Metaboloma postprandiale e flessibilità metabolica

I soggetti iscritti vengono seguiti ogni settimana per un mese. Ad ogni visita, un questionario valuta i modelli di attività quotidiana di attività rilevanti per la spesa energetica, lo stato di salute generale, compresi i sintomi infettivi e la conferma delle caratteristiche di base sociali e demografiche. L'assunzione dietetica è valutata da un questionario sulla frequenza alimentare e da un richiamo dietetico a più fasi di 24 ore per l'analisi quantitativa. Se sono presenti sintomi di infezione, i partecipanti vengono trattati con ampi antibiotici ad hoc. Si ottengono antropometria. I soggetti saranno quindi randomizzati a ricevere le sfide metaboliche in un ordine diverso. Le procedure verranno eseguite prima (digiuno; 8-10 ore) e dopo il consumo (postprandiale) delle sfide metaboliche. I campioni di sangue capillare (40 µ) vengono ottenuti al mattino dopo un digiuno di 8 ore e dopo il consumo di pasti di prova. Per ottenere il campione di sangue capillare, sterilizzare l'anulare con alcol e lasciarlo asciugare. Quindi, perfora l'area con una lancetta sterile lunga 2 mm. Una volta formata la goccia di sangue, viene posizionata direttamente nella cassetta CardioCheck Plus® per determinare il trigliceride di glucosio, il colesterolo LDL, il colesterolo HDL e il colesterolo totale. Una seconda goccia di sangue capillare deve essere posizionata su una carta da filtro (S&S 903) fino a quando un cerchio di carta da filtro è riempito di sangue per saturare la carta per tutto il suo spessore. La concentrazione di insulina deve essere determinata seguendo il protocollo per il sangue secco, che è standardizzato in laboratorio. Viene anche eseguita la calorimetria a digiuno indiretto. Dopo la calorimetria indiretta, viene eseguita la risposta metabolica e ormonale al pasto di prova.

Ogni sfida dovrebbe essere consumata entro 15 minuti. Dopo 5 minuti di riposo, la calorimetria indiretta sarà postprandialmente, della durata di 30 minuti. Il sangue capillare deve essere ottenuto nei tempi seguenti: 15-30-45-60-90 e 120 minuti dopo l'ingestione di cibo.

Composizione nutrizionale di pasti standardizzati e esempio di pasti.

• Alta sfida dei carboidrati: energia, 479,6 kcal; Carboidrati, 83,6%; Lipidi, 12,4% e proteina, 4,0% (70 g di cake a caldo, 100 g di mango, 270 ml di nettare di pesca e 40 g di marmellata di fragole)
• Alta sfida lipidica: energia, 1043,4 kcal; Carboidrati, 4,9%; Lipidi, 86,8% e proteine, 8,3% (60 g di formaggio di manchego, 25 g di uova, bianco, secco, 24 g di pancetta, 5 ml di olio, 65 g di crema di formaggio, 70 g di crema e 16 g di pepe di cavello)
• Sfida ad alta proteina: energia, 441,3 kcal; Carboidrati, 1,6%; Lipidi, 5,1% e proteina, 93,3% (2 scoop Isopure Zero Carb, 180 g di petto di pollo, 20 g di lattuga e 24 g di petto di tacchino del prosciutto)

Determinazione dei metaboliti nel sangue secco per determinare la concentrazione di metaboliti (aminoacidi e acil-carnitine), un cerchio di diametro di 3 mm deve essere puntato fuori dalla carta da filtro e posizionato in una piastra da 96 pozzetti. Aggiungi 100 µL di standard di acil-carnitina e aminoacidi dal kit perkinelmer neobase. Successivamente, seguire le istruzioni del produttore per determinare i metaboliti mediante cromatografia liquida accoppiata alla spettrometria di massa (LC-MS).

Determinazione del quoziente respiratorio (RQ) per determinare il quoziente respiratorio (RQ = VMAXCO2/ VMAXO2) e gli esami di ossidazione lipidici e carboidrati, il software di calorimetro del sistema CARDIO CO2 VMAX ENMAX 29 (KORR, INC, UT, USA) saranno utilizzati secondo le istruzioni del fornitore. Gli esami vengono eseguiti invariabilmente al mattino (8: 00-9: 00) in un ambiente termoneutro con pressione, umidità e temperatura controllate, con il paziente supino ma sveglio. Gli investigatori esaminano un massimo di due soggetti al giorno. Il consumo di ossigeno e la produzione di anidride carbonica sono stati ottenuti utilizzando un baldacchino e sono stati monitorati continuamente per 30 minuti. I 10 minuti iniziali della misurazione vengono scartati per il calcolo per garantire una maggiore omogeneità dei dati. Il consumo di O2 e la produzione di CO2 saranno registrati continuamente per 30 minuti. I valori VO2 e VCO2 verranno utilizzati nell'equazione proposta da Weir (Energy Spese = [3.941 (VO2) + 1.11 (VCO2)] x 1440 min/giorno), considerato come metodo standard [34]. Inoltre, un giorno prima del test, ai soggetti viene chiesto di digiunare per 8 ore e non impegnarsi in attività fisica o consumare caffeina il giorno prima dell'esame. A tutti i partecipanti verrà chiesto di cenare la stessa cena la sera prima di ogni test. La cena offre il 15% dell'assunzione giornaliera di energia; 20 g di proteine, 7 g di lipidi e 34 g di carboidrati)