Vescicole saliva e extracellulari per malattie neurodegenerative (MINERVA)
Nuovo metodo per la diagnosi di malattie neurodegenerative basate sulla profilazione biochimica della saliva
Panoramica dello studio
Stato
Condizioni
Intervento / Trattamento
Descrizione dettagliata
Contesto: le malattie neurodegenerative (NDD) sono un gruppo varie di disturbi che influenzano variabilmente gli individui, con molte distinzioni sottili e velocità diverse tra individui e sindromi. L'evoluzione degli NDD coinvolge cognizione, comportamento e domini motori della valutazione clinica che si traducono in disabilità funzionali e sociali per tutta la vita con alti costi economici e sociali. I driver patofisiologici biochimici si verificano molto prima dell'aspetto dei sintomi che rende l'identificazione di soggetti con malattia preclinica la base per la diagnosi precoce, necessaria per una terapia efficace.
La definizione clinica di NDDS è sostanzialmente insufficiente, ma i segnali molecolari del cervello possono portare all'identificazione di un biomarcatore che può essere misurato periodicamente in modo non invasivo. Pertanto, è necessario un biomarcatore specifico per la malattia.
È emersa la possibilità di identificare marcatori specifici per gli NDD all'interno di Saliva. Le vescicole extracellulari di saliva e salivari (SEV) sono veicoli per molecole associate al danno neuronale e alla neuroinfiammazione. Il loro isolamento consente un arricchimento delle molecole coinvolte nei meccanismi patogenetici degli NDD, migliorando la loro quantificazione.
La spettroscopia Raman (RS) è un metodo utile per la caratterizzazione biochimica esaustiva della saliva e la sua componente vescicolare, senza procedure di colorazione ed etichettatura, altamente istruttiva, rapida e sostenibile. In modo rapido, sensibile e non distruttivo, RS fornisce uno spettro che può essere usato come "impronta digitale" altamente specifica per il campione selezionato (ad es. Saliva, sangue, ev) che rappresenta il biomarcatore diagnostico stesso.
Lo studio RS sulla saliva ha già dimostrato la possibilità di profilare i pazienti con patologie progressive con buona accuratezza e, in particolare, di distinguere i soggetti che soffrono di NDDS, senza ulteriori indagini sulla capacità di distinguere gli NDD in una fase iniziale, la verifica della possibilità di monitorare la sua progressione, né le indagini sulle moieties coinvolte nelle differenze osservate.
La spettroscopia Raman è proposta come metodo affidabile per la caratterizzazione biochimica rapida ed esaustiva della componente salivare e vescicolare presente nel campione, senza la necessità di procedure di colorazione o etichettatura.
Obiettivi: l'obiettivo di questo progetto è la convalida di un'impronta molecolare Raman per i gruppi eserimentali considerati, che portano all'identificazione di un biomarcatore complesso utile per 1) l'identificazione precoce, 2) fenotipizzazione e 3) profilazione molecolare di soggetti con NDDS, che portano a un impatto significativo su un impatto significativo su un impatto significativo su un impatto significativo su un impatto significativo su un impatto significativo su un impatto significativo su una vita significativa terapie di terapia significativa, con un impatto significativo sulla qualità della terapia di qualità " e, in futuro, sulla maggiore probabilità di rallentare la progressione degli NDD con terapie efficaci ottimali. A livello nazionale, l'intervento personalizzato precoce può ridurre i tempi e i costi di gestione dei pazienti.
Dimensione del campione: la dimensione del campione è stata calcolata con potenza G (dimensione dell'effetto medio F = 0,25, Potenza statistica 85%, A = 0,05, per il test statistico Omnibus ANOVA con 5 gruppi sperimentali AD, PD, ATP, PPD, MCI, tasso di abbandono di circa il 10%). Il numero minimo di soggetti da coinvolgere è 242. Considerando la diversa incidenza degli NDD considerati, la distribuzione non è uguale tra i gruppi.
Raccolta di dati: i dati demografici, clinici e di ricerca saranno pseudonimizzati e archiviati in un database REDCAP su misura. Verranno archiviati la diagnosi di NDDS (AD, PD, ATPD, PPD o MCI), i dati demografici (età, sesso), storia clinica e comorbidità (scala di valutazione della malattia cumulativa). La saliva verrà raccolta utilizzando un protocollo ottimizzato.
Collezione campione: al reclutamento (T0), almeno 60 minuti dopo l'assunzione di cibo e/o bevande, la saliva verrà raccolta utilizzando tubi di salivette (Starstedt®). Dopo 12 mesi (T12), ai soggetti verrà chiesto un secondo campione di saliva. Verranno registrati parametri pre-analitici, abitudine dietetica e fumo. I campioni verranno congelati fino a quando non vengono utilizzati.
