Saliva y vesículas extracelulares para enfermedades neurodegenerativas (MINERVA)
Método novedoso para el diagnóstico de enfermedades neurodegenerativas basadas en el perfil bioquímico de saliva
Descripción general del estudio
Estado
Condiciones
Intervención / Tratamiento
Descripción detallada
Antecedentes: las enfermedades neurodegenerativas (NDDS) son un grupo diverso de trastornos que afectan de forma variable a los individuos, con muchas distinciones sutiles y diferentes velocidades entre individuos y síndromes. La evolución de los NDD implica la cognición, el comportamiento y los dominios motores de la evaluación clínica que resultan en impedimentos funcionales y sociales de por vida con altos costos económicos y sociales. Los impulsores fisiopatológicos bioquímicos ocurren mucho antes que los síntomas que aparecen en la identificación de sujetos con enfermedad preclínica la base para el diagnóstico temprano, necesaria para una terapia efectiva.
La definición clínica de NDDS es básicamente insuficiente, pero las señales moleculares del cerebro pueden conducir a la identificación de un biomarcador que se puede medir periódicamente de una manera no invasiva. Por lo tanto, se necesita un biomarcador específico de la enfermedad.
Recientemente ha surgido la posibilidad de identificar marcadores específicos para NDDS dentro de la saliva. Las vesículas extraceluler salivales y salivales (SEV) son vehículos para moléculas asociadas con daño neuronal y neuroinflamación. Su aislamiento permite un enriquecimiento de las moléculas involucradas en los mecanismos patogenéticos de NDDS, mejorando su cuantificación.
La espectroscopía Raman (RS) es un método útil para la caracterización bioquímica exhaustiva de la saliva y su componente vesicular, sin procedimientos de tinción y etiquetado, altamente informativo, rápido y sostenible. De una manera rápida, sensible y no destructiva, RS proporciona un espectro que puede usarse como una "huella digital" altamente específica para la muestra seleccionada (p. Ej. Saliva, sangre, EV) que representa el biomarcador de diagnóstico en sí.
El estudio RS de la saliva ya ha demostrado la posibilidad de perfilar pacientes con patologías progresivas con buena precisión y, específicamente, de distinguir a los sujetos que sufren de NDDS, sin una investigación adicional de la capacidad de distinguir las NDD en una etapa temprana en una etapa temprana.
La espectroscopía Raman se propone como un método confiable para la caracterización bioquímica rápida y exhaustiva del componente salival y vesicular presente en la muestra, sin la necesidad de manchas o procedimientos de etiquetado.
Objetivos: El objetivo de este proyecto es la validación de una huella digital molecular Raman para los grupos exerimentales considerados, lo que lleva a la identificación de un biomarcador complejo útil para 1) la identificación temprana, 2) fenotipado y 3) perfiles moleculares de sujetos con NDDS, lo que lleva a la identificación de inmediato de las estrategias terapéuticas superiores, con las que las células óptimas y las rehabilitación de las rehabilitación significativas, con cada sujeto, con los que tienen un impacto significativo, con cada sujeto, con un impacto significativo, con cada sujeto, con cada sujeto, con cada sujeto, con cada sujeto, con cada sujeto, con cada sujeto, con cada sujeto, con cada sujeto, con cada sujeto, con cada sujeto, con cada sujeto, con cada sujeto, con cada sujeto, con cada sujeto, con un sujeto que tiene un impacto. Calidad de vida y, en el futuro, sobre la mayor probabilidad de ralentizar la progresión de los NDD con terapias efectivas óptimas. A nivel nacional, la intervención personalizada temprana puede reducir los tiempos y costos de manejo del paciente.
Tamaño de la muestra: el tamaño de la muestra se calculó con potencia G (tamaño de efecto medio f = 0.25, Potencia estadística 85%, a = 0.05, para la prueba estadística ANOVA Omnibus con 5 grupos experimentales AD, PD, ATP, PPD, MCI, una tasa de abandono de aproximadamente 10%). El número mínimo de sujetos a participar es 242. Teniendo en cuenta la diferente incidencia de los NDD considerados, la distribución no es igual entre los grupos.
Recopilación de datos: los datos demográficos, clínicos y de investigación serán seudonimizados y almacenados en una base de datos REDCAP personalizada. Diagnóstico de NDDS (AD, PD, ATPD, PPD o MCI), demográficos (edad, sexo), historia clínica y comorbilidades (escala de calificación de enfermedades acumulativas) se almacenarán. La saliva se recopilará utilizando un protocolo optimizado.
