Postprandiální metabolom a metabolická flexibilita

Zapsané předměty se sledují každý týden po dobu jednoho měsíce. Při každé návštěvě dotazník hodnotí vzory denního času aktivity týkající se energetických výdajů, obecného zdravotního stavu, včetně infekčních příznaků a potvrzení základních sociálních a demografických charakteristik. Příjem stravy je hodnocen pomocí dotazníku k frekvenci potravin a vícestupňovým 24hodinovým vyvoláním stravování pro kvantitativní analýzu. Pokud jsou přítomny příznaky infekce, jsou účastníci léčeni ad-hoc širokými antibiotiky. Antropometrie jsou získány. Subjekty budou poté randomizovány, aby obdržely metabolické výzvy v jiném pořadí. Postupy budou prováděny dříve (půst; 8-10 hodin) a po (postprandiální) spotřebě metabolických výzev. Vzorky kapilární krve (40 µ) se získávají ráno po 8hodinovém půstu a po spotřebě testovacího jídla. Chcete -li získat vzorek kapilární krve, sterilizujte prsten prstenu alkoholem a nechte jej vyschnout. Poté propíchněte oblast sterilní 2 mm dlouhý lancet. Jakmile je kapka krve vytvořena, je umístěna přímo do kazety Cardiocheck Plus®, aby se určil glukózový triglycerid, LDL-cholesterol, HDL-cholesterol a celkový cholesterol. Druhá kapka kapilární krve musí být umístěna na filtrační papír (S&S 903), dokud není kruh filtračního papíru naplněn krví, aby se nasytil papír po celou jeho tloušťku. Koncentrace inzulínu se stanoví podle protokolu sušené krve, která je standardizována v laboratoři. Provádí se také nepřímá kalorimetrie půstu. Po nepřímé kalorimetrii se provádí metabolická a hormonální reakce na testovací jídlo.

Každá výzva by měla být spotřebována do 15 minut. Po 5 minutách odpočinku bude nepřímá kalorimetrie postprandiálně a trvá 30 minut. Kapilární krev musí být získána v následujících dobách: 15-30-45-60-90 a 120 minut po požití potravy.

Složení živin pro příklad standardizovaného jídla a jídla.

• Výzva s vysokým obsahem uhlohydrátů: energie, 479,6 kcal; Uhlohydrát, 83,6%; Lipidy, 12,4% a protein, 4,0% (70 g horkého koláče, 100 g manga, 270 ml broskvového nektaru a 40 g jahodového džemu)
• Vysoká lipidová výzva: energie, 1043,4 kcal; Uhlohydrát, 4,9%; Lipidy, 86,8% a protein, 8,3% (60 g sýra Manchego, 25 g vajíčka, sušená, 24 g slaniny, 5 ml oleje, 65 g smetanového sýra, 70 g krému a 16 g poblano pepře)
• Výzva s vysokým obsahem bílkovin: energie, 441,3 kcal; Uhlohydrát, 1,6%; Lipidy, 5,1% a bílkoviny, 93,3% (2 Scoop Isopure Zero Carb, 180 g kuřecího prsu, 20 g salátu a 24 g ham krůtí prsa)

Stanovení metabolitů v sušené krvi pro stanovení koncentrace metabolitů (aminokyselin a acyl-karnitinů), musí být z filtračního papíru vyražen kruh průměru 3 mm a umístěn do 96-jamkové destičky. Přidejte 100 ul standardů acyl-karnitinu a aminokyselin ze soupravy Neobase PerkinElmer. Následně postupujte podle pokynů výrobce pro stanovení metabolitů kapalinovou chromatografií spojenou s hmotnostní spektrometrií (LC-MS).

Stanovení respiračního kvocientu (RQ) k určení respiračního kvocientu (RQ = VMAXCO2/ VMAXO2) a lipidových a uhlohydrátů oxidačních zkoušek bude podle pokynů dodavatele CO2 VMAX Encore 29 (KORR, INC, USA) použit. Zkoušky se neustále provádějí ráno (8: 00-9: 00 dopoledne) v termoneutrálním prostředí s kontrolovaným tlakem, vlhkostí a teplotou, s pacientem na zádech, ale vzhůru. Vyšetřovatelé zkoumají maximálně dva subjekty denně. Spotřeba kyslíku a produkce oxidu uhličitého byly získány za použití baldachýnu a byly monitorovány nepřetržitě po dobu 30 minut. Počáteční 10 minut měření je vyřazeno pro výpočet, aby se zajistila větší datová homogenita. Spotřeba O2 a produkce CO2 bude zaznamenána nepřetržitě po dobu 30 minut. Hodnoty VO2 a VCO2 budou použity v rovnici navržené je Weirem (energetické výdaje = [3,941 (VO2) + 1,11 (VCO2)] x 1440 min/den), považovaný za standardní metodu [34]. Navíc, jeden den před testem, jsou subjekty instruovány, aby se postily po dobu 8 hodin a nezapojily se do fyzické aktivity nebo konzumovaly kofein den před zkouškou. Všichni účastníci budou požádáni, aby jedli stejnou večeři v noci před každým testem. Večeře poskytuje 15% denního příjmu energie; 20 g proteinu, 7 g lipidů a 34 g uhlohydrátů)