Valutazione biomolecolare del campione: la tecnologia SIMOA verrà utilizzata per quantificare i marcatori correlati degli NDD: Asyn per PD, ATP e PPD, Aβ1-42 per AD e MCI, NFL come biomarcatori generali di danno neurologico in tutti i gruppi.
EV Isolamento e caratterizzazione: la saliva verrà utilizzata per l'isolamento dei veicoli elettrici mediante cromatografia di esclusione delle dimensioni (SEC) e mediante ultracentrifugazione.
Un isolamento efficace verrà verificato con DOT BLOT per marcatori proteici, analisi di tracciamento delle nanoparticelle (NTA) per la distribuzione delle dimensioni e la microscopia elettronica a trasmissione per la morfologia.
Analisi Raman: gli spettri EV derivati da saliva e saliva saranno acquisiti usando un microscopio Aramis Raman (Horiba Jobin-Yvon, Francia) equipaggiata con una sorgente di luce laser che opera a 785 nm e 532 nm (Carlomagno et al., Frontiers, 2021; Mangolini et al., Biologia, 2023).
Elaborazione dei dati: gli spettri acquisiti saranno corretti e normalizzati al basale dal vettore unitario, per omogeneizzare il set di dati utilizzando labspec6 (ovvero basale, normalizzazione). L'analisi multivariata verrà utilizzata per creare un modello di classificazione per AD, PD, ATPD, PPD e MCI a T0, ottenendo la dispersione delle variabili canoniche. L'accuratezza, la specificità e la sensibilità della saliva e dei sev RS saranno calcolati dopo il congedo fuori convalida incrociata (LOOCV). La curva ROC verrà calcolata. I dati ottenuti dalla profilazione molecolare dei pazienti NDDS e i database Raman saranno utilizzati per interpretare la variazione spettrale nei diversi gruppi sperimentali.
La correlazione tra i dati biomolecolari e clinici Raman verrà eseguita per valutare la capacità della piattaforma Raman di stratificare i pazienti in diverse fasi della malattia.
I cambiamenti nell'impronta digitale RS tra T0 e T12 saranno studiati (studio longitudinale) e correlati con i cambiamenti nei punteggi della scala clinica.
Tipo di studio
Iscrizione (Stimato)
Contatti e Sedi
Contatto studio
- Nome: Alice Gualerzi, PhD
- Numero di telefono: +390240308533
- Email: agualerzi@dongnocchi.it
Backup dei contatti dello studio
- Nome: Pietro Arcuri, MD
- Numero di telefono: +390240308833
- Email: parcuri@dongnocchi.it
Luoghi di studio
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Firenze, Italia
- Reclutamento
- Azienda Ospedaliero Universitaria Careggi Firenze
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Contatto:
- Silvia Ramat, MD, PhD
- Email: silvia.ramat@unifi.it
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Investigatore principale:
- Silvia Ramat
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Milan, Italia, 20148
- Reclutamento
- IRCCS S. Maria Nascente, Fondazione Don Carlo Gnocchi ONLUS
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Sub-investigatore:
- Silvia Picciolini, PhD
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Investigatore principale:
- Alice Gualerzi, PhD
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Sub-investigatore:
- Marzia Bedoni, PhD
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Contatto:
- Alice Gualerzi, PhD
- Email: agualerzi@dongnocchi.it
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Investigatore principale:
- Pietro Arcuri, MD
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Sub-investigatore:
- Francesca Lea Saibene, PhD
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Sub-investigatore:
- Luana Forleo
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Sub-investigatore:
- Aurora Mangolini
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Sub-investigatore:
- Anna Salvatore
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Sub-investigatore:
- Angelo Bellinvia
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Sub-investigatore:
- Sarah Feroldi
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Milano, Italia
- Reclutamento
- IRCCS Istituto Neurologico "Carlo Besta"
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Contatto:
- Gemma Lombardi
- Email: gemma.lombardi@istituto-besta.it
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Investigatore principale:
- Giuseppe Di Fede
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Sub-investigatore:
- Gemma Lombardi
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Parma, Italia
- Reclutamento
- Centro S. Maria ai Servi, Fondazione Don Carlo Gnocchi Onlus
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Contatto:
- Valerio Brambilla, MD
- Email: vbrambilla@dongnocchi.it
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Sub-investigatore:
- Beatrice Rizzi, MD
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Sub-investigatore:
- Lorenzo Brambilla, MD
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Investigatore principale:
- Valerio Brambilla, MD
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FI
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Florence, FI, Italia
- Reclutamento
- IRCCS Don Gnocchi, Fondazione Don Gnocchi
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Contatto:
- Francesca Cecchi, MD
- Numero di telefono: +390557393922
- Email: fcecchi@dongnocchi.it
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Investigatore principale:
- Francesca Cecchi, MD
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Sub-investigatore:
- Cristina Polito
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Sub-investigatore:
- Alessio Faralli
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Criteri di partecipazione
Criteri di ammissibilità
Età idonea allo studio
- Adulto
- Adulto più anziano
Accetta volontari sani
Metodo di campionamento
Popolazione di studio
Descrizione
Criteri di inclusione:
- AD: Criteri standard per la demenza dovuta all'AD con dimostrazione neurochimica AD.