Colección de muestras: en el reclutamiento (T0), al menos 60 minutos después de la ingesta de alimentos y/o bebidas, la saliva se recolectará con tubos Salivette (Starstedt®). Después de 12 meses (T12), se les pedirá a los sujetos una segunda muestra de saliva. Se registrarán los parámetros preanalíticos, el hábito de la dieta y el tabaquismo. Las muestras se congelarán hasta que se usen.
Evaluación biomolecular de muestra: la tecnología SIMOA se utilizará para cuantificar los marcadores relacionados con NDDS: Asyn para PD, ATP y PPD, Aβ1-42 para AD y MCI, NFL como biomarcadores generales de daño neurológico en todos los grupos.
Aislamiento y caracterización de EV: la saliva se utilizará para el aislamiento de los EV mediante cromatografía de exclusión de tamaño (SEC) y por ultracentrifugación.
El aislamiento efectivo se verificará con transferencia DOT para marcadores de proteínas, análisis de seguimiento de nanopartículas (NTA) para la distribución del tamaño y la microscopía electrónica de transmisión para la morfología.
Análisis de Raman: los espectros EV derivados de saliva y saliva se adquirirán utilizando un microscopio Aramis Raman (Horiba Jobin-Yvon, Francia) equipado con una fuente de luz láser que funciona en 785 nm y 532 nm (Carlomagno et al., Frontiers, 2021; Mangolini et al., Biología, 2023).
Procesamiento de datos: los espectros adquiridos se corregirán y normalizarán por unidad de vector, para homogeneizar el conjunto de datos utilizando el LABSPEC6 (es decir, línea de base, normalización). El análisis multivariado se utilizará para crear un modelo de clasificación para AD, PD, ATPD, PPD y MCI en T0, obteniendo la dispersión de las variables canónicas. La precisión, la especificidad y la sensibilidad de la saliva y el SEV RS se calcularán después de la validación cruzada (LOOCV). Se calculará la curva ROC. Los datos obtenidos del perfil molecular de pacientes con NDDS y las bases de datos Raman se utilizarán para interpretar la variación espectral en los diferentes grupos experimentales.
La correlación entre los datos biomoleculares y clínicos Raman se realizará para evaluar la capacidad de la plataforma Raman para estratificar a los pacientes en diferentes etapas de la enfermedad.
Los cambios en la huella digital RS entre T0 y T12 se investigarán (estudio longitudinal) y se correlacionarán con los cambios en las puntuaciones de la escala clínica.
Tipo de estudio
Inscripción (Estimado)
Contactos y Ubicaciones
Estudio Contacto
- Nombre: Alice Gualerzi, PhD
- Número de teléfono: +390240308533
- Correo electrónico: agualerzi@dongnocchi.it
Copia de seguridad de contactos de estudio
- Nombre: Pietro Arcuri, MD
- Número de teléfono: +390240308833
- Correo electrónico: parcuri@dongnocchi.it
Ubicaciones de estudio
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Firenze, Italia
- Reclutamiento
- Azienda Ospedaliero Universitaria Careggi Firenze
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Contacto:
- Silvia Ramat, MD, PhD
- Correo electrónico: silvia.ramat@unifi.it
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Investigador principal:
- Silvia Ramat
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Milan, Italia, 20148
- Reclutamiento
- IRCCS S. Maria Nascente, Fondazione Don Carlo Gnocchi ONLUS
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Sub-Investigador:
- Silvia Picciolini, PhD
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Investigador principal:
- Alice Gualerzi, PhD
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Sub-Investigador:
- Marzia Bedoni, PhD
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Contacto:
- Alice Gualerzi, PhD
- Correo electrónico: agualerzi@dongnocchi.it
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Investigador principal:
- Pietro Arcuri, MD
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Sub-Investigador:
- Francesca Lea Saibene, PhD
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Sub-Investigador:
- Luana Forleo
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Sub-Investigador:
- Aurora Mangolini
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Sub-Investigador:
- Anna Salvatore
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Sub-Investigador:
- Angelo Bellinvia
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Sub-Investigador:
- Sarah Feroldi
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Milano, Italia
- Reclutamiento
- IRCCS Istituto Neurologico "Carlo Besta"
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Contacto:
- Gemma Lombardi
- Correo electrónico: gemma.lombardi@istituto-besta.it
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Investigador principal:
- Giuseppe Di Fede
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Sub-Investigador:
- Gemma Lombardi
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Parma, Italia
- Reclutamiento
- Centro S. Maria ai Servi, Fondazione Don Carlo Gnocchi Onlus
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Contacto:
- Valerio Brambilla, MD
- Correo electrónico: vbrambilla@dongnocchi.it
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Sub-Investigador:
- Beatrice Rizzi, MD
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Sub-Investigador:
- Lorenzo Brambilla, MD
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Investigador principal:
- Valerio Brambilla, MD
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FI
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Florence, FI, Italia
- Reclutamiento
- IRCCS Don Gnocchi, Fondazione Don Gnocchi
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Contacto:
- Francesca Cecchi, MD
- Número de teléfono: +390557393922
- Correo electrónico: fcecchi@dongnocchi.it
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Investigador principal:
- Francesca Cecchi, MD
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Sub-Investigador:
- Cristina Polito
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Sub-Investigador:
- Alessio Faralli
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Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
- Adulto
- Adulto Mayor
Acepta Voluntarios Saludables
Método de muestreo
Población de estudio
Descripción
Criterios de inclusión:
- AD: Criterios estándar para la demencia debido a AD con demostración neuroquímica AD.
