POSTRANDIAL Metabolome i elastyczność metaboliczna

Zapisane tematy są obserwowane co tydzień przez miesiąc. Podczas każdej wizyty kwestionariusz ocenia codzienne wzorce aktywności czasowej istotne dla wydatków energetycznych, ogólny stan zdrowia, w tym objawy zakaźne oraz potwierdzenie podstawowych cech społecznych i demograficznych. Spożycie diety jest oceniane na podstawie kwestionariusza częstotliwości żywności i wieloetapowego 24-godzinnego wycofania diety do analizy ilościowej. Jeśli występują objawy zakażenia, uczestnicy są leczeni szerokimi antybiotykami ad hoc. Uzyskuje się antropometrię. Badani zostaną następnie losowo przydzieleni do otrzymania wyzwań metabolicznych w innej kolejności. Procedury zostaną wykonane wcześniej (post; 8-10 godzin) i po (poposiłkowej) spożyciu wyzwań metabolicznych. Próbki krwi naczyń włosowatych (40 µ) uzyskuje się rano po 8-godzinnym postu i po zużyciu posiłku testowego. Aby uzyskać próbkę krwi naczyń włosowatych, sterylizuj palec serdeczny alkoholem i pozwól jej wyschnąć. Następnie przebij obszar sterylnym lancetem o długości 2 mm. Po utworzeniu kropli krwi umieszcza się ją bezpośrednio w kasecie CardioCheck Plus® w celu określenia trójglicerydu glukozy, cholesterolu LDL, cholesterolu HDL i całkowitego cholesterolu. Drugą kroplę krwi naczyń włosowatych należy umieścić na bibule filtracyjnym (S&S 903), aż okrąg bibuły filtracyjnej zostanie wypełniony krwią, aby nasycić papier w całej grubości. Stężenie insuliny należy określić zgodnie z protokołem suszonej krwi, który jest znormalizowany w laboratorium. Przeprowadzana jest również pośrednia kalorymetria na czczo. Po pośredniej kalorymetrii wykonywana jest odpowiedź metaboliczna i hormonalna na posiłek testowy.

Każde wyzwanie powinno zostać wykorzystane w ciągu 15 minut. Po 5 minutach odpoczynku pośrednia kalorymetria odbędzie się poposiłście, trwające 30 minut. Krew naczyń włosowatych należy uzyskać w następujących czasach: 15-30-45-60-90 i 120 minut po spożyciu żywności.

Skład składników odżywczych standardowego przykładu posiłku i posiłku.

• Wysokie wyzwanie węglowodanów: energia, 479,6 kcal; Węglowodan, 83,6%; Lipidy, 12,4% i białko, 4,0% (70 g hot-cake, 100 g mango, 270 ml nektaru brzoskwiniowego i 40 g dżemu truskawkowego)
• Wysokie wyzwanie lipidowe: Energy, 1043,4 kcal; Węglowodan, 4,9%; Lipidy, 86,8% i białko, 8,3% (60 g sera Manchego, 25 g jaja, białe, suszone, 24 g boczku, 5 ml oleju, 65 g sera śmietanowego, 70 g śmietany i 16 g publano pieprzu)
• Wysokie wyzwanie białka: Energy, 441,3 kcal; Węglowodan, 1,6%; Lipidy, 5,1% i białko, 93,3% (2 Scoop Isopure Zero Carb, 180 g piersi kurczaka, 20 g sałaty i 24 g piersi z indyka szynki)

Określenie metabolitów we wysuszonej krwi w celu określenia stężenia metabolitów (aminokwasów i acylo-karnityn), okrąg o średnicy 3 mm należy wykręcić z bibuły filtracyjnej i umieszczać w 96-studzienkowej płytce. Dodaj 100 µl standardów acylo-karnityny i aminokwasów z zestawu neobazy Perkinelmer. Następnie postępuj zgodnie z instrukcjami producenta określania metabolitów metodą chromatografii cieczowej w połączeniu ze spektrometrią mas (LC-MS).

Określenie ilorazu oddechowego (RQ) w celu określenia iloraz oddechowych (RQ = VmaxCO2/ Vmaxo2) i lipidów i utleniania węglowodanów, zostanie zastosowane oprogramowanie kalorymetowe systemu Cardio CO2 Vmax 29 (Korr, Inc, UT, USA). Badania są niezmiennie przeprowadzane rano (8: 00-9: 00 AM) w środowisku termoneutralnym z kontrolowanym ciśnieniem, wilgotnością i temperaturą, z pacjentem na wznak, ale obudzonych. Śledczy badają maksymalnie dwóch osób dziennie. Zużycie tlenu i wytwarzanie dwutlenku węgla uzyskano przy użyciu baldachimu i monitorowano w sposób ciągły przez 30 minut. Początkowe 10 minut pomiaru są odrzucane do obliczeń w celu zapewnienia większej jednorodności danych. Zużycie O2 i produkcja CO2 będą rejestrowane w sposób ciągły przez 30 minut. Wartości VO2 i VCO2 zostaną wykorzystane w równaniu zaproponowanym przez Weir (wydatki energetyczne = [3.941 (VO2) + 1.11 (VCO2)] x 1440 min/dzień), uważany za metodę standardową [34]. Dodatkowo, jeden dzień przed testem, badani są pouczeni, aby pośpiesz przez 8 godzin i nie angażować się w aktywność fizyczną ani nie konsumowali kofeiny na dzień przed egzaminem. Wszyscy uczestnicy zostaną poproszeni o zjedzenie tego samego obiadu w noc przed każdym testem. Kolacja zapewnia 15% codziennego spożycia energii; 20 g białka, 7 g lipidów i 34 g węglowodanów)