- PD: criteri MDS; Stagini Hoehn e Yahr modificati; Trattamento farmacologico stabile (ultime 4 settimane).
- ATP: attuali criteri diagnostici di consenso per la paralisi supranucleare progressiva; Degenerazione corticobasale e atrofia del sistema multiplo.
- PD prodromico: secondo i criteri diagnostici di Berg;
- MCI: Secondo i criteri diagnostici di Dubois e Albert.
Criteri di esclusione:
- Per tutti i gruppi sperimentali considerati, saranno esclusi soggetti con concomitanti malattie croniche e / o infiammatorie della cavità orale, altre malattie sistemiche, malattie oncologiche o infettive.
- I pazienti non in grado di fornire il consenso informato scritto autonomamente saranno esclusi.
- Per i pazienti con PD: parkinsonismo vascolare, familiare e indotto da farmaci, altre cause conosciute o sospette (tumore metabolico, cerebrale ecc.) O qualsiasi caratteristica suggestiva dell'ATP; DEMENZIA CON TEST MOCA punteggio corretto <15
Piano di studio
Come è strutturato lo studio?
Dettagli di progettazione
Coorti e interventi
Gruppo / Coorte |
Intervento / Trattamento |
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La malattia di Alzheimer (AD)
70 soggetti.
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1 ml di saliva verrà raccolto con tamponi della salivetta.
I soggetti subiranno valutazioni e campionamento della saliva al momento dell'iscrizione (T0) e un anno dopo (T12).
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Malattia di Parkinson (PD)
70 soggetti
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1 ml di saliva verrà raccolto con tamponi della salivetta.
I soggetti subiranno valutazioni e campionamento della saliva al momento dell'iscrizione (T0) e un anno dopo (T12).
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Parkinsonism atipico (ATPD)
42 soggetti che comprendono le persone con diagnosi di atrofia del sistema multipla (MSA), paralisi sopranucleare progressiva (PSP) e degenerazione corticobasale (CBD).
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1 ml di saliva verrà raccolto con tamponi della salivetta.
I soggetti subiranno valutazioni e campionamento della saliva al momento dell'iscrizione (T0) e un anno dopo (T12).
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Fase prodromica della malattia di Parkinson
30 soggetti
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1 ml di saliva verrà raccolto con tamponi della salivetta.
I soggetti subiranno valutazioni e campionamento della saliva al momento dell'iscrizione (T0) e un anno dopo (T12).
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Lieve compromissione cognitiva (MCI)
30 soggetti
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1 ml di saliva verrà raccolto con tamponi della salivetta.
I soggetti subiranno valutazioni e campionamento della saliva al momento dell'iscrizione (T0) e un anno dopo (T12).
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Cosa sta misurando lo studio?
Misure di risultato primarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
|---|---|---|
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Impronta salivario Raman di AD, PD, ATPD, Prodromal PD e MCI
Lasso di tempo: Dall'iscrizione alla valutazione di follow -up e alla seconda raccolta del campione a 12 mesi
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Differenze negli spettri Raman della saliva di pazienti con AD, PD, ATPD, PD prodromico e MCI nell'intervallo spettrale 400-1800 cm-1
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Dall'iscrizione alla valutazione di follow -up e alla seconda raccolta del campione a 12 mesi
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Misure di risultato secondarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
|---|---|---|
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Raman Fingerprint of Salivary EV di AD, PD, ATPD, Prodromal PD e MCI
Lasso di tempo: Dall'iscrizione alla valutazione di follow -up e alla seconda raccolta del campione a 12 mesi
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Differenze negli spettri Raman di EV derivati dalla saliva di pazienti con AD, PD, ATPD, PD prodromico e MCI nelle gamme spettrali 600-1800 cm-1 e 2600-3200 cm-1
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Dall'iscrizione alla valutazione di follow -up e alla seconda raccolta del campione a 12 mesi
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Biomarcatori NDD salivari
Lasso di tempo: Dall'iscrizione alla valutazione del follow -up e alla seconda raccolta del campione a 12 mesi
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Quantificazione dei marcatori correlati NDDS da parte della tecnologia SIMOA:
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Dall'iscrizione alla valutazione del follow -up e alla seconda raccolta del campione a 12 mesi
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Impronta salivario Raman dei pazienti dopo 1 anno
Lasso di tempo: Dall'iscrizione al follow -up e alla seconda raccolta del campione a 12 mesi
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Cambiamenti negli spettri Raman di saliva tra T0 (iscrizione) e T12 (1 anno dopo l'iscrizione) associati alla progressione della malattia.