- PD: criterios de MDS; Etapas modificadas de Hoehn y Yahr; Tratamiento farmacológico estable (últimas 4 semanas).
- ATP: Criterios de diagnóstico de consenso actuales para parálisis supranuclear progresiva; degeneración corticobasal y atrofia del sistema múltiple.
- PD prodrómica: según los criterios de diagnóstico de Berg;
- MCI: Según los criterios de diagnóstico de DuBois y Albert.
Criterios de exclusión:
- Para todos los grupos experimentales considerados, los sujetos con enfermedades crónicas y / o inflamatorias concomitantes de la cavidad oral, otras enfermedades sistémicas, enfermedades oncológicas o infecciosas.
- Los pacientes que no puedan proporcionar consentimiento informado por escrito de forma autónoma serán excluidos.
- Para pacientes con EP: parkinsonismo vascular, familiar e inducido por fármacos, otras causas conocidas o sospechosas (metabólico, tumor cerebral, etc.) o cualquier característica sugerente de ATP; demencia con prueba de mOCA puntaje correcto <15
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
Cohortes e Intervenciones
Grupo / Cohorte |
Intervención / Tratamiento |
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Enfermedad de Alzheimer (AD)
70 sujetos.
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Se recopilarán 1 ml de saliva con hisopos de Salivette.
Los sujetos se someterán a evaluaciones y muestreo de saliva en el tiempo de inscripción (T0) y un año después (T12).
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Enfermedad de Parkinson (PD)
70 sujetos
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Se recopilarán 1 ml de saliva con hisopos de Salivette.
Los sujetos se someterán a evaluaciones y muestreo de saliva en el tiempo de inscripción (T0) y un año después (T12).
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Parkinsonismo atípico (ATPD)
42 sujetos que comprenden a las personas diagnosticadas con atrofia del sistema múltiple (MSA), parálisis sopranuclear progresiva (PSP) y degeneración corticobasal (CBD).
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Se recopilarán 1 ml de saliva con hisopos de Salivette.
Los sujetos se someterán a evaluaciones y muestreo de saliva en el tiempo de inscripción (T0) y un año después (T12).
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Fase prodrómica de la enfermedad de Parkinson
30 sujetos
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Se recopilarán 1 ml de saliva con hisopos de Salivette.
Los sujetos se someterán a evaluaciones y muestreo de saliva en el tiempo de inscripción (T0) y un año después (T12).
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Deterioro cognitivo leve (MCI)
30 sujetos
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Se recopilarán 1 ml de saliva con hisopos de Salivette.
Los sujetos se someterán a evaluaciones y muestreo de saliva en el tiempo de inscripción (T0) y un año después (T12).
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¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Huella digital de Raman salival de AD, PD, ATPD, PD prodromal y MCI
Periodo de tiempo: Desde la inscripción hasta la evaluación de seguimiento y la segunda colección de muestras a los 12 meses
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Diferencias en los espectros Raman de la saliva de pacientes con EA, PD, ATPD, PD prodromal y MCI en el rango espectral 400-1800 cm-1
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Desde la inscripción hasta la evaluación de seguimiento y la segunda colección de muestras a los 12 meses
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Medidas de resultado secundarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
|---|---|---|
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Raman huella digital de EV salival de AD, PD, ATPD, PD PDROMES y MCI
Periodo de tiempo: Desde la inscripción hasta la evaluación de seguimiento y la segunda colección de muestras a los 12 meses
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Diferencias en los espectros Raman de los EV derivados de la saliva de pacientes con EA, PD, ATPD, PD prodrómica y MCI en los rangos espectrales 600-1800 cm-1 y 2600-3200 cm-1
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Desde la inscripción hasta la evaluación de seguimiento y la segunda colección de muestras a los 12 meses
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Biomarcadores salivales NDD
Periodo de tiempo: Desde la inscripción hasta la evaluación de seguimiento y la segunda colección de muestras a los 12 meses
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Cuantificación de marcadores relacionados con NDDS por tecnología Simoa:
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Desde la inscripción hasta la evaluación de seguimiento y la segunda colección de muestras a los 12 meses
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Huella digital de pacientes con raman salival después de 1 año
Periodo de tiempo: Desde la inscripción hasta el seguimiento y la segunda colección de muestras a los 12 meses
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Los cambios en los espectros Raman de la saliva entre T0 (inscripción) y T12 (1 año después de la inscripción) asociados a la progresión de la enfermedad.
