Metaboloma posprandial y flexibilidad metabólica

Los sujetos inscritos se siguen cada semana durante un mes. En cada visita, un cuestionario evalúa los patrones de actividad de tiempo diario relevantes para el gasto de energía, el estado de salud general, incluidos los síntomas infecciosos y la confirmación de las características sociales y demográficas básicas. La ingesta dietética se evalúa mediante un cuestionario de frecuencia de alimentos y un retiro dietético de varios pasos para el análisis cuantitativo. Si hay síntomas de infección, los participantes son tratados con antibióticos anchos ad-hoc. Se obtienen la antropometría. Los sujetos serán aleatorizados para recibir los desafíos metabólicos en un orden diferente. Los procedimientos se realizarán antes (en ayunas; 8-10 horas) y después del consumo (posprandial) de los desafíos metabólicos. Las muestras de sangre capilar (40 µ) se obtienen en la mañana después de un ayuno de 8 horas y después del consumo de comida de prueba. Para obtener la muestra de sangre capilar, esterilice el dedo anular con alcohol y deje que se seque. Luego, perfore el área con una lanceta estéril de 2 mm de largo. Una vez que se forma la gota de sangre, se coloca directamente en el casete Cardiocheck Plus® para determinar el triglicérido de glucosa, el colesterol LDL, el colesterol HDL y el colesterol total. Se colocará una segunda gota de sangre capilar en un papel de filtro (S&S 903) hasta que se llene un círculo de papel de filtro con sangre para saturar el papel a lo largo de su espesor. La concentración de insulina se determinará siguiendo el protocolo de sangre seca, que está estandarizada en el laboratorio. La calorimetría indirecta de ayuno también se realiza. Después de la calorimetría indirecta, se realiza la respuesta metabólica y hormonal a la comida de prueba.

Cada desafío debe consumirse en 15 minutos. Después de 5 minutos de descanso, la calorimetría indirecta será posprandialmente, que dura 30 minutos. La sangre capilar se obtendrá en los siguientes momentos: 15-30-45-60-90 y 120 minutos después de la ingestión de alimentos.

Composición de nutrientes del ejemplo estandarizado de comida y comida.

• Desafío de alto carbohidrato: energía, 479.6 kcal; Carbohidratos, 83.6%; Lípidos, 12.4% y proteína, 4.0% (70 g de pastel caliente, 100 g de mango, 270 ml de néctar de durazno y 40 g de mermelada de fresa)
• High Lipid Challenge: Energy, 1043.4 Kcal; Carbohidratos, 4.9%; Lípidos, 86.8%, y proteína, 8.3% (60 g de queso Manchego, 25 g de huevo, blanco, seco, 24 g de tocino, 5 ml de aceite, 65 g de queso crema, 70 g de crema y 16 g de pimienta poblano)
• Desafío de alta proteína: energía, 441.3 kcal; Carbohidratos, 1.6%; Lípidos, 5.1%, y proteína, 93.3% (2 capas de carbohidratos cero isopure, 180 g de pechuga de pollo, 20 g de lechuga y 24 g de pechuga de pavo de jamón)

Determinación de los metabolitos en la sangre seca para determinar la concentración de metabolitos (aminoácidos y acil-carnitinas), un círculo de 3 mm de diámetro se eliminará del papel del filtro y se colocará en una placa de 96 pocillos. Agregue 100 µl de los estándares de acil-carnitina y aminoácidos del kit Neobase Perkinelmer. Posteriormente, siga las instrucciones del fabricante para determinar metabolitos por cromatografía líquida junto con espectrometría de masas (LC-MS).

Determinación del cociente respiratorio (RQ) para determinar el cociente respiratorio (RQ = VMAXCO2/ VMAXO2) y los exámenes de oxidación de lípidos y carbohidratos, el Cardio Coach CO2 Vmax Encore 29 System Calorímetro Software (Korr, Inc, UT, EE. UU.) Se utilizará de acuerdo con las instrucciones del proveedor. Los exámenes se realizan invariablemente en la mañana (8: 00-9: 00 am) en un entorno termoneutral con presión, humedad y temperatura controladas, con el paciente supino pero despierto. Los investigadores examinan un máximo de dos sujetos por día. El consumo de oxígeno y la producción de dióxido de carbono se obtuvieron usando un dosel y se monitorearon continuamente durante 30 minutos. Los 10 minutos iniciales de la medición se descartan para el cálculo para garantizar una mayor homogeneidad de datos. El consumo de O2 y la producción de CO2 se registrarán continuamente durante 30 minutos. Los valores de VO2 y VCO2 se utilizarán en la ecuación propuesta por Weir (gasto de energía = [3.941 (VO2) + 1.11 (VCO2)] x 1440 min/día), considerado como el método estándar [34]. Además, un día antes de la prueba, los sujetos reciben instrucciones de ayunar durante 8 horas y no participar en actividad física ni consumir cafeína el día anterior al examen. Se les pedirá a todos los participantes que coman la misma cena la noche anterior a cada prueba. La cena proporciona el 15% de la ingesta diaria de energía; 20 g de proteína, 7 g de lípidos y 34 g de carbohidratos)