Postprandial metabolom og metabolsk fleksibilitet

Påmeldte fag følges hver uke i en måned. Ved hvert besøk vurderer et spørreskjema daglige tidsaktivitetsmønstre som er relevante for energiforbruk, generell helsetilstand, inkludert smittsomme symptomer og bekreftelse av grunnleggende sosiale og demografiske egenskaper. Kostholdsinntaket blir vurdert av et spørreskjema for matfrekvens og en flertrinns 24-timers kostholdsinnkalling for kvantitativ analyse. Hvis symptomer på infeksjon er til stede, blir deltakerne behandlet med ad-hoc brede antibiotika. Antropometri oppnås. Forsøkspersonene vil da bli randomisert til å motta de metabolske utfordringene i en annen rekkefølge. Prosedyrene vil bli utført før (faste; 8-10 timer) og etter (postprandial) forbruk av de metabolske utfordringene. Kapillære blodprøver (40μ) oppnås om morgenen etter en 8-timers faste og etter testmåltidforbruk. For å oppnå kapillærblodprøven, steriliser ringfingeren med alkohol og la den tørke. Punkter deretter området med en steril 2 mm lang lancet. Når blodfallet er dannet, plasseres det direkte i CardioCeck Plus®-kassetten for å bestemme glukosetriglyserid, LDL-kolesterol, HDL-kolesterol og totalt kolesterol. En annen dråpe kapillærblod skal plasseres på et filterpapir (S&S 903) til en sirkel med filterpapir er fylt med blod for å mette papiret gjennom tykkelsen. Insulinkonsentrasjon skal bestemmes etter protokollen for tørket blod, som er standardisert i laboratoriet. Indirekte fastende kalorimetri utføres også. Etter den indirekte kalorimetrien utføres den metabolske og hormonelle responsen på testmåltidet.

Hver utfordring bør konsumeres innen 15 minutter. Etter 5 minutters hvile vil indirekte kalorimetri være postprandialt og vare i 30 minutter. Kapillærblod skal oppnås ved følgende tider: 15-30-45-60-90 og 120 minutter etter inntak av mat.

Næringssammensetning av standardisert måltid og måltideksempel.

• Høy karbohydratutfordring: energi, 479,6 kcal; Karbohydrat, 83,6%; Lipider, 12,4% og protein, 4,0% (70 g varmt kake, 100 g mango, 270 ml ferskennektar og 40 g jordbærsyltetøy)
• High Lipid Challenge: Energy, 1043,4 Kcal; Karbohydrat, 4,9%; Lipider, 86,8% og protein, 8,3% (60 g manchego ost, 25 g egg, hvit, tørket, 24 g bacon, 5 ml olje, 65 g kremost, 70 g krem ​​og 16 g poblano pepper)
• High Protein Challenge: Energy, 441,3 Kcal; Karbohydrat, 1,6%; Lipider, 5,1% og protein, 93,3% (2 Scoop isopure null karbohydrater, 180 g kyllingbryst, 20 g salat og 24 g skinke kalkunbryst)

Bestemmelse av metabolitter i tørket blod For å bestemme konsentrasjonen av metabolitter (aminosyrer og acylkarnitiner) skal en sirkel med 3 mm diameter stanses ut av filterpapiret og plasseres i en 96-brønners plate. Tilsett 100 ul av acyl-karnitin- og aminosyrestandardene fra Neobase PerkinElmer-settet. Følg deretter produsentens instruksjoner for å bestemme metabolitter ved væskekromatografi koblet til massespektrometri (LC-MS).

Bestemmelse av respirasjonskvotienten (RQ) for å bestemme respirasjonskvotienten (RQ = VMAXCO2/ VMAXO2) og lipid- og karbohydratoksidasjonsundersøkelser, vil Cardio Coach CO2 Vmax Encore 29 System Calorimeter Software (Kor, Inc, UT, USA) brukes i henhold til instruksjonene til leverandøren. Undersøkelser utføres alltid om morgenen (8: 00-9: 00) i et termoneutralt miljø med kontrollert trykk, fuktighet og temperatur, med pasientens rygg, men våken. Etterforskerne undersøker maksimalt to fag per dag. Oksygenforbruk og karbondioksidproduksjon ble oppnådd ved bruk av en kalesje og ble overvåket kontinuerlig i 30 minutter. De første 10 minuttene av målingen kastes for beregningen for å sikre større datahomogenitet. O2 -forbruk og CO2 -produksjon vil bli registrert kontinuerlig i 30 minutter. VO2- og VCO2 -verdier vil bli brukt i ligningen foreslått av Weir (Energy Expenditure = [3.941 (VO2) + 1.11 (VCO2)] x 1440 min/dag), betraktet som standardmetoden [34]. I tillegg, en dag før testen, blir forsøkspersoner instruert om å faste i 8 timer og ikke delta i fysisk aktivitet eller konsumere koffein dagen før eksamen. Alle deltakerne vil bli bedt om å spise den samme middagen kvelden før hver test. Middag gir 15% av det daglige energiinntaket; 20 g protein, 7 g lipider og 34 g karbohydrater)