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Dall'iscrizione al follow -up e alla seconda raccolta del campione a 12 mesi
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Salivary Ev Raman Impronta digitale dei pazienti dopo 1 anno
Lasso di tempo: Dall'iscrizione al follow -up e alla seconda raccolta del campione a 12 mesi
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Cambiamenti negli spettri Raman di EV derivati dalla saliva tra T0 (iscrizione) e T12 (1 anno dopo l'iscrizione) associati alla progressione della malattia.
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Dall'iscrizione al follow -up e alla seconda raccolta del campione a 12 mesi
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Correlazione dei dati Raman con la valutazione clinica
Lasso di tempo: Dall'iscrizione al follow -up a 12 mesi
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Correlazione tra dati spettrali di Saliva e Saliva derivati da EV a T0 e T12 e valutazione clinica (scala di valutazione della malattia cumulativa/CIRS; indice di Barthel modificato/MBI; Test cognitivo di Montreal; Refio di fluografia; Test del complesso di sabbia; Test di fluidità; Inventario/NPI della batteria frontale/FAB)
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Dall'iscrizione al follow -up a 12 mesi
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Correlazione dei dati Raman con i dati biomolecolari
Lasso di tempo: Dall'iscrizione al follow -up a 12 mesi
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Correlazione tra dati spettrali di saliva e saliva EV a T0 e T12 e quantificazione biomolecolare di i) asyn per PD, ATP e PPD; ii) Aβ1-42 per AD e MCI; iii) NFL per tutti i soggetti
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Dall'iscrizione al follow -up a 12 mesi
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Collaboratori e investigatori
Collaboratori
Investigatori
- Investigatore principale: Alice Gualerzi, PhD, IRCCS Fondazione Don Gnocchi
Pubblicazioni e link utili
Pubblicazioni generali
- Carlomagno C, Bertazioli D, Gualerzi A, Picciolini S, Andrico M, Roda F, Meloni M, Banfi PI, Verde F, Ticozzi N, Silani V, Messina E, Bedoni M. Identification of the Raman Salivary Fingerprint of Parkinson's Disease Through the Spectroscopic- Computational Combinatory Approach. Front Neurosci. 2021 Oct 26;15:704963. doi: 10.3389/fnins.2021.704963. eCollection 2021.
- Mangolini V, Gualerzi A, Picciolini S, Roda F, Del Prete A, Forleo L, Rossetto RA, Bedoni M. Biochemical Characterization of Human Salivary Extracellular Vesicles as a Valuable Source of Biomarkers. Biology (Basel). 2023 Jan 31;12(2):227. doi: 10.3390/biology12020227.
Studiare le date dei record
Studia le date principali
Inizio studio (Effettivo)
Completamento primario (Stimato)
Completamento dello studio (Stimato)
Date di iscrizione allo studio
Primo inviato
Primo inviato che soddisfa i criteri di controllo qualità
Primo Inserito (Effettivo)
Aggiornamenti dei record di studio
Ultimo aggiornamento pubblicato (Effettivo)
Ultimo aggiornamento inviato che soddisfa i criteri QC
Ultimo verificato
Maggiori informazioni
Termini relativi a questo studio
Parole chiave
Termini MeSH pertinenti aggiuntivi
- Sinucleinopatie
- Malattie del cervello
- Malattie del sistema nervoso centrale
- Malattie del sistema nervoso
- Disordini mentali
- Disturbi neurocognitivi
- Disturbi cognitivi
- Demenza
- Tauopatie
- Disturbi del movimento
- Malattie dei gangli basali
- Disfunzione cognitiva
- Malattia di Alzheimer
- Morbo di Parkinson
- Malattie Neurodegenerative
- Malattie parkinsoniane
Altri numeri di identificazione dello studio
- FDG_MINERVA
- CET 97/24 (Altro identificatore: CET Lombardia 4)
- FDG 17_17/09/2024 (Altro identificatore: IRCCS Fondazione Don Carlo Gnocchi)
Piano per i dati dei singoli partecipanti (IPD)
Hai intenzione di condividere i dati dei singoli partecipanti (IPD)?
Descrizione del piano IPD
Informazioni su farmaci e dispositivi, documenti di studio
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