podstatě nedostatečná, ale molekulární signály z mozku mohou vést k identifikaci biomarkeru, který lze pravidelně měřit neinvazivním způsobem. Proto je potřebný biomarker specifický pro nemoc.
Nedávno se objevila možnost identifikace specifických markerů pro NDD ve slinách. Slivy a slinné extracelulerové vesikuly (SEV) jsou vozidla pro molekuly spojené s poškozením neuronů a neuroinflamací. Jejich izolace umožňuje obohacení molekul zapojených do patogenetických mechanismů NDD a zlepšuje jejich kvantifikaci.
Ramanova spektroskopie (RS) je metoda užitečná pro vyčerpávající biochemickou charakterizaci slin a její vezikulární složky, bez postupů barvení a značení, vysoce informativní, rychlé a udržitelné. Rychlým, citlivým a nedestruktivním způsobem RS poskytuje spektrum, které lze použít jako vysoce specifický „otisky prstů“ pro vybraný vzorek (např. Slivy, krev, ev) představující samotný diagnostický biomarker.
Studie RS o slinách již prokázala možnost profilování pacientů s progresivními patologiemi s dobrou přesností a konkrétně rozlišování subjektů trpících NDD, bez dalšího zkoumání schopnosti rozlišovat NDD v rané fázi, ověření, které by monitorovaly jeho postup, ani vyšetřování biomolekulárních moities zapojených do uznávaných moílek.
Ramanova spektroskopie je navržena jako spolehlivá metoda pro rychlou a vyčerpávající biochemickou charakterizaci slinné a vezikulární složky přítomné ve vzorku, aniž by bylo nutné postupy barvení nebo značení.
OBJECTIVES: The objective of this project is the validation of a Raman molecular fingerprint for the considered exerimental groups, leading to the identification of a complex biomarker useful for 1) the early identification, 2) phenotyping and 3) molecular profiling of subjects with NDDs, leading to the prompt identification of tailored therapeutic strategies, including optimal pharmacological and rehabilitation therapies for each subject, with a significant impact on patients' kvalita života a v budoucnu se zvýšenou pravděpodobností zpomalení progrese NDD s optimálními účinnými terapiemi. Na národní úrovni může včasný personalizovaný zásah zkrátit dobu správy pacientů a náklady.
Velikost vzorku: Velikost vzorku byla vypočtena pomocí G (střední velikost efektu F = 0,25, Statistická síla 85%, A = 0,05, pro statistický test ANOVA Omnibus s 5 experimentálními skupinami AD, PD, ATP, PPD, MCI, míra předčasného ukončení studia asi 10%). Minimální počet subjektů, které mají být zapojeny, je 242. Vzhledem k odlišnému výskytu uvažovaných NDD není distribuce mezi skupinami stejná.
Sběr dat: Demografická, klinická a výzkumná data budou pseudonymizována a uložena v databázi RedCap na zakázku. Budou uložena diagnóza NDDS (AD, PD, ATPD, PPD nebo MCI), demografická (věk, pohlaví), klinická anamnéza a komorbidity (kumulativní stupnice hodnocení onemocnění). Salivy budou shromažďovány pomocí optimalizovaného protokolu.
Sběr vzorků: Při náboru (T0), nejméně 60 minut po příjmu potravin a/nebo nápojů, budou sliny shromažďovány pomocí Salivette Trubs (StarStedt®). Po 12 měsících (T12) budou subjekty požádány o druhý vzorek slin. Budou zaznamenány přednalytické parametry, stravovací a kouřový zvyk. Vzorky budou zmrazeny, dokud nebudou použity.
Ukázkové biomolekulární hodnocení: Technologie SIMOA bude použita k kvantifikaci markerů souvisejících s NDD: ASYN pro PD, ATP a PPD, Ap1-42 pro AD a MCI, NFL jako obecné biomarkery neurologického poškození ve všech skupinách.
Izolace a charakterizace EV: Slivy budou použity pro izolaci EV pomocí chromatografie velikosti (SEC) a ultracentrifugací.
Účinná izolace bude ověřena pomocí DOT blot pro proteinové markery, analýza sledování nanočástic (NTA) pro distribuci velikosti a přenosovou elektronovou mikroskopii pro morfologii.
