Postprandial metabolom og metabolisk fleksibilitet

Tilmeldte emner følges hver uge i en måned. Ved hvert besøg vurderer et spørgeskema daglige tidsaktivitetsmønstre, der er relevante for energiforbruget, generel sundhedsstatus, herunder infektiøse symptomer og bekræftelse af grundlæggende sociale og demografiske egenskaber. Diætindtag vurderes ved et spørgeskema for fødevarefrekvens og et multi-trin 24-timers diæt tilbagekaldelse til kvantitativ analyse. Hvis der er symptomer på infektion, behandles deltagerne med ad-hoc brede antibiotika. Antropometri opnås. Emner bliver derefter randomiseret til at modtage de metaboliske udfordringer i en anden rækkefølge. Procedurerne udføres før (faste; 8-10 timer) og efter (postprandial) forbrug af de metaboliske udfordringer. Kapillære blodprøver (40μ) opnås om morgenen efter en 8-timers faste og efter testmåltidsforbrug. For at opnå kapillærblodprøven skal du sterilisere ringfingeren med alkohol og lade den tørre. Derefter punkterer området med en steril 2 mm lang lancet. Når bloddråbet er dannet, placeres det direkte i Cardiocheck Plus®-kassetten for at bestemme glukose triglycerid, LDL-kolesterol, HDL-kolesterol og total kolesterol. En anden dråbe kapillærblod skal placeres på et filterpapir (S&S 903), indtil en cirkel af filterpapir er fyldt med blod for at mætte papiret i hele dets tykkelse. Insulinkoncentration bestemmes efter protokollen for tørret blod, der er standardiseret i laboratoriet. Indirekte fastende kalorimetri udføres også. Efter den indirekte kalorimetri udføres den metaboliske og hormonelle respons på testmåltidet.

Hver udfordring skal forbruges inden for 15 minutter. Efter 5 minutters hvile vil indirekte kalorimetri være postprandialt, der varer 30 minutter. Kapillærblod skal opnås på de følgende tidspunkter: 15-30-45-60-90 og 120 minutter efter indtagelse af mad.

Næringssammensætning af standardiseret måltid og måltidseksempel.

• Høj kulhydratudfordring: energi, 479,6 kcal; Kulhydrat, 83,6%; Lipider, 12,4% og protein, 4,0% (70 g varmkage, 100 g mango, 270 ml fersken nektar og 40 g jordbærsyltetøj)
• High Lipid Challenge: Energy, 1043,4 kcal; Kulhydrat, 4,9%; Lipider, 86,8% og protein, 8,3% (60 g Manchego -ost, 25 g æg, hvid, tørret, 24 g bacon, 5 ml olie, 65 g flødeost, 70 g fløde og 16 g poblano -peber)
• High Protein Challenge: Energy, 441,3 kcal; Kulhydrat, 1,6%; Lipider, 5,1% og protein, 93,3% (2 Scoop Isopure Zero Carb, 180 g kyllingebryst, 20 g salat og 24 g skinke kalkunbryst)

Bestemmelse af metabolitter i tørret blod for at bestemme koncentrationen af ​​metabolitter (aminosyrer og acyl-carnitiner), en cirkel med en diameter på 3 mm skal stanses ud af filterpapiret og anbringes i en 96-brønds plade. Tilsæt 100 ul af acyl-carnitin- og aminosyrestandarderne fra Neobase Perkinelmer-kittet. Følg derefter producentens instruktioner til bestemmelse af metabolitter ved væskekromatografi koblet til massespektrometri (LC-MS).

Bestemmelse af respirationskvotienten (RQ) til bestemmelse af respirationskvotienten (RQ = VMAXCO2/ VMAXO2) og Lipid- og kulhydratoxidationsundersøgelser, vil cardio -coach CO2 Vmax Encore 29 System Calorimeter Software (Korr, Inc, UT, USA) blive brugt i henhold til instruktionerne i leverandøren. Undersøgelser udføres altid om morgenen (8: 00-9: 00 AM) i et termoneutralt miljø med kontrolleret tryk, fugtighed og temperatur med patientens liggende men vågen. Efterforskerne undersøger maksimalt to emner om dagen. Oxygenforbrug og carbondioxidproduktion blev opnået under anvendelse af en baldakin og blev overvåget kontinuerligt i 30 minutter. De første 10 minutter af målingen kasseres til beregningen for at sikre større datahomogenitet. O2 -forbrug og CO2 -produktion registreres kontinuerligt i 30 minutter. VO2- og VCO2 -værdier vil blive brugt i ligningen foreslået af Weir (Energy Expenditure = [3.941 (VO2) + 1,11 (VCO2)] x 1440 min/dag), betragtes som standardmetoden [34]. Derudover, en dag før testen, instrueres emner om at faste i 8 timer og ikke deltage i fysisk aktivitet eller forbruge koffein dagen før eksamen. Alle deltagere bliver bedt om at spise den samme middag natten før hver test. Middagen giver 15% af det daglige energiindtag; 20 g protein, 7 g lipider og 34 g kulhydrater)