Métabolome postprandial et flexibilité métabolique

Les sujets inscrits sont suivis chaque semaine pendant un mois. À chaque visite, un questionnaire évalue les schémas d'activité temporelle quotidiens pertinents pour la dépense énergétique, l'état de santé général, y compris les symptômes infectieux et la confirmation des caractéristiques sociales et démographiques de base. L'apport alimentaire est évalué par un questionnaire sur la fréquence alimentaire et un rappel alimentaire en plusieurs heures de 24 heures pour l'analyse quantitative. Si des symptômes d'infection sont présents, les participants sont traités avec de larges antibiotiques ad hoc. L'anthropométrie est obtenue. Les sujets seront ensuite randomisés pour recevoir les défis métaboliques dans un ordre différent. Les procédures seront effectuées avant (à jeun; 8 à 10 heures) et après la consommation (postprandiale) des défis métaboliques. Des échantillons de sang capillaire (40 µs) sont obtenus le matin après un jeûne de 8 heures et après la consommation de repas d'essai. Pour obtenir l'échantillon de sang capillaire, stérilisez l'annulaire avec de l'alcool et laissez-le sécher. Ensuite, percez la zone avec une lancette stérile de 2 mm de long. Une fois la goutte de sang formée, elle est placée directement dans la cassette Carocheck Plus® pour déterminer les triglycérides de glucose, le cholestérol LDL, le cholestérol HDL et le cholestérol total. Une deuxième goutte de sang capillaire doit être placée sur un papier filtre (S&S 903) jusqu'à ce qu'un cercle de papier filtre soit rempli de sang pour saturer le papier tout au long de son épaisseur. La concentration en insuline doit être déterminée en suivant le protocole de sang séché, qui est standardisé en laboratoire. La calorimétrie à jeun indirecte est également effectuée. Après la calorimétrie indirecte, la réponse métabolique et hormonale au repas d'essai est effectuée.

Chaque défi doit être consommé dans les 15 minutes. Après 5 minutes de repos, la calorimétrie indirecte sera postprandiale, dure 30 minutes. Le sang capillaire doit être obtenu aux heures suivantes: 15-30-45-60-90 et 120 min après l'ingestion de nourriture.

Composition en nutriments de repas et d'exemple de repas standardisés.

• Défi sur les glucides élevés: énergie, 479,6 kcal; Glucides, 83,6%; Lipides, 12,4% et protéines, 4,0% (70 g de gâteau chaud, 100 g de mangue, 270 ml de nectar de pêche et 40 g de confiture de fraises)
• Défi lipidique élevé: énergie, 1043,4 kcal; Glucides, 4,9%; Lipides, 86,8% et protéines, 8,3% (60 g de fromage manchego, 25 g d'oeuf, blanc, séché, 24 g de bacon, 5 ml d'huile, 65 g de fromage à la crème, 70 g de crème et 16 g de poivre de Poblano)
• Challenge à haute protéine: énergie, 441,3 kcal; Glucides, 1,6%; Lipides, 5,1% et protéines, 93,3% (2 Scoop Isopure Zero Carb, 180 g de poitrine de poulet, 20 g de laitue et 24 g de poitrine de dinde de jambon)

La détermination des métabolites dans le sang séché pour déterminer la concentration des métabolites (acides aminés et acyl-carnitines), un cercle de 3 mm de diamètre doit être percuté du papier filtre et placé dans une plaque à 96 puits. Ajouter 100 µl des normes acyl-carnitine et acides aminés du kit Neobase Perkinelmer. Par la suite, suivez les instructions du fabricant pour déterminer les métabolites par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse (LC-MS).

La détermination du quotient respiratoire (RQ) pour déterminer le quotient respiratoire (RQ = VMAXCO2 / VMAXO2) et les examens d'oxydation des lipides et des glucides, le logiciel de calorimètre du système CO2 CO2 CO2 CO2 29 (Korr, Inc, UT) sera utilisé selon les instructions du fournisseur. Les examens sont invariablement effectués le matin (8h00 à 9h00 du matin) dans un environnement thermoneutre avec une pression, une humidité et une température contrôlées, avec le patient en décubitus dorsal mais éveillé. Les enquêteurs examinent un maximum de deux sujets par jour. La consommation d'oxygène et la production de dioxyde de carbone ont été obtenues à l'aide d'une canopée et ont été surveillées en continu pendant 30 minutes. Les 10 minutes initiales de la mesure sont rejetées pour le calcul pour assurer une plus grande homogénéité des données. La consommation d'O2 et la production de CO2 seront enregistrées en continu pendant 30 min. Les valeurs VO2 et VCO2 seront utilisées dans l'équation proposée par Weir (dépense énergétique = [3,941 (VO2) + 1.11 (VCO2)] x 1440 min / jour), considéré comme la méthode standard [34]. De plus, un jour avant le test, les sujets sont invités à jeûner pendant 8 heures et à ne pas s'engager dans l'activité physique ou à consommer de la caféine la veille de l'examen. Tous les participants seront invités à manger le même dîner la veille de chaque test. Le dîner offre 15% de l'apport énergétique quotidien; 20 g de protéines, 7 g de lipides et 34 g de glucides)