Ramanova analýza: EV spektra odvozená ze slin a slin se získá pomocí mikroskopu Aramis Ramana (Horiba Jobon-Yvon, Francie) vybaveným laserovým světelným zdrojem pracujícím při 785 nm a 532 nm (Carlomagno et al., Frontiers, 2021; Mangolini et al., 2023).
Zpracování dat: Získaná spektra bude korigována a normalizována jednotkovým vektorem, aby homogenizovala datový soubor pomocí labspec6 (tj. Základní linie, normalizace). Multivariační analýza bude použita k vytvoření klasifikačního modelu pro AD, PD, ATPD, PPD a MCI v T0, čímž se získá disperze kanonických proměnných. Přesnost, specifičnost a citlivost slin a SEV RS se vypočítá po křížové validaci z odchodu (LOOCV). Vypočítá se křivka ROC. Data získaná z molekulárního profilování pacientů s NDDS a Ramanových databází budou použity k interpretaci spektrální variace v různých experimentálních skupinách.
K vyhodnocení schopnosti platformy Ramanu bude provedena korelace mezi Ramanovým biomolekulárním a klinickým údajem, aby se pacienty v různých stádiích onemocnění zhodnotily.
Změny v RS otisku prstu mezi T0 a T12 budou zkoumány (longitudinální studie) a korelovány se změnami skóre klinické stupnice.
Typ studie
Zápis (Odhadovaný)
Kontakty a umístění
Studijní kontakt
- Jméno: Alice Gualerzi, PhD
- Telefonní číslo: +390240308533
- E-mail: agualerzi@dongnocchi.it
Studijní záloha kontaktů
- Jméno: Pietro Arcuri, MD
- Telefonní číslo: +390240308833
- E-mail: parcuri@dongnocchi.it
Studijní místa
-
-
-
Firenze, Itálie
- Nábor
- Azienda Ospedaliero Universitaria Careggi Firenze
-
Kontakt:
- Silvia Ramat, MD, PhD
- E-mail: silvia.ramat@unifi.it
-
Vrchní vyšetřovatel:
- Silvia Ramat
-
Milan, Itálie, 20148
- Nábor
- IRCCS S. Maria Nascente, Fondazione Don Carlo Gnocchi ONLUS
-
Dílčí vyšetřovatel:
- Silvia Picciolini, PhD
-
Vrchní vyšetřovatel:
- Alice Gualerzi, PhD
-
Dílčí vyšetřovatel:
- Marzia Bedoni, PhD
-
Kontakt:
- Alice Gualerzi, PhD
- E-mail: agualerzi@dongnocchi.it
-
Vrchní vyšetřovatel:
- Pietro Arcuri, MD
-
Dílčí vyšetřovatel:
- Francesca Lea Saibene, PhD
-
Dílčí vyšetřovatel:
- Luana Forleo
-
Dílčí vyšetřovatel:
- Aurora Mangolini
-
Dílčí vyšetřovatel:
- Anna Salvatore
-
Dílčí vyšetřovatel:
- Angelo Bellinvia
-
Dílčí vyšetřovatel:
- Sarah Feroldi
-
Milano, Itálie
- Nábor
- IRCCS Istituto Neurologico "Carlo Besta"
-
Kontakt:
- Gemma Lombardi
- E-mail: gemma.lombardi@istituto-besta.it
-
Vrchní vyšetřovatel:
- Giuseppe Di Fede
-
Dílčí vyšetřovatel:
- Gemma Lombardi
-
Parma, Itálie
- Nábor
- Centro S. Maria ai Servi, Fondazione Don Carlo Gnocchi Onlus
-
Kontakt:
- Valerio Brambilla, MD
- E-mail: vbrambilla@dongnocchi.it
-
Dílčí vyšetřovatel:
- Beatrice Rizzi, MD
-
Dílčí vyšetřovatel:
- Lorenzo Brambilla, MD
-
Vrchní vyšetřovatel:
- Valerio Brambilla, MD
-
-
FI
-
Florence, FI, Itálie
- Nábor
- IRCCS Don Gnocchi, Fondazione Don Gnocchi
-
Kontakt:
- Francesca Cecchi, MD
- Telefonní číslo: +390557393922
- E-mail: fcecchi@dongnocchi.it
-
Vrchní vyšetřovatel:
- Francesca Cecchi, MD
-
Dílčí vyšetřovatel:
- Cristina Polito
-
Dílčí vyšetřovatel:
- Alessio Faralli
-
-
Kritéria účasti
Kritéria způsobilosti
Věk způsobilý ke studiu
- Dospělý
- Starší dospělý
Přijímá zdravé dobrovolníky
Metoda odběru vzorků
Studijní populace
Popis
Kritéria pro zařazení:
- AD: Standardní kritéria pro demenci v důsledku AD s AD neurochemickou demonstrací.