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Desde la inscripción hasta el seguimiento y la segunda colección de muestras a los 12 meses
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Huella digital de pacientes con raman salival después de 1 año
Periodo de tiempo: Desde la inscripción hasta el seguimiento y la segunda colección de muestras a los 12 meses
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Los cambios en los espectros Raman de la saliva derivados de los EV entre T0 (inscripción) y T12 (1 año después de la inscripción) asociados a la progresión de la enfermedad.
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Desde la inscripción hasta el seguimiento y la segunda colección de muestras a los 12 meses
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Correlación de datos de Raman con evaluación clínica
Periodo de tiempo: De la inscripción hasta el seguimiento a los 12 meses
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Correlación entre los datos espectrales de la saliva y los EV derivados de la saliva en T0 y T12 y la evaluación clínica (Escala de clasificación de enfermedades acumulativas/CIR; índice Barthel modificado/MBI; Montreal Cognitive Evaltment/MOCA; Test; Test; Test Test; Inventario neuropsiquiátrico/NPI;
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De la inscripción hasta el seguimiento a los 12 meses
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Correlación de datos de Raman con datos biomoleculares
Periodo de tiempo: De la inscripción hasta el seguimiento a los 12 meses
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Correlación entre los datos espectrales de la saliva y los EV derivados de la saliva en T0 y T12 y cuantificación biomolecular de i) asyn para PD, ATP y PPD; ii) Aβ1-42 para AD y MCI; iii) NFL para todos los sujetos
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De la inscripción hasta el seguimiento a los 12 meses
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Colaboradores
Investigadores
- Investigador principal: Alice Gualerzi, PhD, IRCCS Fondazione Don Gnocchi
Publicaciones y enlaces útiles
Publicaciones Generales
- Carlomagno C, Bertazioli D, Gualerzi A, Picciolini S, Andrico M, Roda F, Meloni M, Banfi PI, Verde F, Ticozzi N, Silani V, Messina E, Bedoni M. Identification of the Raman Salivary Fingerprint of Parkinson's Disease Through the Spectroscopic- Computational Combinatory Approach. Front Neurosci. 2021 Oct 26;15:704963. doi: 10.3389/fnins.2021.704963. eCollection 2021.
- Mangolini V, Gualerzi A, Picciolini S, Roda F, Del Prete A, Forleo L, Rossetto RA, Bedoni M. Biochemical Characterization of Human Salivary Extracellular Vesicles as a Valuable Source of Biomarkers. Biology (Basel). 2023 Jan 31;12(2):227. doi: 10.3390/biology12020227.
Fechas de registro del estudio
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio (Actual)
Finalización primaria (Estimado)
Finalización del estudio (Estimado)
Fechas de registro del estudio
Enviado por primera vez
Primero enviado que cumplió con los criterios de control de calidad
Publicado por primera vez (Actual)
Actualizaciones de registros de estudio
Última actualización publicada (Actual)
Última actualización enviada que cumplió con los criterios de control de calidad
Última verificación
Más información
Términos relacionados con este estudio
Palabras clave
Términos MeSH relevantes adicionales
- Sinucleinopatías
- Enfermedades Cerebrales
- Enfermedades del Sistema Nervioso Central
- Enfermedades del Sistema Nervioso
- Desordenes mentales
- Trastornos neurocognitivos
- Trastornos cognitivos
- Demencia
- Tauopatías
- Trastornos del movimiento
- Enfermedades de los ganglios basales
- Disfunción congnitiva
- Enfermedad de Alzheimer
- Enfermedad de Parkinson
- Enfermedades neurodegenerativas
- Trastornos Parkinsonianos
Otros números de identificación del estudio
- FDG_MINERVA
- CET 97/24 (Otro identificador: CET Lombardia 4)
- FDG 17_17/09/2024 (Otro identificador: IRCCS Fondazione Don Carlo Gnocchi)
Plan de datos de participantes individuales (IPD)
¿Planea compartir datos de participantes individuales (IPD)?
Descripción del plan IPD
Información sobre medicamentos y dispositivos, documentos del estudio
Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.
Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.
producto fabricado y exportado desde los EE. UU.
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