- PD: kritéria MDS; Modifikované fáze Hoehn & Yahr; Stabilní farmakologická léčba (poslední 4 týdny).
- ATP: Současná konsensuální diagnostická kritéria pro progresivní supranukleární obrnu; Kortikobasální degenerace a více systémová atrofie.
- Prodromic PD: Podle diagnostických kritérií Berg;
- MCI: Podle diagnostických kritérií od Duboise a Alberta.
Kritéria pro vyloučení:
- U všech zvažovaných experimentálních skupin budou vyloučeny subjekty se souběžnými chronickými a / nebo zánětlivými onemocněními ústní dutiny, jiná systémová onemocnění, onkologická nebo infekční onemocnění.
- Pacienti, kteří nejsou schopni poskytnout písemný informovaný souhlas autonomně, budou vyloučeni.
- U pacientů s PD: Parkinsonismus vyvolaný vaskulárním, známým a lékem, jiné známé nebo podezřelé příčiny (metabolický, mozkový nádor atd.) Nebo jakékoli sugestivní rysy ATP; Demence s testem MOCA Správné skóre <15
Studijní plán
Jak je studie koncipována?
Detaily designu
Kohorty a intervence
Skupina / kohorta |
Intervence / Léčba |
|---|---|
|
Alzheimerova choroba (AD)
70 subjektů.
|
1 ml slin bude shromažďováno s výtěry sliny.
Subjekty podstoupí hodnocení a vzorkování slin v době zápisu (T0) a jeden rok po (T12).
|
|
Parkinsonova choroba (PD)
70 subjektů
|
1 ml slin bude shromažďováno s výtěry sliny.
Subjekty podstoupí hodnocení a vzorkování slin v době zápisu (T0) a jeden rok po (T12).
|
|
Atypický parkinsonismus (ATPD)
42 Subjektů, které porozumí lidem diagnostikované s více systémovou atrofií (MSA), progresivní sopranukleární obrnou (PSP) a kortikobasální degenerací (CBD).
|
1 ml slin bude shromažďováno s výtěry sliny.
Subjekty podstoupí hodnocení a vzorkování slin v době zápisu (T0) a jeden rok po (T12).
|
|
Prodromální fáze Parkinsonovy choroby
30 předmětů
|
1 ml slin bude shromažďováno s výtěry sliny.
Subjekty podstoupí hodnocení a vzorkování slin v době zápisu (T0) a jeden rok po (T12).
|
|
Mírné kognitivní poškození (MCI)
30 předmětů
|
1 ml slin bude shromažďováno s výtěry sliny.
Subjekty podstoupí hodnocení a vzorkování slin v době zápisu (T0) a jeden rok po (T12).
|
Co je měření studie?
Primární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Slivary Raman Fingerprint of AD, PD, ATPD, Prodromální PD a MCI
Časové okno: Od zápisu po sledovací hodnocení a druhou sběr vzorků po 12 měsících
|
Rozdíly v Ramanových spektrech slin u pacientů s AD, PD, ATPD, Prodromální PD a MCI ve spektrálním rozsahu 400-1800 cm-1
|
Od zápisu po sledovací hodnocení a druhou sběr vzorků po 12 měsících
|
Sekundární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Raman Fingerprint of Slivary EV z AD, PD, ATPD, Prodromal PD a MCI
Časové okno: Od zápisu po sledovací hodnocení a druhou sběr vzorků po 12 měsících
|
Rozdíly v Ramanských spektrech EV odvozených od slin u pacientů s AD, PD, ATPD, Prodromální PD a MCI ve spektrálních rozsazích 600-1800 cm-1 a 2600-3200 cm-1
|
Od zápisu po sledovací hodnocení a druhou sběr vzorků po 12 měsících
|
|
Biomarkery NDD slin
Časové okno: Od zápisu po sledování hodnocení a druhého sběru vzorků ve 12 měsících
|
Kvantifikace markerů souvisejících s NDD pomocí technologie SIMOA:
|
Od zápisu po sledování hodnocení a druhého sběru vzorků ve 12 měsících
|
|
Slivary Raman Fingerprint u pacientů po 1 roce
Časové okno: Od zápisu po sledování a druhou sběr vzorků ve 12 měsících
|
Změny v Ramanově spektru slin mezi T0 (zápis) a T12 (1 rok po zápisu) spojené s progresí onemocnění.
|
Od zápisu po sledování a druhou sběr vzorků ve 12 měsících
|
|
Slivary EV Raman Fingerprint u pacientů po 1 roce
Časové okno: Od zápisu po sledování a druhou sběr vzorků ve 12 měsících
|
Změny v Ramanově spektru slin odvozených EV mezi T0 (zápis) a T12 (1 rok po zápisu) spojené s progresí onemocnění.
|
Od zápisu po sledování a druhou sběr vzorků ve 12 měsících
|
|
Korelace Ramanových dat s klinickým hodnocením
Časové okno: Od zápisu po sledování ve 12 měsících
|
Korelace mezi spektrálními údaji o slinách a slinách odvozených EV při T0 a T12 a klinickém hodnocení (kumulativní hodnocení onemocnění/CIR; modifikovaný barthel index/MBI; Montreal Cognitive Assessment/MOCA; test testů; test na testování a b/tmt a b; test na rey; Inventář/NPI;
|
Od zápisu po sledování ve 12 měsících
|
|
Korelace Ramanových dat s biomolekulárními daty
Časové okno: Od zápisu po sledování ve 12 měsících
|
Korelace mezi spektrálními daty slin a slin odvozených EV v T0 a T12 a biomolekulární kvantifikací I) ASYN pro PD, ATP a PPD; ii) Ap1-42 pro AD a MCI; iii) NFL pro všechny předměty
|
Od zápisu po sledování ve 12 měsících
|
Spolupracovníci a vyšetřovatelé
Spolupracovníci
Vyšetřovatelé
- Vrchní vyšetřovatel: Alice Gualerzi, PhD, IRCCS Fondazione Don Gnocchi
Publikace a užitečné odkazy
Obecné publikace
- Carlomagno C, Bertazioli D, Gualerzi A, Picciolini S, Andrico M, Roda F, Meloni M, Banfi PI, Verde F, Ticozzi N, Silani V, Messina E, Bedoni M. Identification of the Raman Salivary Fingerprint of Parkinson's Disease Through the Spectroscopic- Computational Combinatory Approach. Front Neurosci. 2021 Oct 26;15:704963. doi: 10.3389/fnins.2021.704963. eCollection 2021.
- Mangolini V, Gualerzi A, Picciolini S, Roda F, Del Prete A, Forleo L, Rossetto RA, Bedoni M. Biochemical Characterization of Human Salivary Extracellular Vesicles as a Valuable Source of Biomarkers. Biology (Basel). 2023 Jan 31;12(2):227. doi: 10.3390/biology12020227.
Termíny studijních záznamů
Hlavní termíny studia
Začátek studia (Aktuální)
Primární dokončení (Odhadovaný)
Dokončení studie (Odhadovaný)
Termíny zápisu do studia
První předloženo
První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality
První zveřejněno (Aktuální)
Aktualizace studijních záznamů
Poslední zveřejněná aktualizace (Aktuální)
Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality
Naposledy ověřeno
Více informací
Termíny související s touto studií
Klíčová slova
Další relevantní podmínky MeSH
- Synukleinopatie
- Onemocnění mozku
- Onemocnění centrálního nervového systému
- Nemoci nervového systému
- Duševní poruchy
- Neurokognitivní poruchy
- Poruchy kognice
- Demence
- Tauopatie
- Poruchy pohybu
- Bazální gangliové choroby
- Kognitivní dysfunkce
- Alzheimerova nemoc
- Parkinsonova choroba
- Neurodegenerativní onemocnění
- Parkinsonské poruchy
Další identifikační čísla studie
- FDG_MINERVA
- CET 97/24 (Jiný identifikátor: CET Lombardia 4)
- FDG 17_17/09/2024 (Jiný identifikátor: IRCCS Fondazione Don Carlo Gnocchi)
Plán pro data jednotlivých účastníků (IPD)
Plánujete sdílet data jednotlivých účastníků (IPD)?
Popis plánu IPD
Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty
Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA
Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA
produkt vyrobený a vyvážený z USA
Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .